淀粉分支酶基因反义表达载体在玉米中的遗传转化研究

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淀粉分支酶基因反义表达载体在玉米中的遗传转化研究

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毕业论文范文题目：淀粉分支酶基因反义表达载体在玉米中的遗传转化研究，论文范文关键词：淀粉分支酶基因反义表达载体在玉米中的遗传转化研究
淀粉分支酶基因反义表达载体在玉米中的遗传转化研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：玉米是重要的粮食和饲料作物，也是现代食品、医药、化学工业的重要原料作物，同时玉米也是植物遗传转化的模式植物。自从1988年Rhodes等首次获得玉米转基因完整植株以来，玉米转基因在受体系统的建立，转化技术的研究和重要的农艺性状的遗传改良方面都取得重大进展，在育种改良中起着愈来愈重要的作用。玉米淀粉是直链淀粉和支链淀粉的混合体，二者的比重约在28％和72％。玉米淀粉的作用非常广泛，特别是直链淀粉的用途涉及到各个领域，如食品、医疗、纺织、造纸、包装、石油、环保、光纤、高度印刷线路板、电子芯片等行业。另一个潜在利用价值是玉米高直链淀粉是生产光解塑料的最佳原料，是解决目前严重的“白色污染”的有效途径。因此培育高直链淀粉玉米品种具有重要意义，具有显著的社会效益和经济效益。但我国目前进行高直链淀粉玉米育种的研究还很少，急需加强这一领域的研究。利用基因工程手段，将控制玉米淀粉形成的基因转入玉米自交系中是解决这一问题的（文章此处忽略..）新途径。本研究通过高直链淀粉和普通玉米自交系的受体系统的建立，利用生物技术手段可以使直链淀粉的含量更进一步提高，采用农杆菌介导法和花粉管通道法将玉米淀粉分支酶基因的反义表达载体转入玉米自交系中，控制支链淀粉的形成，从而增加直链淀粉的含量，得到所需要的直链淀粉含量高的株系。本实验以高直链淀粉玉米自交系C9、C15、C21、C31、C41和普通玉米自交系综31、Mo17和P12等授粉10-14天的幼胚为受体材料，用不同类型的培养基对其幼胚进行诱导，通过优化培养条件，对以幼胚为外植体诱导愈伤组织的几个重要影响因素进行研究，结果发现：不同类型的玉米自交系均可诱导出愈伤组织，诱导率的高低主要取决于基因型、培养基种类、激素浓度等。对于不同基因型的玉米愈伤组织的诱导而言，MS、N6、MB等培养基均可诱导出胚性愈伤组织，但诱导愈伤组织的转化率却有明显的差异，其中MB和N6培养基的胚性愈伤诱导率最高，并且愈伤组织表现良好的胚性；对于不同基因型玉米（此处忽略..）自交系2，4-D浓度为2mg／1时胚性愈伤组织诱导率均较高；同时实验还证明，在以蔗糖、葡萄糖为诱导培养基碳源时，不同玉米基因型间存在一定的差异，高直链淀粉玉米自交系在以20g／1蔗糖作碳源时诱导效果较好，继代时蔗糖浓度采用20-25g／1较适宜；而普通玉米自交系则以30g／1蔗糖或20g／1蔗糖和10g／1葡萄糖作碳源的诱导培吉林农业大学硕士学位论文淀粉分支酶基因反义表达载体在玉米中的遗传转化研究养基上愈伤组织诱导率较高，且胚性愈伤组织状态较好，适合于长期继代。可以说，本实验建立了高直链淀粉玉米和普通玉米自交系的遗传转化受体系统，摸索出不同玉米自交系幼胚愈伤组织诱导、继代、植株分化以及生根的有效方法。同时通过高直链淀粉玉米的组织培养，建立了高直链淀粉玉米的高效遗传转化受体系统，而且高直链淀粉玉米的胚性愈伤组织也可以作为其他一些抗性基因的受体系统进行转化。这不仅提高了玉米品质，而且还可以缩短育种年限，同时也为特用玉米的研究莫定了基（略..）础，这将是高直链淀粉玉米育种的一条新的有效途径。农杆菌介导法的遗传转化在1shida等首次用农杆菌转化玉米自交系A188的幼胚，并获得了转基因植株，成为农杆菌转化玉米的一个里程碑。本研究主要是以高直链淀粉玉米自交系C15和普通玉米自交系P12的胚性愈伤组织为材料，通过愈伤组织对潮霉素的敏感性实验，确定愈伤组织适宜选择压。利用农杆菌介导法将玉米淀粉分支酶基因(SBEllb)的反义表达载体导入玉米自交系中，探讨反义核酸技术在玉米直链淀粉改良中的作用机制及可行性。研究农杆菌转化系统的条件，对不同类型的菌株、不同的侵染时间、不同的菌液的浓度以及不同的继代时间等条件进行探讨。结果表明，用EHA105的菌株，浓度(0D值)在0.5一0.6左右，侵染25分钟时，继代较短的时间的愈伤组织的侵染效果最好。同时将转化的愈伤组织进行分化出苗后进行PCR检测，转化率也较高，证明外源目的基因已整合到玉米基因组中，并得到了转化植株的种子。另外，本实验还采用了（本文此处忽略..）花粉管通道法对玉米自交系进行遗传转化。将淀粉分支酶基因的反义表达载体转入玉米自交系5003、春09、吉553、Moz7、7922、340中，同时探讨了不同导入时间、不同DNA的浓度、不同的导入量等对其转化率的影响，并从中得出花粉管通道法的最佳转化条件。实验结果表明:在400mg/L的浓度卡那霉素溶液的杭性筛选条件下，用SSC溶解的质粒，导入的最佳时间在早上6:00一8:30时、下午4:的一7:的时，导入间隔时间要在8一20小时范围内，并且导入质粒的浓度为5的林g/mL、导入量为200“1即可达到较高的转化率，通过转化植株后代的PCR分析，初步证明了淀粉分支酶基因反义表达载体已整合到受体植株的基因组中，并在后代中得以表现，转化率为5.2%o

以上为本篇毕业论文范文淀粉分支酶基因反义表达载体在玉米中的遗传转化研究的介绍部分。

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