肠道病毒71型-C4VP1基因原核表达及免疫原性研究

搜索高级搜索

原创毕业论文

肠道病毒71型-C4VP1基因原核表达及免疫原性研究

作者: 浏览:4次

免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
理工科专业论文
心理学论文范文
学前教育论文范文

毕业论文范文题目：肠道病毒71型-C4VP1基因原核表达及免疫原性研究，论文范文关键词：肠道病毒71型-C4VP1基因原核表达及免疫原性研究
肠道病毒71型-C4VP1基因原核表达及免疫原性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：肠道病毒71型(enterovirustype71,EV71)是人类手足口病的主要病原体。此外,还能引起无菌性脑膜炎,脑干脑炎和脊髓灰质炎样麻痹等多种神经系统疾病。迄今尚无有效的防治手段。VP1蛋白是EV71的主要衣壳蛋白,是病毒主要的中和抗原,它决定病毒的免疫原性。VPl基因具有与病毒血清型完全对应的遗传多样性。不仅可作为肠道病毒属内不同血清型分类的依据,而且可作为小RNA病毒科内不同属的分类参考。研究表明,蛋白质有很强的免疫原性,免疫动物可诱导产生高效价的抗体。通过提取病原体中具有免疫保护作用的蛋白,或利用DNA重组技术使重组体表达这类蛋白、多肽或合成肽制成的疫苗,称为亚单位疫苗。亚单位疫苗不含有感染性组分,无（文章此处忽略..）须灭活,也无致病性。自1981年成功地将口蹄疫病毒的VP3基因克隆到大肠埃希菌内并制成用于牛和猪的疫苗之后,迄今已研制出包括乙型肝炎疫苗在内的许多亚单位疫苗用于传染病的预防。EV71感染患者的治疗主要以对症治疗为主,缺乏特异、高效的抗病毒药物。、目前,尚无公认的十分有效的预防疫苗。VPl蛋白是EV71的主要中和抗原,是疫苗研究的首选成分。本研究用原核表达系统中表达的EV71VP1蛋白,免疫家兔,观察免疫效果。方法：1.从河北省疾病控制中心病毒病防治所提供的EV71C4亚基因型病毒临床分离株提取核酸,用VP1基因的特异性引物进行RT-PCR扩增,将扩增产物与pGEM-T载体连接,构建成重组质粒pGEM-T/VP1,转化入DH5α大肠杆菌扩（此处忽略..）增,提取质粒进行酶切鉴定和测序筛选重组子。2.经酶切鉴定和测序确认后,取双酶切的VP1片段和经过同样两种酶酶切的原核表达载体pET-his连接,构建原核表达质粒pET-his/VP1。3.将原核表达质粒pET-his/VP1转入表达宿主菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达携带有6×HIS标签的VP1蛋白,分别利用HIS单抗和EV71多抗经Western-blot鉴定无误后对目的蛋白进行优化表达。将大量诱导表达后的菌体在冰浴中超声破碎,分离上清和包涵体沉淀,对该蛋白的水溶性进行分析。将包涵体溶液进行SDS-PAGE,切下目的条带,透析袋中透析。定量所得纯化后的蛋白。4.动物实验：选取重约2kg健康新西兰白兔3只,用VP1蛋白背部皮下（本文此处忽略..）多点注射免疫,即于脊柱两侧选4～6点,共免疫3次,每次间隔2周。初次免疫每只注射剂量为600μg,加完全弗氏佐剂。加强免疫每只剂量为300μg,用不完全弗氏佐剂。末次免疫后15天,耳缘静脉取血,分离血清,用肠道病毒71型抗体IgG诊断试剂盒(酶联免疫法)检测血清抗体滴度。结果：1.用RT-PCR方法从EV71提取的核酸中扩增出VP1基因片段,并构建了重组质粒pGEM-T/VP1,采用双酶切和DNA测序证实此基因片段与报道的基因序列一致。2.成功构建了原核表达质粒pET-his/VP1,双酶切结果证实插入和连接均正确。3.在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中成功表达了EV71VP1蛋白,表达蛋白主要以包涵体形式存在。Western-blot证实表达的蛋白可与H（略..）IS单抗和EV71多抗产生特异性反应。4.用VP1蛋白免疫家兔,免疫3次后,用肠道病毒71型抗体IgG诊断试剂盒(酶联免疫法),检测血清的抗体滴度,3只家兔血清抗体滴度分别为：1：81920：1：40960：1：40960。结论：1.成功构建了EV71VP1基因原核表达质粒pET-his/VP1。2.在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS成功表达了EV71VP1蛋白并进行初步纯化。3.用纯化的EV71VP1蛋白免疫家兔能诱导产生特异性抗体。

以上为本篇毕业论文范文肠道病毒71型-C4VP1基因原核表达及免疫原性研究的介绍部分。

本论文在医药医学论文栏目，由论文网(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点论文范文查找

收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
热能与动力设计论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文

电子商务论文范文

上一篇：多拉菌素明胶微球的制备及其在山..

下一篇：人MBL-MASPs复合物及人血清白蛋白..