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烟草MADS盒基因NtPR的克隆与功能鉴定

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毕业论文范文题目：烟草MADS盒基因NtPR的克隆与功能鉴定，论文范文关键词：烟草MADS盒基因NtPR的克隆与功能鉴定
烟草MADS盒基因NtPR的克隆与功能鉴定毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：植物MADS盒基因蛋白是一类在生物发育过程中起着重要作用的转录因子家族,最早期的MADS盒基因是分别从酵母(MCM1)、拟南芥(AGAMOUS)、金鱼草(DEFICIENS)、和人类(SRF)中克隆得到的,这也是MADS盒基因名字的由来。植物中MADS盒基因家族的研究已较为深入,功能主要涉及到植物花发育的相关过程中。植物花柄是连接花器官和营养器官的重要部分,但花柄发育的分子机制并不清楚,模式植物拟南芥中AtBP、AtER突变体花柄变短,具体调控机制有待于进一步研究。本文以烟草为材料克隆了一个MADS盒基因,命名为NtPR,聚类分析表明该基因属于SV（此处忽略..）P亚家族,蛋白水平上与番茄JIONTLESS具有80%以上的同源性。功能分析初步发现NtPR在烟草中能够影响花柄发育,花序结构等,用RACE方法获得NtPR基因全长CDS基础上,我们对该基因进行了一系列的功能分析:(1)为了研究NtPR的亚细胞水平表达部位,我们以拟南芥叶片为材料,对NtPR进行了亚细胞定位研究,结果表明该基因仅在细胞核中表达,符合转录因子的特点。(2)MADS盒基因功能作用模式一般形成多聚体,为了研究NtPR的作用模式,我们利用酵母双杂交的方法对NtPR与部分候选基因蛋白进行了互作检测,结果表明NtPR蛋白可能在行使功能时形成同源（本文此处忽略..）二聚体。(3)为了进一步研究NtPR作为MADS盒基因在烟草中的功能,本研究中分别构建了35S启动子下的过表达载体和RNAi载体并转化烟草,都得到了相应的转基因植株,表型分析发现,在过表达植株中烟草花柄伸长受到严重抑制,花序整体结构变得紧凑、早花等,RNAi植株花序结构伸展,花的数量减少,其中NtPR作为MADS盒基因影响到花柄伸长发育,这个功能在MADS盒基因中是首次发现,拓展了MADS盒基因在植物中的功能解析。(4)在过表达转基因烟草中利用荧光半定量发现NtBP、NtER、NtYUC等基因在转录水平上均受到不同程度的影响,其中NtYUC基因是（本文此处忽略..）生长素合成过程中的关键基因,烟草的生长素Marker基因NtParC转录水平明显上调,综合表明NtPR可能与生长素代谢有一定关系。(5)在获得以上结果的基础上,本文又对NtBP、NtER做了初步研究,我们分别获得了NtBP过表达和RNAi植株,NtER的antisense植株,结果表明,在NtBP的沉默植株中,花柄伸长受到影响,花序结构变得紧凑,而在NtPR过表达植株中NtBP是下调的,综合推断在花柄发育的信号通路中NtBP可能是NtPR的下游因子,当然这个推断还有待于进一步证明。综上结果推断NtPR作为MADS盒基因成员影响了花柄的发（略..）育,但花柄作为一个重要器官本文作者推断应该是由多基因控制的,所以在NtPR的RNAi植株中并没有明显表型,实验表明NtPR可能与生长素代谢有一定的关系,另外NtBP作为影响花柄发育的另一转录因子可能在NtPR的下游起作用。MADS盒基因影响花柄发育的功能未见报道,本研究一方面扩展了MADS盒基因作为一类重要转录因子对植物生长发育的重要作用,另一方面为花柄发育的研究提供理论参考。农业上花柄发育特性影响到诸如穗型等重要农艺性状,所以花柄发育的研究在育种上也具有实践意义。

以上为本篇毕业论文范文烟草MADS盒基因NtPR的克隆与功能鉴定的介绍部分。

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