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杨梅黄酮对MPP~+损伤的MES23.5细胞的保护作用及可能机制研究

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毕业论文范文题目:杨梅黄酮对MPP~+损伤的MES23.5细胞的保护作用及可能机制研究,论文范文关键词:杨梅黄酮对MPP~+损伤的MES23.5细胞的保护作用及可能机制研究
杨梅黄酮对MPP~+损伤的MES23.5细胞的保护作用及可能机制研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)是老年人常见的一种神经系统退行性疾病,其最主要的病理学特征为黑质致密带(substantianigraparcompacta,SNpc)多巴胺(dopamine,DA)能神经元脱失及伴发的纹状体轴突末梢DA的耗竭。PD的确切病因和发病机制尚不清楚,可能与遗传因素、环境因素、氧化应激、炎症反应、黑质(substantianigra,SN)铁聚积和细胞凋亡等多种因素有关。目前,临床上尚无成熟有效的药物或方法来阻止或逆转PD的病情发展,因此寻找天然、高效、低毒的抗PD药物成为了新的研究热点。杨梅黄酮(myricetin)是一种天然的黄酮类物质。已有实验证明杨梅黄酮具有抗炎、抗氧化、清除自由基等多种生物活性。为了探讨杨梅黄酮对PD是否具有防治作用及其可能的作用,本实验应用经典的神经(文章此处忽略..)毒性药物1-甲基-4-苯基吡啶阳离子(1-methyl-4-phenylpyridiniumion,MPP+),作用于多巴胺能神经细胞系MES23.5细胞置备PD细胞模型,采用甲基噻唑基四唑(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法、Hochest染色、流式细胞仪分析技术(flowcytometry,FCM)、WesternBlots技术,RT-PCR等多种实验手段,观察杨梅黄酮对MPP+损伤的MES23.5细胞的保护作用,并探讨了其保护作用的可能机制。实验结果如下:1.MPP+(200μmol/L)处理MES23.5细胞24h后,细胞存活率明显降低,与正常对照组相比差别具有高度统计学意义(P0.01)。10-8,10-9mol/L的杨梅黄酮共处理后,可明显减轻MPP+对细胞的损伤(P0.05)。2.MPP+(200μmol/L)处理MES23.5细胞24h后,细胞出现明显的凋亡形态学改变(本文此处忽略..),如细胞核固缩、核碎裂等,与正常对照组相比差别具有高度统计学意义(P0.001)。10-9mol/L杨梅黄酮共处理可明显减轻上述变化(P0.05)。3.MPP+(200pmol/L)处理MES23.5细胞24h后,细胞线粒体跨膜电位差(mitochondrialtransmembranepotential,ΔΨm)明显降低,与正常对照组相比差别具有统计学意义(P0.05)。加10-9mol/L的杨梅黄酮共处理后,上述变化明显减轻(P0.05)。4.MPP+(200μmol/L)处理MES23.5细胞24h后,细胞内活性氧物质(reactiveoxidespecies,ROS)生成显著增加,与正常对照组相比差别具有高度统计学意义(P0.01)。加10-9mol/L的杨梅黄酮共处理后,上述变化明显减轻(P0.05)。5.MPP+(200μmol/L)处理MES23.5细胞24h后,凋亡效应酶Caspase-3的活性明显增加,与正常对照组相比差别具有高度统计学意义(P(本文此处忽略..)0.01)。应用10-9mol/L的杨梅黄酮共处理可显著抑制Caspase-3活性的增加(P0.05)。6.MPP+(200μmol/L)处理MES23.5细胞24h后,Bcl-2mRNA表达水平明显降低,BaxmRNA表达水平明显升高,Bcl-2/Bax比值下降,与正常对照组相比差别具有统计学意义(P0.05)。10-9mol/L的杨梅黄酮共处理可抑制MPP+对上述基因表达的影响(P0.05)。7.MPP+(200μmol/L)处理MES23.5细胞5min后,MKK4和JNK的磷酸化水平显著增加,与正常对照组相比差别具有高度统计学意义(P0.01)。10-9mol/L的杨梅黄酮能够抑制MPP+引起的MKK4和JNK的磷酸化水平的增高(P0.05)。以上结果表明,Mpp+处理MES23.5细胞后,细胞存活率降低,细胞核出现固缩、碎裂等形态学改变,ΔψM降低,ROS生成增加,Caspase-3的活性增加,凋亡相关激酶MMK4和JNK磷酸化增强(此处忽略..),Bcl-2/Bax比值下降,加入myricetin处理能部分逆转上述变化。这提示杨梅黄酮能够拮抗MPP+对细胞的毒性作用,其保护作用的机制与其抗氧化及抗凋亡机制相关。本实验研究了杨梅黄酮对DA能神经元的保护作用以及对其可能机制的初步探讨,为探索PD的预防与治疗的新方案提供新的实验依据。


以上为本篇毕业论文范文杨梅黄酮对MPP~+损伤的MES23.5细胞的保护作用及可能机制研究的介绍部分。
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