肺移植瘤裸鼠透明质酸的瘤学分布及特异结合蛋白（p-CLP）的示踪

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肺移植瘤裸鼠透明质酸的瘤学分布及特异结合蛋白（p-CLP）的示踪

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毕业论文范文题目：肺移植瘤裸鼠透明质酸的瘤学分布及特异结合蛋白（p-CLP）的示踪，论文范文关键词：肺移植瘤裸鼠透明质酸的瘤学分布及特异结合蛋白（p-CLP）的示踪
肺移植瘤裸鼠透明质酸的瘤学分布及特异结合蛋白（p-CLP）的示踪毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究目的:在研究人的肿瘤、肝病、眼科病、骨骼病等疾病的过程中,发现血液中透明质酸(HA)的含量高于正常值。HA主要分布在细胞间质中,这些HA均以复合物的形式以共价键与软骨链蛋白(CLP)结合。一定浓度的盐酸胍可以使CLP与HA解离,目前没有人报道过猪软骨链蛋白(p-CLP)体内分布和代谢过程。为此,我们对以下内容进行初步探讨:①p-CLP的分离提取;②p-CLP与HA体外结合特征;③肺移植瘤裸鼠HA的瘤学分布;④p-CLP在肺移植瘤裸鼠中的组织分布。希望通过以上研究,获得p-CLP的生物学和实验核医学显像研究基础数据,为肺肿瘤成像和其它一些疾病的早期诊断提供实验依据。研究方法:1.肺腺癌动物模型与HA的瘤学分布A549肺腺癌细胞接种BALB/C-nunu荷瘤裸鼠,分别饲养3、4、5、6周,免疫组化SP法测定HA在（此处忽略..）不同周龄的肺移植瘤裸鼠中的瘤内分布。2.p-CLP的分离、纯化、鉴定利用亲和层析从猪肋软骨分离纯化p-CLP,通过环氧氯丙烷活化Sepharose4B、HA-AH-Sepharose4B亲和层析柱的制备,p-CLP粗制品匀浆、酶解、透析、浓缩、过柱、纯化制成p-CLP;然后SDS-PAGE凝胶电泳分析p-CLP的分子量;p-CLP氨基酸分析确定p-CLP中氨基酸的含量;体外放射竞争结合分析测定p-CLP与HA的亲和特性。3.p-CLP的碘标记及示踪分析Na125I氯胺-T氧化法标记p-CLP,摸索最佳反应条件,制备高比活度的放射性探针;示踪分布实验通过给肺移植瘤裸鼠尾静脉注射125I-p-CLP,分别在5min、20min、30min、45min、1h、1.5h、3h、5h、7h时间段处死裸鼠,取血及重要脏器测量放射性,获得p-C（文章此处忽略..）LP在裸鼠体内的代谢和分布参数。研究结果:1.HA免疫染色的阳性率为93%,免疫组化3-6周阳性组织光密度值分别为150.78±10.25、160.13±8.54、176.83±13.46、185.95±13.61,对照组为37.43±5.17。t检验显示各组有统计学意义(P0.05)。免疫组化法发现接种3-6周裸鼠随着接种时间的延长,HA表达逐渐增强,HA主要分布于肿瘤细胞周边间质,肿瘤组织HA表达丰富,而正常组织表达微弱。2.亲和层析法提取p-CLP,紫外扫描为单一峰,抽提蛋白得率为2.21%,SDS-PAGE电泳显示p-CLP有两条条带,分别为(44.36±2.90)KD和(71.58±4.13)KD;p-CLP氨基酸分析显示谷氨酸含量最高(2.26mg/20mg),酪氨酸含量为0.91mg/20mg;体外放射竞争结合分析实验显示p-CLP与HA的亲和力常数Ka为(6.30±1.73)×109M-1。3.p-CLP标记显示当125I活度为0.925MBq、1.85MBq、3.7MBq、7.4MBq各组间标记率（文章此处忽略..）有显著性差异(均P0.05),7.4MBq、11.1MBq、14.8MBq组间标记率无差异(均P0.05);当氯胺-T浓度为0.312mg/ml、0.625mg/ml时与其他各组间标记率有差异(均P0.05),其他各组间标记率无差异(均P0.05);在30s-8min的标记时间中对标记率影响不大,各组均无差异(均P0.05);125I活度、氯胺-T浓度、标记时间对放射化学纯度影响不大,各组无显著性差异(均P0.05);氯胺-T浓度为0.625mg/ml和标记时间为1min时125I-p-CLP生物结合活性最高;p-CLP示踪分布实验表明,p-CLP浓度在体内20min时达到峰值,随着时间的延长,p-CLP在肿瘤内的分布百分比逐渐升高。结论:1.HA在肺肿瘤组织中有增高的趋势,其中在肿瘤细胞周边间质中有过多表达,随着肿瘤生长时间的延长,HA随肿瘤细胞的增长表达逐渐增强。2.p-CLP的最佳标记条件为:125I7.4MBq、（文章此处忽略..）1.25mg/ml氯胺-T30μl、p-CLP0.5mg,反应体积100μl,反应1min。3.示踪实验显示,p-CLP在裸鼠体内早期呈全身分布,经肝脏代谢、部分由肾脏排泄,在裸鼠肺肿瘤模型中p-CLP能与肺肿瘤细胞间质中的HA特异结合。

以上为本篇毕业论文范文肺移植瘤裸鼠透明质酸的瘤学分布及特异结合蛋白（p-CLP）的示踪的介绍部分。

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