老龄大鼠心肌纤维化及洛沙坦干预作用的研究

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老龄大鼠心肌纤维化及洛沙坦干预作用的研究

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毕业论文范文题目：老龄大鼠心肌纤维化及洛沙坦干预作用的研究，论文范文关键词：老龄大鼠心肌纤维化及洛沙坦干预作用的研究
老龄大鼠心肌纤维化及洛沙坦干预作用的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的心肌纤维化不仅是高血压、冠心病及心力衰竭等疾病心脏重构发生、发展的重要机制之一，也是心脏老化的重要特征。衰老过程发生的心肌纤维化可能与肾素-血管紧张素系统(RAS)及各种纤维化相关多肽水平的变化有关。RAS的效应分子为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)，AngⅡ通过AT_1受体(AT_1R)刺激心脏成纤维细胞分泌转化生长因子-β_1(TGF-β_1)，并且激活TGF-β_1转录，使其从静止状态变成活跃状态。TGF-β_1在高血压、心肌梗死等器质性心脏病中的致纤维化作用已得到证实，但其在老龄大鼠心肌纤维化中的作用报道较少，且存在争议。洛沙坦为AngⅡ受体拮抗剂，研究表明，洛沙坦能够抑制自发性高血压大鼠心肌纤维化的发展，但其是否能够抑制增龄所致心肌纤维化的研究国内未见报道。本实验通过研究不同月龄大鼠心脏形态结构和TGF-β_1表达的变化，探讨老龄大鼠心肌纤维化的发生机制，并研究洛沙坦对老龄大鼠心肌纤维化的影响，为预防和逆转增龄所致心肌纤维化，恢复心脏正常结构及临床用药提供一定的理论依（略..）据。方法1．实验动物及分组：Wistar大鼠30只，随机分成三组：青年鼠10只(3月龄)，老龄鼠20只(18月龄)，其中，老龄组10只，用药组10只，洛沙坦(20mg／kg／d)溶于2～3ml蒸馏水中灌胃，用药8周。青年组和老龄组给予相应剂量的蒸馏水灌胃8周。喂养过程中洛沙坦组有一只大鼠死亡。2．标本的采集和处理：大鼠腹腔麻醉后，取出心脏，去除大血管、心房及右心室，取左心室(含室间隔)并称其重量(LVW)，除以体重(BW)得左室重量指数(LVMI)。3．心肌羟脯氨酸浓度(HC)的测量：羟脯氨酸在胶原蛋白中所占比例恒定，所以心肌组织内羟脯氨酸的浓度可代表胶原的水平，即心肌纤维化的程度。心肌组织匀浆，消化，水解，取上清，使用分光光度计在5SOnm处测各管吸光度。组织中经脯氨酸量(卜扩IO0mg)二【(测定管吸光度一空白管吸光度)*(标准管吸光度一空白管吸光度)」x标准管浓度。4.胶原VG染色:取左心室中上段横切面组织一块，常规固定、包埋，制成5协m厚切片，1%酸性品红和0.5%饱和苦味酸染色(VG染色)。使用图像分析系统进行半定量研究，测量心肌胶原容积分数(C（略..）VF)、心肌血管周围胶原面积和管腔面积比例(PvCA)。通过灰度调节区别胶原和非胶原成分。计算方法:CVF二胶原面积/总面积，其中胶原面积不包括血管周围胶原面积。PVCF二壁内小动脉管腔周围胶原面积/动脉管腔面积。5.TGF一p，免疫组化染色方法及结果判定切片常规脱蜡至水，免疫组化染色采用SP法。以PBS代替一抗作为阴性对照。应用计算机图象分析系统进行半定量研究。判断标准:O分:无表达;l分:极少量表达，面积小于2;5%;2分:少量表达，面积小于50%;3分:中量表达，面积小于75%;4分:大量表达，面积大于75%。6.统计学处理:各项观察指标以均数土标准差(‘又土s)表示，组间比较采用t一检验，相关分析采用等级相关分析，利用统计学软件SPSS11.0进行统计学处理，P0.05表示有显著的差异。结果1.各组大鼠BW、LVW及LvMI的比较(表1)。与青年组相比，老龄组BW、LvW明显增高，LVMI降低，且差异均有统计学意义(P0.001，P0.05，P0.05);与老龄组相比，洛沙坦组BW降低，差异有统计学意义(P0.05)。2.各组大鼠心肌（此处忽略..）HC、CVF和PVCA的比较(表2和图1):与青年组相比，老龄组HC、CVF和PVCA均增高，差异有统计学意义(均为P0.01);与老龄组相比，洛沙坦组HC、CVF和PVCA明显降低，且差异有统计学意义(P0.05，P0.01，P0.05)。3.各组大鼠心肌TGF一日，免疫组化染色及半定量分析(表3、图2及图3A一3D):青年组，心肌细胞浆仅见少量细小颗粒状物表达，散在分布，染色较弱。老龄组，心肌细胞浆表达明显增强，可见较多粗颗粒状物表达，弥散分布于细胞浆内。洛沙坦组，心肌细胞浆可见中量细小颗粒状物表达。TGF一p:免疫组化染色评分结果:TGF一p:表达在老龄组较青年组明显增强(P0.05)。4.TGF一p;与HC、CVF和PvCA等级相关分析TGF一p，表达与HC、CVF和PV(:A呈正相关(rs分别为0.462，0.391，0.416;P0.01，P0.05，P0.05)。讨论心肌纤维化是指心脏胶原浓度显著升高或胶原容积分数显著高于正常值。过多的纤维化可引起心肌结构紊乱，僵硬度增加，心脏顺应性降低，心律失常发生率增高，并可成为老年人慢性心功能不全难以逆（略..）转的原因之一。本实验中，与青年组相比，老龄组.HC、CVF和PVCA均增高，差异有统计学意义(均为P0.01)。这提示，随着增龄，心肌胶原含量逐渐增加，异常聚积在心肌间质和血管周围，形成心肌纤维化，心肌纤维化是心脏老化的一个重要特征。洛沙坦组反应心肌纤维化的各项检测指标(HC、PvCA和CvF)均较老龄组降低，差异有统计学意义(P0.()5，P0.01，P0.05)。这些结果提示，洛沙坦在一定程度上抑制了老龄大鼠心肌纤维化的形成，Angn可能参与了老龄大鼠心肌纤维化的形成。心肌胶原主要由心

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