β淀粉样蛋白对大鼠海马区NADPH氧化酶表达的影响及机制研究

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β淀粉样蛋白对大鼠海马区NADPH氧化酶表达的影响及机制研究

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β淀粉样蛋白对大鼠海马区NADPH氧化酶表达的影响及机制研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景与目的阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)的神经病理学特征是以β-淀粉样蛋白(β-amyloidprotein,Aβ)沉积为核心的老年斑(senileplaque,SP)、神经元内神经纤维缠结和继发的炎症反应,其发病机制不清。慢性炎症反应学说越来越引起重视。AD脑内慢性炎症反应的特征包括：Aβ沉积激活小胶质细胞,CDllb为小胶质细胞活化的标志,其活化后分泌炎症介质和炎症细胞因子,其中活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)可直接作用于神经元,引起神经元的退化、凋亡。目前多数学者的研究认为,在Aβ与小胶质细胞相互作用后,引发AD患者神经损伤ROS的主要来源是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(nicotinamideadeni（本文此处忽略..）nedinucleotidephosphateoxidase,NADPHoxidase)。NADPH氧化酶是一个多聚体跨膜蛋白质,由六种亚基组成,即p47phox、p67phox、p40phox、Rac、p22phox和gp91phox,其中p47phox是该酶的催化亚基,该亚基在海马局部表达增加,提示其活性增强；它的激活可能与非受体型酪氨酸激酶Src家族Fyn、Lyn及酪氨酸激酶Syk有关,PP2可抑制Src激酶的活性。本研究课题通过观察AD模型大鼠海马内Aβ诱导小胶质细胞活化及NADPH氧化酶表达的变化,探讨Aβ1-42引起小胶质细胞NADPH氧化酶活性变化是否依赖Src家族Fyn.Lyn及Syk信号转导通路,为阿尔茨海默病的炎性反应机制及药物治疗靶点提供实验依据。方法痴呆动（略..）物模型的建立：将Morris水迷宫实验筛选进入试验的72只SD大鼠,随机分为对照组、模型组和PP2干预组,每组24只。模型组每侧海马分别注射Aβ1-422.5μl(4μg/μl)；PP2干预组先注射PP2(8μg/rat),1h后于同一位点再注射Aβ1-422.5μl；对照组注射等容积生理盐水。于第10d对各组大鼠进行Morris水迷宫训练,连续训练5d,记录最后3d的成绩。行为学实验结束后,处死大鼠,免疫荧光法检测Aβ沉积,免疫组织化学法检测CD11b的表达,RT-PCR测定海马区NADPH氧化酶主要亚基及FynmRNA的表达,WesternBlot测定Fyn、Lyn、Syk及p47phox蛋白的表达。统计学方法采用单因素方差分析,P0.01或P0.05具有统计学意义。结果1海马注射Aβ1-42后14d,模型组大鼠空间学习记忆障碍（略..）明显重于对照组(P0.05)和PP2干预组(P0.05),差异具有统计学意义。2免疫荧光显示模型组和PP2干预组大鼠海马内Aβ1-42聚积,对照组未检测到Aβ1-42。3免疫组化显示于14d时Aβ1-42诱导小胶质细胞成为CD11lb阳性细胞,形态多为阿米巴样,对照组、模型组和PP2干预组CD11b阳性细胞数分别为(100±15)个、(589±25)个和(525±23)个；模型组与对照组相比(P0.01),差异具有统计学意义。4RT-PCR测定显示模型组NADPH氧化酶亚基p47phox、p67phox、p40phox、p22phox、gp91phoxp及FynmRNA表达均明显高于对照组(P0.05)和PP2干预组(P0.05),差异具有统计学意义；且模型组p47phoxmRNA与FynmRNA表达变化呈线性正相关(r=0.968,P0.01)。5WesternBlot测定显示模型组Fyn、Lyn、Syk及p47phox蛋白（略..）表达均明显高于对照组(P0.05)和PP2干预组(P0.05),差异具有统计学意义。结论1Aβ1-42大鼠海马内注射可以成功的制做AD动物模型,即Aβ在脑内沉积可以引起大鼠的学习记忆障碍。2Aβ在脑内沉积可以引起脑内慢性炎症反应：Aβ1-42增加小胶质细胞NADPH氧化酶表达,并且NADPH氧化酶的激活依赖Fyn、Lyn

以上为本篇毕业论文范文β淀粉样蛋白对大鼠海马区NADPH氧化酶表达的影响及机制研究的介绍部分。

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