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人脐带间充质干细胞与环孢素相互作用的研究

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毕业论文范文题目:人脐带间充质干细胞与环孢素相互作用的研究,论文范文关键词:人脐带间充质干细胞与环孢素相互作用的研究
人脐带间充质干细胞与环孢素相互作用的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的:随着对间充质干细胞(Mesenchymalstemcell,MSC)多向分化潜能及免疫调节特性的深入研究,间充质干细胞已成为组织工程和再生医学细胞治疗的主要候选干细胞之一,同时也被越来越多的应用到异基因造血干细胞移植(allogeneichaematopoieticstemcelltransplantation,Allo-HSCT)中,用来防治移植物抗宿主疾病(graft-versus-hostdisease,GVHD)的发生。环孢素(CyclosporineA,CsA)作为免疫抑制剂的代表,在肾移植、骨髓移植等器官移植中有广泛的使用,明显降低了移植物排异的发生,使器官移植学能够进一步的发展;但是环孢素用药时间长,肝肾、中枢神经系统等重要脏器的毒副作用(略..)大,需要频繁监测血药浓度来调整剂量,所以环孢素与其它免疫抑制剂联合应用受到推荐,联合用药在不影响免疫抑制作用的同时,降低了环孢素的使用剂量,减少了不良反应的发生。本实验旨在研究脐带间充质干细胞(umbilicalcordmesenchymalstemcell,UC-MSC)对T淋巴胞的活化增殖的免疫调节效应,以及与环孢素之间的相互作用,特别是二者在免疫抑制方面是否有协同效应,为指导临床用药提供一定的理论基础。方法:用MTT的方法检测环孢素对MSC增殖的影响;用流式细胞仪检测环孢素对MSC凋亡及细胞周期影响;PHA刺激下的人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)与人脐带MSC共培养,实验组加入不同浓度的环(本文此处忽略..)孢素,通过ELISA的方法检测人外周血单个核细胞IFN-γ的分泌情况来观察脐带间充质干细胞或/和环孢素的免疫调节效应。结果:单独应用不同浓度的环孢素(30ng/ml、60ng/ml、120ng/ml、240ng/ml、480ng/ml)对脐带MSC增殖的抑制率与无药对照组之间无显著差异(P0.05)。小剂量环孢素(30ng/ml、60ng/ml、120ng/ml)作用脐带间充质干细胞72h后,MSC的凋亡率分别为13.26%、14.76%、18.59%,各组之间无显著差异(P0.05),各组凋亡率均显著高于无药物作用下的MSC凋亡率(0.27%);大剂量环孢素(240ng/ml、480ng/ml)作用脐带间充质干细胞72h后,MSC的凋亡率分别为37.58%和57.14%,均显著高于无药对照组及小剂量组。脐带MSC经过含有环孢素的培养基培养72h后,随环孢素浓度的增加,各实验组G0/(本文此处忽略..)G1期细胞比值逐渐降低,而S期细胞比值逐渐升高,G2期变化不明显;且G0/G1期及S期与对照组相比,差异均具有统计学意义(P0.05);提示环孢素可明显促进脐带MSC增殖,促进细胞由G0/G1期进入S期。在MSC与PBMC共培养体系中,MSC组IFN-γ的分泌显著低于无MSC组(P0.05),且高浓度MSC组IFN-γ的分泌显著低于低浓度MSC组,即脐带MSC能够有效抑制PHA刺激下PBMCIFN-γ的分泌,并与MSC浓度呈正相关;等量的PBMC在PHA刺激下,MSC组、CsA组、MSC+CsA组的IFN-γ分泌分别为506.5pg/ml、213pg/ml、150pg/ml,均显著低于对照组(PBMC+PHA)的1337pg/ml,差异具有统计学意义(P0.01),且各实验组间IFN-γ分泌为:MSC组Cs(文章此处忽略..)A组MSC+CsA组,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:脐带MSC能有效抑制PHA刺激下T淋巴细胞的IFN-γ分泌,并呈现出MSC浓度依赖性,提示其对T淋巴细胞的活化增殖具有一定的免疫抑制作用,这可能是MSC减轻GVHD的机制之一。另外脐带MSC与CsA在免疫抑制方面具有协同作用;环孢素对MSC增殖无抑制作用,提示CsA不会影响MSC的细胞活性和功能。本实验的结果为脐带MSC治疗GVHD以及与CsA联合应用的安全有效性提供一定的理论依据。


以上为本篇毕业论文范文人脐带间充质干细胞与环孢素相互作用的研究的介绍部分。
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