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绵羊Oct4人工合成与Sox2克隆及逆转录病毒载体构建

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毕业论文范文题目：绵羊Oct4人工合成与Sox2克隆及逆转录病毒载体构建，论文范文关键词：绵羊Oct4人工合成与Sox2克隆及逆转录病毒载体构建
绵羊Oct4人工合成与Sox2克隆及逆转录病毒载体构建毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：诱导多能性干细胞的研究已成为当今医学和生物学等研究的热点领域,Oct4、Sox2、Klf4、Lin28和Nanog等多能性相关因子的研究也愈发重要。但迄今仍无通过绵羊诱导因子获得绵羊iPS细胞系的有关报道。本研究分别采用分子生物学和人工合成的方法,克隆获得绵羊Sox2基因编码区序列并合成了Oct4编码区序列,在对其进行序列分析的基础上,对其相关蛋白的特征进行了预测。在此基础上,建立了绵羊Sox2基因的逆转录病毒载体（本文此处忽略..）并获得病毒上清,将所获的病毒上清侵染绵羊成纤维细胞后,观察其侵染能力并对其进行转录水平的检测。该项研究为进一步完善绵羊iPS诱导方法奠定了基础。本研究主要结果和结论如下。(1)通过生物软件分析整理得到绵羊Oct4基因编码区1083bp的理论序列,并进行了人工合成。利用GenBank数据库资料和DNAMAN、DNAStar等生物软件,对绵羊Oct4基因编码区序列进行分析,结果表明其与牛的同源性达到97.8%,同时与猪、小鼠和大（本文此处忽略..）鼠等物种Oct4基因的同源性也较高；预测绵羊Oct4蛋白序列并对其进行分析,结果同样表明,其与牛的同源性高达98.3%,而与猪、小鼠和大鼠等物种Oct4蛋白同源性较高。而且绵羊Oct4蛋白含有细胞核定位模体和POU结构域。(2)利用胎绵羊肌肉组织DNA扩增并获得大小约为1000bp的绵羊Sox2基因特异条带,并经PCR和双酶切鉴定正确。对所获得的Sox2基因进行测序,其与GenBank中绵羊Sox2序列的相似性为100%。利用上述方法对克隆所（本文此处忽略..）获的绵羊Sox2基因编码区序列进行分析,结果表明其与牛的同源性达到99.5%,同时与猪、小鼠和大鼠等物种Sox2基因的同源性也较高；预测绵羊Sox2蛋白序列并对其采用相同方法进行分析,结果同样表明,其与牛的同源性高达100%,而与猪、小鼠和大鼠等物种Sox2蛋白同源性较高。而且绵羊Sox2蛋白含有细胞核定位模体和HMG结构域。(3)利用上述获得的Sox2基因与逆转录病毒载体pMXs连接,构建了逆转录病毒载体pMXs-Sox2,并经PC（文章此处忽略..）R、双酶切及测序鉴定正确。所获得的Sox2基因的病毒上清具有侵染感染能力,且其具有转录能力。综上所述,本研究成功获得绵羊Oct4和Sox2基因编码区序列,并成功构建了具有侵染能力的绵羊Sox2逆转录病毒载体pMXs-Sox2。为建立绵羊iPS细胞系进一步研究奠定了基础。

以上为本篇毕业论文范文绵羊Oct4人工合成与Sox2克隆及逆转录病毒载体构建的介绍部分。

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