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重组生长激素酵母饲料的研究

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毕业论文范文题目:重组生长激素酵母饲料的研究,论文范文关键词:重组生长激素酵母饲料的研究
重组生长激素酵母饲料的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:生长激素(Growthhormone,GH)是脊椎动物脑垂体分泌的促进机体生长发育的单链多肽激素。正常鱼体内生长激素分泌量少,不能满足水产养殖的需要,利用重组DNA技术与大规模培养技术,开展鱼类GH基因工程酵母菌饲料的研究,对鱼类生长激素在养殖中的应用具有重要的科学意义及应用价值。本研究根据GenBank数据库中登记的青鱼(Mylopharyngodo(本文此处忽略..)npiceus)生长激素基因序列(AF389238)设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增青鱼生长激素(blackcarpgrowthhormone,bcGH)cDNA编码区,定向插入含强启动子AOXI的表达载体pPIC3.5k,电击转入毕赤酵母GS115菌株。经甲醇诱导表达,蛋白表达产物的SDS-PAGE和ELISA检测,bcGH在酵母胞内得到正确表达,成功获得重组鱼生长激(略..)素酵母(重组bcGH酵母)。250mL三角瓶中,在pH值6.5、0.5%甲醇、温度30℃和培养时间72h的诱导条件下,目的蛋白的表达量高达893mg/L。利用正交实验探讨了重组bcGH酵母在豆粕中的发酵条件。结果表明,温度、pH值、培养时间、豆粕浓度、接种量和诱导剂浓度均对生长激素蛋白表达量有影响,在时间96h,pH6.5,接种量6%,发酵温度30℃,诱导剂浓度1%,豆粕浓度7%等优化条件下,活菌数达到(略..)7.96×109cfu/mL,bcGH表达量最高。以重组bcGH酵母发酵豆粕进行鲫鱼生长试验,考察生长性能、血清指标以及IGF基因表达等指标,结果表明,实验组饲料生长性能和血清指标差异明显(p0.05),其中相对体重生长率、尿素氮、三碘甲状腺原氨酸T3、甲状腺素、胰岛素水平差异极显著(P0.01)。肝脏IGF-Ⅰ和IGF-ⅡmRNA相对表达量差异极显著(P0.01)综上所述,本研究将重组b(略..)cGH酵母诱导发酵的豆粕直接添加到鲫鱼基础饲料中,配制成重组bcGH酵母饲料,并将其运用到鱼类养殖上,显著提高了鲫鱼生长性能及其相关基因的表达,为研发绿色、安全、高效的新型微生物渔用配合饲料奠定了基础。


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