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淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及作用机理研究

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毕业论文范文题目：淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及作用机理研究，论文范文关键词：淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及作用机理研究
淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及作用机理研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：学习记忆障碍是衰老过程中最常见的神经系统衰老症状,其中最常见的种类是阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)。流行病学调查表明,AD的发病与女性雌激素水平降低、缺乏有关。临床试验表明,雌激素替代治疗可以改善AD患者的认知能力,但由于可能出现的严重副作用,人们开始关注雌激素效应、并能防止雌激素替代治疗出现的副作用的植物雌激素。临床使用表明中药淫羊藿具有改善认知的功能,近年来发现它具有较强的雌激素活性。淫羊藿苷(Icariin,ICA)为淫羊藿的主要活性成分,其体内代谢产物体外实验具有明显的雌激素样作用,且可被雌激素受体拮抗剂所阻断。快速老化小鼠SAMP8(Senescence-acceleratedmouseprone8,SAMP8)是目前较理想的研究衰老相关的认知障碍动物模型,目前SAMP8已被广泛用于研究衰老相关的学习记忆障碍及其发生机制、评价抗哀老及改善学习记忆功能药物等。文献研究表明雌性SAMP8在衰老过程中表现出血清雌二醇(Estradiol,E_2)水平显著性降低,提示SAMP8学习记忆障碍可能与其体内雌激素水平低下有关。本研究以快速老化小鼠SAMP8为模型,观察连续12周灌胃给予ICA对SAMP8学习记忆障碍的影响和雌激素相关作用机制并探讨SAMP8血清雌激素水平与学习记忆障碍的相关性,同时应用临床治疗AD一线药乙酰胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐(Donepezil,DON)、及雌激素己烯雌酚(Diethylstibestrol,DES)作为阳性对照药对本模型进行相应的评价。第一部分:淫羊藿及主要成分ICA雌激素样作用研究目的:验证淫羊藿及其主要成分ICA在小鼠体内是否具有雌激素活性。方法:应用小鼠子宫增重法分别评价给予淫羊藿水煎液(10、20、40g/kg)灌胃2周对昆明属(KM)小鼠、ICA(75、150mg/kg)灌胃给药12周对SAMP8子宫湿重（略..）和血清E_2水平的影响,并采用DES作为阳性对照药。实验均设正常对照组、阳性对照组和给药组。结果:淫羊藿水煎液可显著增加KM小鼠的子宫湿重和血清E_2水平;ICA可显著增加SAMP8的血清E_2水平,但对子宫湿重没有明显影响。结论:淫羊藿水煎液具有较强的雌激素活性,其主要化学成分ICA也具有一定的雌激素活性。第二部分:ICA对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响目的:探讨ICA对SAMP8空间学习记忆和被动反应能力的影响。方法:以抗快速老化小鼠SAMR1(Senescence-acceleratedresistantmouse1,SAMR1)为正常对照,应用Morris水迷宫和跳台实验观察ICA(75、150mg/kg)灌胃给药12周后对SAMP8在定位航行实验中的潜伏期、在空间搜索实验中平台象限停留时间和穿越次数、在跳台实验中的潜伏期。阳性药采用乙酰胆碱酯酶抑制剂多奈哌齐DON(1.0mg/kg)和雌激素己烯雌酚DES(0.2mg/kg)。结果:与SAMR1比较,SAMP8在定位航行实验中的潜伏期明显延长、在空间搜索实验中平台象限的停留时间和穿越次数明显缩短或减少、在跳台实验中跳下跳台的潜伏期缩短;连续12周灌胃给予ICA后可以显著缩短SAMP8在定位航行实验中的潜伏期、延长或增加在空间搜索实验中象限的停留时间和穿越次数、延长在跳台实验中跳下跳台的潜伏期。阳性药DON和DES均能显著改善SAMP8在行为学实验中的学习成绩。结论:SAMP8表现为空间学习记忆障碍和被动反应迟缓;给予ICA可以显著改善SAMP8的空间学习记忆能力和被动反应能力,提示ICA对防治AD具有较好的开发前景。第三部分:ICA对快速老化小鼠SAMP8胆碱能系统的影响目的:探讨ICA对SAMP8胆碱能系统的影响。方法:动物分组和给药同第二部分。ICA灌胃给药12周后检测SAMP8海马中乙酰胆碱酯酶(AC（本文此处忽略..）hE)活性(比色法)、乙酰胆碱(ACh)含量(Elisa法)、M-胆碱能受体结合力(M-cholinoceptorbindingcapacity,MCBC)(Elisa法)。结果:与SAMR1比较,SAMP8海马中AChE活性没有明显变化、ACh含量减少、MCBC结合力降低;连续12周灌胃给予ICA后可以增加SAMP8海马中ACh含量、升高MCBC结合力,对AChE活性没有明显影响。结论:SAMP8学习记忆障碍与其胆碱能系统功能病损密切相关;ICA改善SAMP8学习记忆障碍与其改善胆碱能系统功能的有关。第四部分:ICA对快速老化小鼠SAMP8海马中神经递质的影响目的:探讨ICA对SAMP8海马中单胺类递质和氨基酸类递质的影响。方法:动物分组和给药同第二部分。运用高效液相——电化学法(HPLC-electrochemicaldetection,HPLC-ECD)检测SAMP8海马中:①单胺类递质多巴胺(DA)及其代谢产物二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)含量。②氨基酸类递质天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、甘氨酸(Gly)、牛磺酸(Tau)和γ-氨基丁酸(GABA)含量。结果:与SAMR1比较,SAMP8海马中:①单胺类递质含量下降,表现为DA、5-HT及其代谢产物5-HIAA和NE含量减少:连续12周灌胃给予ICA后,可显著增加SAMP8脑内这些递质的含量。②氨基酸类递质代谢平衡失调,表现为Asp、GABA含量明显减少,Glu、Gln含量明显增加,Glu/GABA比值升高,Tau、Gly含量没有明显变化:连续12周灌胃给予ICA后可以增加SAMP8海马中Asp、GABA含量、减少Glu、Gln含量,降低Glu/GABA比值,对Tau、Gly含量没有明显影响。结论:SAMP8学习记忆功能障碍（略..）与其海马中单胺类递质含量减少、兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸类递质平衡失调密切相关;ICA通过增加SAMP8海马中单胺类递质含量、调节兴奋性氨基酸与抑制性氨基酸递质代谢平衡达到改善学习记忆的作用。第五部分:ICA对快速老化小鼠SAMP8脑组织中神经胶质酸性蛋白GFAP阳性星形胶质细胞的影响目的:探讨ICA对SAMP8脑组织中神经胶质酸性蛋白(Glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)阳性星形胶质细胞的影响。方法:动物分组和给药同第二部分。应用免疫组织化学染色法显微镜下观察ICA灌胃给药12周后SAMP8脑组织切片中GFAP阳性细胞的形态,同时采用IPP5.1图像分析软件计算海马CA1、CA3和DG(Dentategyrus)区的免疫反应阳性神经细胞数目。结果:GFAP阳性细胞表现为胞核不着色,胞质及突起染成棕褐色,阳性产物随细胞突起分布,显示出细胞的蜘蛛状分支轮廓:GFAP阳性细胞主要分布在海马DG区,CA1、CA3次之,皮层分布数量稀少。与SAMR1比较,SAMP8海马部GFAP阳性细胞数量增多,尤以DG区明显,胞体增大、分支增粗;连续12周灌胃给予ICA后可减少SAMP8海马部GFAP阳性细胞数量,并在一定程度上恢复受损细胞的形态。结论:SAMP8脑组织中星形胶质细胞被激活增生:ICA可以抑制海马中被激活的星形胶质细胞,改善受损细胞的形态。第六部分:ICA对快速老化小鼠SAMP8脑组织中脂质过氧化物含量和抗氧化酶活性的影响目的:探讨ICA对快速老化小鼠SAMP8脑组织中脂质过氧化物含量和抗氧化酶活性的影响。方法:动物分组和给药同第二部分。应用比色法检测SAMP8大脑皮层中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果:与SAMR1比较,10mon龄SAMP8大脑皮层中SOD活性明显降（此处忽略..）低、MDA含量显著增加,GSH-Px活性出现一定程度的下降但无统计学意义;连续12周灌胃给予ICA后SAMP8大脑皮层中SOD活性显著升高、MDA含量明显降低,GSH-Px变化不明显。结论:SAMP8脑组织中脂质过氧化反应增加,氧化损伤和抗氧化防御系统之间平衡失调,呈现一种高氧化应激状态;ICA可以抑制SAMP8脑组织中脂质过氧化反应,调节氧化损伤和抗氧化防御系统之间平衡,减轻氧化应激损伤。第七部分:ICA体外及其体内代谢产物ICT抗氧化活性研究目的:探讨ICA及其体内代谢产物淫羊藿素(Icaritin,ICT)体外抗氧化活性。方法:①应用比色法检测ICA、ICT清除DPPH(2,1-diphenyl-1-picrylhydrazyi)自由基能力;②采用MTT法检测ICA、ICT预孵育、H_2O_2损伤PC12细胞活力及显微镜下观察细胞形态。结果:①DPPH自由基清除实验中,ICT具有一定的清除自由基能力(IC_(50)=76μg/ml),而ICA没有;②体外细胞培养实验中,与对照组比,ICT可明显升高H_2O_2损伤PC12细胞活力,对细胞形态有一定的保护作用,而ICA对此影响不明显。结论:ICA体外实验没有表现出抗氧化能力,而其体内代谢产物ICT表现出较强的抗氧化活性,推测ICT可能是ICA在体内的药理活性成分。

以上为本篇毕业论文范文淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8学习记忆的影响及作用机理研究的介绍部分。

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