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桑色素对小鼠T细胞行为和DTH、脓毒症免疫调节作用的研究

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毕业论文范文题目:桑色素对小鼠T细胞行为和DTH、脓毒症免疫调节作用的研究,论文范文关键词:桑色素对小鼠T细胞行为和DTH、脓毒症免疫调节作用的研究
桑色素对小鼠T细胞行为和DTH、脓毒症免疫调节作用的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的:研究桑色素对T细胞行为和DNFB诱导的DTH、E.coli诱导的脓毒症模型的影响,并探讨其作用机制。方法:分别使用刀豆蛋白A(concanavalinA,ConA)和二丁酸佛波醇酯(phorbol12,13-dibutyrate,PDB)加离子霉素(ionomycin,Ion)刺激小鼠淋巴结来源的T细胞活化和增殖,建立地塞米松诱导胸腺细胞凋亡模型。研究桑色素(morin)对上述刺激剂所诱导的T细胞行为的影响,以及对地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡的影响。利用荧光标记抗体检测T细胞的表面分子,羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯(carboxyfluoresceindiacetatesuccinimidylester,CFDA-SE)荧光染料检测T细胞增殖,碘化丙锭(propidiumiodide,PI)检测T细胞周期,PI测定地塞米松(dexamethasone(文章此处忽略..),Dex)诱导胸腺细胞凋亡的比率;建立二硝基氟苯(dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导迟发型超敏反应(delayedtypehypersensitivity,DTH)模型,观察morin对DTH模型小鼠耳组织肿胀、炎性细胞浸润程度和胸腺指数、脾指数的影响,光学显微镜下观察小鼠耳廓组织学变化,噻唑兰(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法检测淋巴结细胞和脾脏淋巴细胞增殖情况;建立腹腔注射大肠杆菌(escherichiacoli,E.coli)诱导脓毒症(sepsis)模型,观察7天内morin对小鼠存活率的影响,用Annexin-V/PI双染法检测淋巴细胞凋亡情况,Griess法检测脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮(nitricoxide,NO)情况,荧光(文章此处忽略..)显微镜下观察和流式细胞术检测巨噬细胞吞噬情况。结果:1.终浓度为25、50和100μmol/L的morin均下调ConA刺激后的CD69~+T细胞的比率,其中,100μmol/L的morin抑制作用最强,下调比率为(48.95±0.81)%,与对照组比较差异显著(P<0.01)。CFDA-SE染色分析显示,各浓度的morin对ConA或PDB+Ion刺激48h或72h的T细胞增殖,均具有明显地抑制作用,以100μmol/Lmorin抑制作用最明显。PI染色流式细胞术分析的结果表明,与ConA或PDB+Ion组相比,morin组中S期的细胞比率较高。PI染色分析小鼠胸腺细胞凋亡的结果表明,25μmol/L、50μmol/L100μmol/Lmorin对Dex诱导的细胞凋亡有促进作用,100μmol/Lmorin作用最强,凋亡细胞比率为(42.10±3.06)%,与Dex组相比,差异显著(P<0.01)。2.双耳称重的结果显示,morin(70m(略..)g/ml)处理组与DTH组具有显著的差异(P<0.05),能明显抑制DNFB引起的炎症反应;耳廓局部组织学检测也表明,morin能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润。morin能降低DTH小鼠胸腺指数和脾脏指数,抑制淋巴结淋巴细胞(P<0.01)和脾脏淋巴细胞的增殖(P<0.05)。3.morin(35mg/ml)处理组sepsis小鼠长期存活率高于sepsis组(P<0.01);Griess反应检测NO含量的结果显示,各浓度组的morin均抑制LPS刺激巨噬细胞产生NO,100μmol/L的morin抑制作用最强(P<0.01);皮下注射morin10mg/ml,发现其对小鼠巨噬细胞的吞噬功能也有促进作用(P<0.05),对淋巴细胞的凋亡影响轻微(P>0.05)。结论:1.morin可显著抑制ConA刺激的T细胞活化,对ConA或PDB+Ion诱导的T细胞增殖均有抑制作用;其对增殖的抑制作用主要(此处忽略..)表现为S期细胞的阻滞。对地塞米松诱导的胸腺细胞的凋亡有促进作用。提示morin可能是一种有效的免疫抑制剂。2.morin可显著抑制DTH小鼠耳组织肿胀和淋巴细胞浸润程度,降低胸腺和脾脏指数,抑制淋巴细胞的增殖可能是其作用机制之一。3.morin可延长sepsis小鼠的存活率,morin体内给药可增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,并且morin可抑制LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌的NO。这些结果均表明morin能有效地防止和治疗细菌性感染。


以上为本篇毕业论文范文桑色素对小鼠T细胞行为和DTH、脓毒症免疫调节作用的研究的介绍部分。
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