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产紫杉烷类物质内生真菌的分离鉴定

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毕业论文范文题目:产紫杉烷类物质内生真菌的分离鉴定,论文范文关键词:产紫杉烷类物质内生真菌的分离鉴定
产紫杉烷类物质内生真菌的分离鉴定毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:紫杉醇是Wani等人1971年从短叶红豆杉(Taxusbrevifolia)的树皮、树根及枝叶中提取的一种四环二萜酰胺类化合物,是一种高效、低毒、广谱天然抗癌药物,紫杉醇的天然提取主要来自于红豆杉植物(Taxus)的皮,其含量仅为0.01%~0.05%。红豆杉属于濒危树种,生长极慢,传统方法需要砍伐大量紫杉树木,取其树皮提取紫杉醇,其代价很高,据推算每300棵树,大约能有10吨树皮,可提取1kg左右的紫杉醇,约能供应5个患者使用;因此,(文章此处忽略..)寻求获得紫杉醇的新途径,是保护红豆杉资源和降低药物治疗成本的关键,为此与紫杉醇生产相关的领域,如化学合成、植物组织细胞培养和微生物发酵等均做了大量的研究工作。特别是在微生物发酵方面,紫杉醇内生真菌的分离和鉴定,为人们展示了一个生产紫杉醇的新途径。本研究从野生中国红豆杉(Taxuschinensis(Pilger)Rehd.)的不同组织中分离到了123株内生真菌,通过HPLC检测发现了4株产紫杉烷类物质的内生(文章此处忽略..)真菌,分别命名为Cbr31-1、Cbr34-1、Cbr37-2和Cbr51-2。使用真菌ITSrDNA通用引物序列,对分离菌Cbr1-1、Cbr31-1、Cbr31-3、Cbr34-1、Cbr37-2、Cbr38-2、Cbr44-3、Cbr46-2和Cbr51-2和的ITS序列进行了PCR扩增,并对扩增产物进行了测序,对这9株分离菌进行了初步的种属归类,并进行了进化树分析。优化了色谱条件,利用高效液相对天然生长的南方红豆杉、中国红豆杉和东北红豆杉枝条中的3种紫杉烷类物质(此处忽略..)含量进行了检测和分析。把3种紫杉烷类化合物:10-脱乙酰巴卡亭III(10-deacetyl-baccatinIII)、巴卡亭III(baccatinIII)和紫杉醇(Taxol)置于同一色谱条件下检测,以比较不同种类紫杉烷类化合物的含量,为红豆杉资源的开发和利用奠定了基础,也为产紫杉烷类物质内生真菌发酵产物的提取与检测建立了平台。对产紫杉醇基因工程菌株EFY-21进行了发酵条件的研究,实验采用了不同的基础培养基、温(此处忽略..)度、pH等因素对EFY-21基因工程菌进行对比实验确定最佳培养条件,进行了生长曲线的测定以及培养条件的优化,确定了最佳碳氮源的培养基,并采用正交实验得出最佳的碳氮比例,为将来利用转基因内生真菌大规模生产紫杉醇奠定了基础。


以上为本篇毕业论文范文产紫杉烷类物质内生真菌的分离鉴定的介绍部分。
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