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水稻成熟胚诱导愈伤再生转化体系的建立及核基质附着序列(MARs)

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毕业论文范文题目:水稻成熟胚诱导愈伤再生转化体系的建立及核基质附着序列(MARs),论文范文关键词:水稻成熟胚诱导愈伤再生转化体系的建立及核基质附着序列(MARs)
水稻成熟胚诱导愈伤再生转化体系的建立及核基质附着序列(MARs)毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:植物基因工程及相关生物技术的持续发展,为作物遗传育种开辟了一条崭新的途径。迄今为止,许多控制有益农艺性状的基因已导入越来越多的作物品种。水稻(OryzasativaL.)是世界最重要的粮食作物之一,是占世界50%的人口所赖以生存的重要作物,利用植物基因工程手段进行水稻农艺性状的定向遗传改良具有十分重要的意义。在转基因植物研究中,建立高效的外源基因遗传转化体系,并使转基因在转基因植株中高表达,是转基因研究的核心问题。然而,在转基因水稻研究中,转化植株内转基因沉默与转基因表达变异,是困扰人们的两大主要问题。本研究通过建立水稻成熟胚诱导愈伤高效再生体系和基因枪介导的遗(此处忽略..)传转化方法,获得抗basta转基因水稻。将MAR序列插入到bar基因两侧,构建具有“MAR-transgene-MAR”结构的表达质粒来转化受体材料,考察了MAR序列介导对转基因水稻中转基因表达的影响。研究结果表明,MAR序列介导可以促进转基因bar转录表达,增加bar基因表达的稳定性。本研究主要结果如下:(1)本研究采用水稻成熟胚诱导愈伤作为再生植株的初始培养材料,通过优化激素组合和调节培养基渗透压,建立了适合水稻遗传转化的高效再生体系。以CultureⅠ(LSbase+2,4-D_(2.0mg/L))诱导成熟胚愈伤,愈伤剥离后接种于CultureⅡ-3(LSbase+2,(本文此处忽略..)4-D_(2.5mg/L)+山梨醇3g/L)诱导胚性愈伤,继代后接种于CultureⅢ-2(MSbase+NAA_(0.5mg/L)+6-BA_(1.0mg/L)+Kinetin_(2.0mg/L)+山梨醇8g/L)上分化成苗。对5个不同品种的培养结果表明,该再生体系所获得的胚性愈伤组织分化再生率均在60-80%。利用本研究所优化建立的高效再生体系建立水稻外源基因遗传转化系统,使转化过程中所得转化愈伤高效再生成苗,从而顺利获得转化植株,可以提高水稻外源基因转化的效率,为水稻品种的定向遗传改良提供优良的遗传转化技术体系。(2)本研究以水稻成熟胚诱导愈伤获得的胚性愈伤组织作为水稻遗传转化的受体,进行基因枪轰击转化,(文章此处忽略..)建立了基因枪介导的水稻遗传转化体系,获得抗basta转基因水稻。本研究所采用的成熟胚诱导愈伤受体比其它受体系统具有初始培养材料来源方便,愈伤容易培养,获得转化植株的周期短等优点,在实践上具有较强的可操作性。(3)本研究采用两种特殊植物表达质粒转化水稻成熟胚诱导愈伤,分析了MAR序列介导在转基因水稻中对转基因表达的影响。研究结果表明,转化相同数量及状态的受体材料,利用MAR序列介导bar基因表达,转基因系数量比对照提高66.7%,单块转化抗性愈伤再生植株数比对照提高27.3%;AMR序列介导bar基因表达的转基因系中, bar基因的表达水平比对照高,并且不同转基因系间bar(本文此处忽略..)基因表达差异比对照小。该 研究结果说明,MAR序列介导可以促进转基因在转化子中的表达,减少或消除转基因沉默,增加所获得的转基因株系数量,提高水稻外源基因转化效率;减少转基因低表达的植株数,增加转基因高表达的植株数,提高转基因表达的整体水平;减少或消除转基因表达的位置效应,减少不同转基因株系间转基因表达的差异,增加的基因表达的稳定性。本研究结果对于应用MAR序列元件来构建植物表达载体,减少或消除转基因沉默,促进转基因表达,提高转基因表达水平及其稳定性等,具有重要意义。


以上为本篇毕业论文范文水稻成熟胚诱导愈伤再生转化体系的建立及核基质附着序列(MARs)的介绍部分。
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