转ipt-bar双价基因对水稻生长发育影响的研究

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转ipt-bar双价基因对水稻生长发育影响的研究

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毕业论文范文题目：转ipt-bar双价基因对水稻生长发育影响的研究，论文范文关键词：转ipt-bar双价基因对水稻生长发育影响的研究
转ipt-bar双价基因对水稻生长发育影响的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：本研究以水稻EY105、R527及惠水黑糯为研究材料，并以农杆菌介导法和基因枪法将含有异戊烯基转移酶(ipt)基因和抗除草剂(bar)基因的双价表达元件导入水稻，分析转基因植株生理生化特性及农艺性状，拟通过基因工程手段调控水稻抗衰老特性和抗冷性，并获得抗除草剂性状。研究结果如下：1、农杆菌介导法遗传转化水稻体系的建立在本实验室已建立水稻愈伤组织诱导再生体系的基础上，对影响农杆菌介导水稻遗传转化的因子进行了优化。结果表明：成熟胚或幼胚来源的愈伤组织经继代培养1-3代后，与制备表达载体pBinAipt-bar的OD_(600)为0.5-0.7的农杆（略..）菌EHA105共培养，侵染15min后用无菌滤纸吸干，接入铺有滤纸的共培养基上，共培养3d后脱菌接种于筛选培养基(含4mg·L~-PPT)上进行筛选培养。保持选择压继代3次后转入分化培养基。当小苗长至10cm左右时炼苗、移栽至温室花盆中。通过本方法籼稻转化率为4.38％，粳稻转化率达9.69％，惠水黑糯最高，为13.67％。2、基因枪法遗传转化水稻参数的优化以惠水黑糯和中旱21未成熟胚诱导的愈伤组织为材料，采用轰击前6h--轰击后18h和轰击前12h--轰击后18h两种方式进行高渗处理，并对1100psi、1350psi和1550psi3种易裂片压力进行试验。研究发现，轰击前6h--轰击后18h（略..）高渗处理能得到较好的效果，易裂膜压力在1100psi和1350psi时都能获得较高转化效率，惠水黑糯以1100psi较好，中旱21以1350psi为宜，所试验的两个品种抗性愈伤获得率均在30％左右。3、转化植株筛选鉴定和生理生化研究通过农杆菌介导法及基因枪法遗传转化水稻，对转化植株进行PCR、RT-PCR检测和除草剂喷洒试验。结果表明目的基因已经整合到水稻基因组中，转ipt-bar基因EY105和R527分别稳定遗传至T4和T3代。本研究结果证明转基因植株在低温(4℃)生存时间长于对照，而且在常温下，目的基因的导入对水稻植株的主要生理指标影响不大，但经低温胁迫后，（本文此处忽略..）转基因水稻叶片细胞电解质渗漏率明显低于对照，叶片叶绿素含量、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、脯氨酸含量较对照高，POD、SOD活性降低速率和MDA含量增加率低于对照植株。且转基因水稻种子在低温(15℃)下萌发率高于对照。说明ipt基因表达，细胞分裂素增加，有利于抵抗低温不良环境。在生育后期，转基因水稻的光合速率、POD活性及叶片叶绿素含量显著高于对照植株，生育期比对照延长约15d。根据转基因水稻农艺性状、抗冷性和抗除草剂特性，筛选出两个稳定遗传的转基因株系。其中转基因R527ib1比对照R527增产25.4％，而转基因EY105株系6-19比对照（文章此处忽略..）EY105增产达125.3％。本研究首次将Act驱动的ipt基因与抗除草剂(bar)基因的双价表达载体导入水稻，通过对转基因水稻的生理生化指标和农艺性状分析，并初步筛选出植株茎叶衰老延缓、抗冷性增强且抗除草剂的转基因水稻株系，可作为水稻育种的新种质。

以上为本篇毕业论文范文转ipt-bar双价基因对水稻生长发育影响的研究的介绍部分。

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