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PPARγ对3T3-L1脂肪前体细胞分化的作用及其对11β-HSD1影响的研究
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PPARγ对3T3-L1脂肪前体细胞分化的作用及其对11β-HSD1影响的研究
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PPARγ对3T3-L1脂肪前体细胞分化的作用及其对11β-HSD1影响的研究
PPARγ对3T3-L1脂肪前体细胞分化的作用及其对11β-HSD1影响的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】
:目的:脂肪细胞的增殖和分化异常会引起脂肪组织过多堆积,导致能量代谢失衡,引起肥胖及与肥胖相关的一系列疾病。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)是核受体超家族的成员,是一类转录因子,它的激活影响了脂肪分化通路;11β-羟化类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)是一种微粒体酶,主要功能是催化无活性的可的松为有活性的氢化可的松,糖皮质激素对细胞的增殖、分化、凋亡都有重要作用。我们用适当的条件将3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化为成熟的脂肪细胞,观察在分化过程中,PPARγ激动剂对脂肪细胞形态和标志基因表达的作用以及PPARγ激动剂和拮抗剂对11β-HSD1、GR表达的影响,探讨PPARγ激动剂对脂肪细胞分化影响可能存在(略..)的机理。方法:1、3T3-L1脂肪前体细胞生长接触至单层后,采用0.5mMIMX+2uM地塞米松+10ug/ml胰岛素诱导方案诱导其分化至一定天数,同时以PPARγ激动剂—吡格列酮对分化过程中的细胞进行刺激,采用油红O染色,在倒置显微镜下观察细胞形态、脂滴的形成;采用实时荧光定量PCR技术观察脂肪细胞分化标志基因如C/EBPα、LPL、FAS、aP2和GLUT4表达的变化。2、利用Westernblot和实时荧光定量PCR技术,观察3T3-L1脂肪前体细胞分化过程中11β-HSD1、GR表达的变化以及不同浓度PPARγ激动剂吡格列酮和拮抗剂Gw9662对11β-HSD1、GR表达的影响。结果:1、3T3-L1脂肪前体细胞贴壁后呈现梭形(此处忽略..)的成纤维细胞形态;到分化诱导至第四天时,脂肪细胞的脂滴出现并逐渐明显,到诱导分化第八天时,视野中大约80%的细胞均已经分化成为形态典型的成熟脂肪细胞,吡格列酮刺激组在分化至第四天已经大约有60%的细胞分化成熟,第八天则有约95%的细胞分化成熟。在3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化过程中,有关脂肪细胞分化标志基因如C/EBPα、LPL、FAS、aP2和GLUT4,其表达均随着分化天数的增加明显上调(P<0.01)。在PPARγ激动剂—吡格列酮刺激的3T3-L1细胞,这些基因的上调幅度大于未加刺激的正常3T3-L1组(P<0.01)。2、11β-HSD1的表达随着3T3-L1脂肪前体细胞分化天数的增加而上升,加入吡格列酮刺激后其表达量下降;而加入GW(略..)9662刺激后,11β-HSD1的表达增加(P<0.01)。GR的表达量尽管随着脂肪细胞分化天数的增加而上升,但其表达量较加入吡格列酮刺激时降低(P<0.01);加入GW9662刺激后,GR的表达下降(P<0.05)。11β-HSD1的表达随着吡格列酮刺激浓度的增加和时间的延长而下降(P<0.01),GR的表达则上升(P<0.01);相反,随着GW9662刺激浓度的增加和时间的延长(P<0.01),11β-HSD1的表达逐渐上升,GR的表达则下降(P<0.01)。结论:1、上述脂肪细胞诱导分化方案能使3T3-L1脂肪前体细胞有效分化,且分化均一,分化效率高,成熟时细胞大而圆,脂滴明显,部分可融合成较大的脂滴。PPARγ激动剂—吡格列酮对3T3-L1脂肪前体细胞的分化有促进作用。2、PPARγ激动剂—吡格(此处忽略..)列酮下调3T3-L1细胞中11β-HSD1的表达;PPARγ拮抗剂—GW9662则上调11β-HSD1的表达,这种作用呈浓度和时间依赖。GR的表达量变化则呈相反的趋势。PPARγ和11β-HSD1促进脂肪细胞分化的作用途径可能存在交叉,并且通过PPARγ和GR这两种核受体的相互作用实现。
以上为本篇毕业论文范文
PPARγ对3T3-L1脂肪前体细胞分化的作用及其对11β-HSD1影响的研究
的介绍部分。
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