构建IA-2构象表位研究1型糖尿病B跟T淋巴细胞交换道路

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构建IA-2构象表位研究1型糖尿病B跟T淋巴细胞交换道路

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毕业论文范文题目：构建IA-2构象表位研究1型糖尿病B跟T淋巴细胞交换道路，论文范文关键词：构建IA-2构象表位研究1型糖尿病B跟T淋巴细胞交换道路
构建IA-2构象表位研究1型糖尿病B跟T淋巴细胞交换道路毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景：1型糖尿病（type1diabetesmellitus，T1DM）是儿童内分泌疾病中最常见的慢性病之一，全世界15岁以下的儿童中，每年大概有70000人被发明患有T1DM[1]。本身免疫性T1DM重要是由T淋巴细胞介导的一种器官特异性（针对胰岛组织）本身免疫性疾病，在T1DM患者血清中，可能检测出多种本身抗体，如胰岛素本身抗体（insulinautoantibody，IAA）、谷氨酸脱羧酶抗体（Glutamicaciddecarboxylaseantibody，GADA）、胰岛素瘤相干蛋白-2抗体（Insulinomaassociatedprotein-2antibody,IA-2A）及近年来发明的锌转运体8抗体（Znictransporter8antibody，ZnT8A）。对本身免疫病发病机制的研究发明，T跟B淋巴细胞可能通过开释可溶性因子或同种彼此作用交换信息来进行交换，B淋巴细胞的重要功能之一是递呈抗原,特别是提呈本身抗原至抗原特异性T细胞来介导炎症反应的产生，但目前国内外对这一过程更加深刻的研究还比较少。目标：胰岛素瘤相干蛋白-2（IA-2）是一种重要T1DM本身抗原，以往的研究中咱们发明位于IA-2第843-855位氨基酸为重要的B细胞表位区域，咱们设计合成了两种不同空间构象的IA-2843-855表位多肽(存在β折叠构造的亲本IA-2_(843-855)多肽跟α螺旋构造IA-2_(843-855)多肽)，以研究T细胞与IA-2构象限度性表位之间的彼此作用，并且比较IA-2表位空间构象跟氨基酸一级序列在B-T细胞彼此作用中所起作用的差别，（此处忽略..）从而进一步明白在B-T细胞彼此交换道路中，毕竟是氨基酸构成的空间构象还是氨基酸一级序列起重要作用，深刻揭示1型糖尿病免疫学发病机制，为1型糖尿病的防备跟医治提供新的研究策略。方法：1．纳入标准跟分组选取2009年11月至2010年11月于我院内分泌科住院且病程≤1年，抗体检测IA-2阳性确诊为1型糖尿病的患者12例，2010年1月至5月于我院内分泌科住院且病程≤1年的2型糖尿病患者12例及健康意愿者12人作为对比组。分组：共分为T1DM组12例，年纪5-19岁，均匀（10.5±3.9）岁，病程0-11个月，均匀（5.0±3.2）个月，其中男4例，女8例。T2DM组12例，年纪27-42岁，均匀（35.1±4.6）岁，病程2-12个月，均匀（5.8±3.3）个月，其中男7例，女5例。T1DM跟T2DM诊断及分类按世界卫生组织(WHO,1999年)标准。健康对比组12例，年纪12-28岁，均匀（22.1±4.3）岁，其中男6例，女6例，打消心、脑、肝、肾等慢性疾病及内分泌疾患，均无糖尿病家族史跟其它本身免疫性疾病史。空腹跟餐后2h血糖均畸形。所有受试者均获得悉情批准。2.外周血单个核细胞（PeripheralBloodMononuclearCell，PBMC）中淋巴细胞的增殖反应抽取外周血10ml，肝素抗凝后用FicollHypaque密度梯度离心方法分别外周血单个核细胞（PBMC），在96孔板（3×10~5细胞/孔）跟24孔板(1×10~6细胞/孔)中给予IA-2多肽野生型β折叠构造跟α螺旋构造型（10μl/ml）的刺激，动物血凝素（Phytohemagglutinin，PHA）（5μg/ml）作为阳性参照，独特培养于RPMI1640中(10%FBS)，5%CO2前提下。66小时后，96孔板每孔参加10μ（此处忽略..）lCCK-8细胞增殖检测试剂，持续培养6小时后，酶标仪检测吸光度，打算刺激指数SI。SI=（实验组OD值-本底OD值）/（空白对比组OD值-本底OD值）3.PBMC培养上清中细胞因子的测定：收集24孔板内细胞悬液，离心后保存上清，利用细胞因子检测试剂盒检测各组细胞培养上清中IL-2、IL-4细胞因子。成果：1、淋巴细胞的增殖情况：T1DM、T2DM跟健康人组PHA刺激PBMC的刺激指数SI分辨为1.47±0.17、1.49±0.22、1.58±0.27；野生型β折叠构造IA-2多肽刺激PBMC的刺激指数分辨为1.33±0.05、1.13±0.06、1.11±0.06；α螺旋构造IA-2刺激PBMC的刺激指数分辨为1.27±0.06；1.19±0.05、1.09±0.05。T1DM组与T2DM跟健康组比拟，野生型β折叠构造IA-2多肽跟α螺旋构造IA-2多肽刺激指数较高，差别存在统计学意思（P0.05）。但这两种不同构造的多肽之间对淋巴细胞的增殖影响未见明显差别（P0.05）。2、细胞因子的检测成果：1）IL-4的分泌：T1DM、T2DM跟健康人组空白对比T淋巴细胞分泌的IL-4（ng/ml）的程度分辨为24.82±2.13、28.14±2.92、16.51±1.79；PHA刺激T淋巴细胞分泌的IL-4（ng/ml）的程度分辨为23.51±1.65、27.42±2.86、17.92±1.15；野生型β折叠构造IA-2多肽刺激T淋巴细胞分泌的IL-4（ng/ml）的程度分辨为13.61±1.17、34.36±2.28、23.13±1.96；α螺旋构造IA-2多肽刺激T淋巴细胞分泌的IL-4（ng/ml）的程度分辨为16.42±2.23、30.62±2.74、21.22±3.11。野生型β折叠构造跟α螺旋构造IA-2多肽刺激T1DM组的T淋巴细胞较T2DM跟健康组分泌较少的IL-4，差别存（此处忽略..）在统计学意思（P0.05）。但这两种不同构造的多肽之间刺激T细胞分泌IL-4的程度未见明显差别。2）IL-2的分泌：T1DM、T2DM跟健康人组空白对比组T淋巴细胞分泌的IL-2（ng/ml）的程度分辨为15.99±1.16、13.15±2.43、14.05±1.72；PHA刺激T淋巴细胞分泌的IL-2（ng/ml）的程度分辨为14.31±1.11、12.13±2.23、16.19±1.05；野生型β折叠构造IA-2多肽刺激T淋巴细胞分泌的IL-2（ng/ml）的程度分辨为17.93±1.41、15.00±1.18、14.11±1.64；α螺旋构造IA-2刺激T淋巴细胞分泌的IL-2（ng/ml）的程度分辨为19.24±2.14、13.77±0.74、14.48±1.92。野生型β折叠构造跟α螺旋构造IA-2多肽刺激T1DM组的T淋巴细胞较T2DM跟健康组分泌较多的IL-2，差别存在统计学意思（P0.05）。但这两种不同构造的多肽之间刺激T细胞分泌IL-2的程度未见明显差别。3）IL-2/IL-4：T1DM、T2DM跟健康人组空白对比组IL-2/IL-4的比值分辨为0.64±0.05、0.47±0.11、0.85±0.13；PHA组分辨为0.61±0.10；0.44±0.09、0.90±0.12；野生型β折叠构造IA-2多肽组这一比值分辨为1.32±0.21、0.47±0.12、0.76±0.08；α螺旋构造IA-2多肽组这一比值分辨为1.17±0.07、0.45±0.14、0.68±0.05。野生型β折叠构造跟α螺旋构造IA-2多肽刺激T1DM组T细胞分泌IL-2/IL-4高于T2DM及健康对比组，差别存在统计学意思（P0.01）。论断：无论是野生型β折叠构造IA-2多肽还是α螺旋构造IA-2表位多肽均可能与T1DM患者BCR特异性结合从而提呈至T细胞发挥作用，但这两种不同构象多肽对PBMC的刺激作用未发明差别。IA-2这两种不（此处忽略..）同构象表位多肽均能刺激IA-2阳性的T1DM患者T细胞产生更多的Th1从而破坏Th1/Th2的均衡导致本身免疫的重大破坏。

以上为本篇毕业论文范文构建IA-2构象表位研究1型糖尿病B跟T淋巴细胞交换道路的介绍部分。

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