拟态弧菌外毒素的检测及中草药抑菌抗毒素活性的研究

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拟态弧菌外毒素的检测及中草药抑菌抗毒素活性的研究

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毕业论文范文题目：拟态弧菌外毒素的检测及中草药抑菌抗毒素活性的研究，论文范文关键词：拟态弧菌外毒素的检测及中草药抑菌抗毒素活性的研究
拟态弧菌外毒素的检测及中草药抑菌抗毒素活性的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：拟态弧菌(Vibriomimicus)是一种常见的病原弧菌,不仅可引起鱼蟹类重大的腹水病,而且还可能通过水产动物跟水产品感染人类,引起腹泻跟食品中毒。目前该病防治的重要方法是利用抗生素,然而跟着抗生素的反复利用,细菌耐药性问题跟药残所致的水产品保险问题愈来愈凸起。为此,本课题以拟态弧菌安徽分别株为研究对象,在探明其耐药性跟外毒素致病性的基本上,体系研究了中草药对拟态弧菌的抑菌抗毒素活性,旨在筛选出最佳中草药复方,为后续临床实验研究提供材料,以及为研制医治腹水病的中草药制剂奠定基本。首先,对拟态弧菌安徽分别株进行外毒素基因PCR检测跟外毒素致病性测定。研究中根据拟态弧菌或霍乱弧菌的外毒素基因(vmhA、hlyA、ctxA、zot、ace)序列设计引物,以细菌基因（此处忽略..）组DNA为模板,PCR扩增外毒素基因,构建其重组质粒并进行序列测定与分析。成果显示:4株拟态弧菌均携带外毒素基因,但不同分别株的毒素基因型有所不同,分辨为vmhA~+hlyA~-ctxA~-zot~-ace~-(HX4菌株)、vmhA~-hlyA~+ctxA~-zot~-ace~-(04-13菌株)、vmhA~-hlyA~+ctxA~-zot~+ace~-(04-14菌株)跟vmhA~-hlyA~-ctxA~-zot~+ace~-(04-5菌株)。HX4菌株vmhA片段长1391bp,与拟态弧菌独一参考株的相应核苷酸同源性达97.3%;04-13跟04-14菌株的hlyA片段长934bp,与国内外参考株的同源性在92.4%～99.3%之间。在利用蛋白分别技巧提取拟态弧菌外毒素的基本上,采取血琼脂平板扩散法跟微量板法测定其溶血性,采取动物实验法测定其（本文此处忽略..）致病性。成果显示4株拟态弧菌外毒素对实验小鼠跟草鱼均有极强的肠毒性跟致逝世性。除04-5分别株无溶血性外,其余3株均存在溶血活性,溶血价在1∶64～1∶256之间。表明外毒素在拟态弧菌致病过程中起侧重要作用。其次,对拟态弧菌安徽分别株进行耐药性检测。研究中采取K-B纸片琼脂扩散法测定了4株拟态弧菌对19种抗生素的耐药性。成果显示它们对β-内酰胺类、氨基糖甙类、四环素类、大环内酯类跟喹诺酮类抗生素均有不同程度的耐药性,浮现多重耐药性。最后,体系测定中草药对拟态弧菌的抑菌抗毒素活性以及对草鱼肠道内细菌数量跟上风菌群品种的影响。研究中采取平板打孔法测定27味中草药的体外抑菌活性,并选取抑菌活性为中敏跟中敏以上的中草药,采取改进微量稀释法测定其最低抑菌浓度(MinimalInhibitoryCo（此处忽略..）ncentration,MIC)。成果显示黄连、大黄、金银花跟秦皮的抑菌活性最好,达到高度敏感,其MIC值在1.96～62.72g/L之间,其次为夏枯草、地锦草、丹皮、连翘跟黄柏,达到中度敏感,其MIC值在31.36～250g/L之间。以上述9味中草药为主药,在主药中参加佐药茯苓跟车前子以及使药黄芪跟甘草组成5个复方测定其体外抑菌跟间接拮抗毒素活性。成果显示复方5的体外抑菌活性最好,对4株拟态弧菌的MIC值均为1.96g/L;其次是复方1跟复方3,其MIC值在1.96～7.84g/L之间;复方2跟复方4的抑菌活性较低,其MIC值在31.36～125g/L之间。复方5的间接拮抗毒素活性最强,复方2、复方3跟复方4次之,复方1不存在抗毒素活性。综合考虑断定复方5的配伍后果最好,存在较强的体外抑菌跟间接抗毒素分泌的作用。进一步采取人工感染实验跟细（此处忽略..）菌学方法分辨测定复方5的体内抗菌活性及其对草鱼肠道内细菌数量跟上风菌群的影响。成果显示复方5可能保护实验草鱼抵抗拟态弧菌的创伤浸浴感染,减少草鱼肠道内细菌数量跟克制前提致病性气单胞菌跟不动杆菌的成长。综上所述,本研究在探明拟态弧菌耐药性及其外毒素致病性的基本上,成功筛选出存在体外抑菌、体内抗菌、间接拮抗毒素跟免疫调节活性的中草药复方。研究成果不仅为后续临床实验研究提供了材料,也为研制医治腹水病的中草药制剂奠定了基本。

以上为本篇毕业论文范文拟态弧菌外毒素的检测及中草药抑菌抗毒素活性的研究的介绍部分。

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