人BDNF基因在大肠杆菌与COS-7细胞中的表白及功能研究

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人BDNF基因在大肠杆菌与COS-7细胞中的表白及功能研究

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人BDNF基因在大肠杆菌与COS-7细胞中的表白及功能研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标：克隆人脑源性神经养分因子(Brain-derivedneurotrophicfactor，BDNF)基因在原核与真核体系中进行重组表白，并进行表白蛋白的功能检测为开发高活性的hBDNF基因重组蛋白跟基因医治载体奠定了基本。方法：从外周血（此处忽略..）白细胞基因组DNA中经PCR扩增出hBDNF基因片段。将其克隆至pUCm-T载体中，测序鉴定后，再定向插入原核表白载体pBV220跟真核表白载体pTracer~(TM)-EV／V5-His。经鉴定后分辨导入原核跟真核细胞中进行表白。表白产物经SDS-（本文此处忽略..）PAGE、RT-PCR、ELISA、Dot-ELISA、MTT跟促PC12成长状况学察看等方法进行其抗原跟生物学活性等功能的检测。成果：克隆的人BDNF基因测序成果与GeneBank报告的完全一致，并成功构建了原核跟真核表白载体。分辨在大肠杆（此处忽略..）菌跟COS-7细胞中进行表白。在大肠杆菌中表白的包涵体蛋白约占菌体总蛋白的21％。通过透析复性后，获得存在活性的表白蛋白。该复性后蛋白跟COS-7细胞表白产物均存在较好的抗原活性跟生物学活性。论断：通过基因重组技巧获得了人BDNF基因，并在大肠杆（略..）菌跟人BDNF基因在大肠杆菌与COS一7细胞中的表白及功能研究中文摘要COS一7细胞中成功表白，表白蛋白存在良好的生物学活性跟抗原活性，此实验为生物工程技巧研制rhBD刊下重组蛋白跟基因医治载体提供了根据。

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