HSP70在蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型中的表达及意义

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HSP70在蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型中的表达及意义

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毕业论文范文题目：HSP70在蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型中的表达及意义，论文范文关键词：HSP70在蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型中的表达及意义
HSP70在蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型中的表达及意义毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:探讨帕金森病大鼠行为与病理学的相关性,并进一步探索HSP70在蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型中的表达意义。方法:(1)将蛋白酶体抑制剂Lactacystin2μl/10μg立体定向注射入大鼠左侧黑质致密部,对照组注射等体积的生理盐水;(2)观察大鼠不同时期自主行为和阿朴吗啡诱导的旋转行为的改变;(3)开野实验观察大鼠不同时期自主行为改变,检测指标:总跑动时间、总停息时间、下肢站立次数、穿梭距离、大鼠自发向左侧或右侧行1/4弧度的环形活动的次数、下肢站立时左侧或右侧前肢依靠箱壁的次数和大鼠躯干左侧或右侧靠近箱壁进行探讨活动的次数;(4)HE染色法观察大鼠不同时期黑质致密部病理改变;(5)免疫组织化学法观察大鼠不同时期黑质致密部酪氨酸羟化酶免疫阳性细胞形态改变,并对阳性细胞数进行计数;(6)免疫组织化学法观察大鼠不同时期黑质致密部神经元内α-synuclein蛋白表达,（此处忽略..）并对其进行平均光密度测定;(7)免疫组织化学法观察大鼠不同时期纹状体内酪氨酸羟化酶免疫阳性神经纤维数目的改变,并对其进行平均光密度测定;(8)免疫组织化学法观察HSP70在大鼠不同脑区不同时期的表达,并对其进行平均光密度测定;(9)RT-PCR技术检测HSP70在大鼠不同脑区不同时期的表达。结果:(1)实验组注药Lactacystin后,逐渐出现自发性活动减少,运动缓慢,静止性震颤和对外界刺激不自主竖毛,开始不明显,随着时间推移,症状逐步加重,至18d症状显著。APO诱导向健侧旋转的次数开始很少,随着时间延长越来越多,并且在第7d开始明显增多,直到14d左右增加变缓,到18d后旋转次数已达到(213.8±11.2)r/30min,21d后旋转次数达到(264.7±9.3)r/30min。(2)Lactacystin组大鼠的总跑动时间、总停息时间、下肢站立次数及穿梭距离与生理盐水组相比减少(p＜0.05),且不同时期间减少频度较生理盐（略..）水组具有统计学意义(p＜0.05);Lactacystin组大鼠自发向左侧1/4弧度的环形活动的次数、下肢站立时左侧前肢依靠箱壁的次数及大鼠躯干左侧靠近箱壁进行探究活动的次数与右侧相比增多(p＜0.05),且不同时期间增加频度具有统计学意义(p＜0.05):(3)HE染色法观察Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部神经元数目减少,且呈进行性变性改变,神经元胞膜不完整、结构不清,胞浆内可见嗜伊红包涵体,胶质细胞增多,其中神经元数目减少较对侧和对照组具有统计学意义(F=185.443,p＜0.05);(4)Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部TH免疫阳性神经元数量逐渐减少、胞体皱缩变小、结构变得模糊不清,第14天神经元数减少54.21%(p＜0.05),第21天减少82.37%(p＜0.05);(5)Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部神经元胞浆内α-synuclein蛋白表达量逐渐增加,呈螺旋样聚集表现、胞浆浓然、可见数个圆形或椭圆（本文此处忽略..）形包涵体样聚集,而对照组阳性表达极度稀少而分散,不同时期OD值测定显示较右侧和对照组具有统计学意义(F=47.732,p＜0.05);(6)Lactacystin组大鼠左侧黑质致密部TH免疫阳性纤维数量在逐渐减少、密度在逐渐减低,较右侧和对照组纹状体TH免疫阳性纤维密集相比具有统计学意义(p＜0.05);(7)统计学相关性分析显示,大鼠的行为学改变由α-synuclein蛋白蓄积逐渐增加所驱使,而非减少的TH神经元;(8)免疫组织化学技术检测显示,Lactacystin组大鼠脑区HSP70表达比生理盐水对照组均明显增强;表达强度顺序为海马＞黑质＞纹状体＞额叶＞嗅束,在胼胝体未见表达。而且海马区表达呈区域性分布CA3区＞CA2区＞CA1;(9)RT-PCR进行mRNA水平检测显示,Lactacystin组大鼠脑区HSP70表达较对照组要强,其表达顺序与免疫组化相一致,且不同时期表达量呈明显的时间（略..）依从性,半定量分析显示较对照组具有统计学意义(p＜0.05)。结论:帕金森病大鼠行为学的改变是由α-synuclein蛋白蓄积逐渐增加所驱使,而非减少的TH神经元;此外,HSP70在帕金森病海马中表达是增高的,尤其是黑质、海马、额叶和嗅束区,且具有时间依从性,增加的热休克蛋白可能参与拮抗蛋白酶体抑制的毒性而起到神经细胞保护作用,对改善其行为和病理学退变可能起着一定的保护作用。

以上为本篇毕业论文范文HSP70在蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病大鼠模型中的表达及意义的介绍部分。

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