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水稻OsELF3基因RNAi载体的构建及其转化研究

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毕业论文范文题目:水稻OsELF3基因RNAi载体的构建及其转化研究,论文范文关键词:水稻OsELF3基因RNAi载体的构建及其转化研究
水稻OsELF3基因RNAi载体的构建及其转化研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:水稻是人类赖以生存的粮食作物之一,其抽穗期是重要的农艺性状,决定品种种植的生态区和地区适应性,也是重要的育种目标,选育早熟高产的水稻品种一直为水稻育种家所重视。植物生育期调控是一个复杂的过程,涉及许多基因。ELF3基因是拟南芥昼夜节律钟的正向调节因子,在光感受器和中心振荡器之间起作用,并维持生理节律系的生存能力以便获得正确的振幅和周期。该基因的突变使得对光周期敏感性和节律调控作用丧失,在长日和短日(此处忽略..)条件下均表现为早花。在水稻中,通过蛋白质的在线比对发现,预测的OsELF3所编码的蛋白与拟南芥ELF3具有很强的序列相似。推测它具有调控水稻抽穗期的功能。RNA干涉(RNAinterference,RNAi)技术作为一项新的生物学技术,能通过基因转录后的调控,抑制特定基因的表达,此方法的优点在于只改变目的基因,而不改变植物本身的遗传背景。作为一种简单的、有效的代替基因敲除的遗传工具。本研究成功构建水稻O(略..)sELF3基因RNAi表达载体pOsAct2-OsELF3-RNAi,以中花11、日本晴为受体,利用农杆菌介导的方法获得有价值的转基因植株。获得的RNAi材料为水稻OsELF3的深入研究奠定了基础。主要研究结果如下1根据Gramene上的OsELF3基因cDNA序列设计引物,分别进行PCR反应,扩增了约678bp大小的RNAi-Sence片段和RNAi-Antisence片段。2将OsELF3基因RNAi片段克隆到植物表(文章此处忽略..)达载体pOsAct2-I-nos上,得到RNAi表达载体pOsAct2-OsELF3-RNAi。受Actin2启动子调控,选择标记为潮霉素(Hpt)基因。3将构建好的RNAi表达载体pOsAct2-OsELF3-RNAi利用农杆菌介导的方法导入中花11、日本晴成熟胚诱导的胚性愈伤组织中,经组织培养,抗性筛选分化,获得再生植株。4利用离体叶片潮霉素快速鉴定、PCR扩增Hpt基因对转基因植株进行鉴定,证实了OsELF3基因R(本文此处忽略..)NAi片段正确插入到水稻基因组中,成功获得了12株阳性转基因水稻。5对OsELF3基因RNAiT,代阳性植株和对照中花11、日本晴的性状调查结果表明,OsELF3基因RNAiT1代相比中花11、日本晴抽穗期延迟,统计分析表明,差异显著。OsELF3基因的RNAi转基因水稻的获得为进一步研究OsELF3基因的功能提供了重要材料。


以上为本篇毕业论文范文水稻OsELF3基因RNAi载体的构建及其转化研究的介绍部分。
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