羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外增殖克制造用及其机制研究

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羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外增殖克制造用及其机制研究

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毕业论文范文题目：羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外增殖克制造用及其机制研究，论文范文关键词：羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外增殖克制造用及其机制研究
羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外增殖克制造用及其机制研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：癌症是指体细胞失去把持的,无穷制的增殖,是重大迫害国民身材健康的恶性疾病之一。目前癌症的医治方法包含有手术切除,药物医治跟喷射医治等在内的综合医治。其中,新兴抗肿瘤药物的开发是当前癌症医治范畴的热点研究方向,大量天然药物及合成药物的接踵问世及利用在必定程度上对进步及改良癌症的防备,医治及愈后起到了重要作用。河北省是食管癌的高发区,多年来我实验室致力于抗食管癌药物的开发与研究。三萜类化合物羽扇豆醇酯(Lupeol)是从多种食品及抗肿瘤中草药中提取的活性成分,在体外对多种肿瘤细胞如肺癌、前列腺癌、黑色素瘤及白血病细胞均有较好的克制增殖跟引诱分化作用。我实验室在对食管癌细胞系的抗肿瘤后果筛查研究中发明,羽扇豆醇酯对食管癌TE-1细胞存在明显的体外增殖克制后果,咱们并对其药物作用机制进行了进一步的研究,为羽扇豆醇酯的临床开发提供了实际根据。第一部分羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外引诱凋亡作用及其机制研究目标:察看不同浓度的羽扇豆醇（文章此处忽略..）酯体外作用TE-1细胞后细胞状况及超微构造的变更,检测羽扇豆醇酯对TE-1细胞的增殖克制后果,并从基因及蛋白程度探讨其引诱凋亡作用机理。方法:1将不同浓度(25﹑50﹑10﹑150跟200μM)的羽扇豆醇酯分辨作用TE-1细胞24、48跟72小时,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测细胞增殖克制率。250﹑100跟150μM的羽扇豆醇酯分辨作用TE-1细胞24小时,瑞式姬姆萨染色后在倒置相差显微镜下察看细胞状况跟构造的变更。3150μM羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48小时后,在透射电子显微镜下察看细胞超微构造变更。4采取RT-PCR方法检测50、100跟150μM的羽扇豆醇酯分辨作用TE-1细胞48小时后,凋亡相干基因Caspase-3﹑-8﹑-9,Fas,Bax跟Bcl-2表白的变更。5采取westernblotting方法检测50﹑100跟150μM的羽扇豆醇酯分辨作用TE-1细胞48小时后,PARP﹑Fas﹑Bax跟Cyt-c蛋白表白的变更。成果:1经不同浓度(25﹑50﹑100﹑150跟200μM)的羽扇豆醇酯作用TE-1细胞24﹑48跟72小时后,与畸形对比组比拟,实验组细胞增殖克制率在25﹑50﹑100跟150μM之间存在（文章此处忽略..）明显性差别(P0.01)。250﹑100跟150μM的羽扇豆醇酯分辨作用TE-1细胞24小时,瑞式姬姆萨染色后在倒置相差显微镜下察看可见细胞凋亡状况学变更,由本来的多边形变为圆形,细胞体积缩小,成长稀少,可见胞质稀释等,对比组细胞状况均一,成长密集,未见明显改变。3150μM羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48小时后,在透射电子显微镜下察看可见细胞膜增厚,染色质高度稀释,边聚核膜下,厚薄不均,构成新月状,部分核膜向外成锐角崛起,胞质中可见很多空泡。对比组细胞名义大量微绒毛,胞质内可见线粒体,粗面内质网跟游离核糖体。4RT-PCR分析成果显示,50﹑100跟150μM实验组Caspase-3﹑-8﹑-9,Fas跟BaxmRNA的表白水均匀明显高于对比组,Bcl-2mRNA的表白程度低于对比组,存在明显性差别(P0.05)。5westernblotting检测成果显示,50﹑100跟150μM实验组细胞中PARP、Fas﹑Bax跟Cyt-c蛋白的表白程度高于对比组,存在明显性差别(P0.05)。论断:羽扇豆醇酯可通过逝世亡配体道路跟线粒体（略..）道路双重通路引诱TE-1细胞凋亡,发挥克制细胞增殖作用。第二部分羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外阻滞周期作用及其机制研究目标:检测羽扇豆醇酯对TE-1细胞的周期阻滞作用,并从基因跟蛋白表白程度探讨其作用机制。方法:1流式细胞技巧检测不同浓度(50、100跟150μM)羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48小时后细胞周期分布及凋亡情况。2westernblotting方法检测50、100跟150μM羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48小时后,细胞周期蛋白CyclinD1跟细胞周期蛋白依附性激酶CDK4的表白变更。3RT-PCR方法检测50﹑100跟150μM羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48小时后,细胞周期调节基因p53表白的情况。成果:1流式细胞术显示不同浓度(50、100跟150μM)羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48小时后,处于G_0/G_1期的细胞增加,G_1期细胞比例明显高于对比组(P0.05),实验组细胞凋亡率高于对比组(P0.05)。2westernblotting分析方法成果显示,50、100跟150μM羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48h后,实验组CyclinD1跟CDK4蛋白的表白程度低于对（文章此处忽略..）比组(P0.05)。3RT-PCR方法成果表明,50、100跟150μM羽扇豆醇酯作用TE-1细胞48h后,实验组p53mRNA的表白程度高于对比组(P0.05)。论断:羽扇豆醇酯可能体外引诱TE-1细胞凋亡,阻滞细胞周期。其作用机理与Lupeol下调CyclinD1跟CDK4的蛋白表白,上调抑癌基因p53的表白有关。

以上为本篇毕业论文范文羽扇豆醇酯对人食管癌TE-1细胞体外增殖克制造用及其机制研究的介绍部分。

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