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高速逆流色谱分离甘草和淡豆豉中主要黄酮成分的研究

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毕业论文范文题目:高速逆流色谱分离甘草和淡豆豉中主要黄酮成分的研究,论文范文关键词:高速逆流色谱分离甘草和淡豆豉中主要黄酮成分的研究
高速逆流色谱分离甘草和淡豆豉中主要黄酮成分的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:高速逆流色谱是一种不用固态支撑体的液液分配色谱,具有分离速度快、样品回收率高、成本低等优点而被广泛用于天然产物的分离纯化中。本文概括介绍了高速逆流色谱的理论基础、操作方法及其在天然产物活性成分分离中的应用和发展现状。归纳了高速逆流色谱分离中常用的溶剂体系,并对影响高速逆流色谱分离效果的因素进行总结。甘草和淡豆豉是我国应用历史悠久的传统中药,被历版《中国药典》收录。甘草中含有黄酮类、三萜类和生物碱类等多种活性成分,其中的甘草黄酮被证明具有显著的抗癌、抗氧化和抗病毒等生理药理作用。本研究中选用新疆产(文章此处忽略..)乌拉尔甘草,先采用热水提取法除去甘草酸,再用溶剂萃取法得到甘草总黄酮样品,对粗样品中总黄酮含量用紫外分光光度法测定,并初步研究了该粗提物的体外活性作用。对甘草总黄酮样品采用高速逆流色谱法进行分离纯化,首先用分析型高速逆流色谱仪优化溶剂体系,再采用半制备逆流色谱进行流速优化和进样浓度优化,最后确定出TBE300A半制备逆流色谱仪分离甘草黄酮的最佳实验条件:两相两相溶剂系统:正己烷—乙酸乙酯—甲醇—水(1:2:1:1),上相为固定相,下相为流动相,主机顺时针方向旋转,转速850r/min,流动相流速3.0ml/min,流动相洗(略..)脱方式为头到尾洗脱,样品浓度:20mg/ml,检测波长260nm。实验结果显示,通过一次分离(耗时200min),可从400mg甘草粗提物中得到甘草黄酮醇26mg,甘草素8mg,芒柄花素12mg,甘草异黄酮甲10mg,产物纯度经HPLC面积归一法测定分别为96.3%,95.7%,96.5%和96.8%,产物结构经熔点、UV、MS、~1H—NMR和~(13)C—NMR共同鉴定。淡豆豉中的主要活性成分是大豆异黄酮,因其结构和功能与雌激素相似,而表现出多种生理活性,现已被广泛应用于肿瘤、心血管疾病和骨质疏松等重大疾病的预防和治疗中。由于目前用高速逆流色谱分离大豆异黄酮的溶剂(此处忽略..)体系大多含有氯仿,本研究的目的正是通过溶剂系统优化,采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水此低毒性溶剂系统代替传统采用的氯仿-甲醇-水体系,并对进样浓度和流速进行优化,根据线性放大规则拟定出适合大型制备逆流色谱分离淡豆豉中主要黄酮成分的工艺条件。同时,我们用TBE300A半制备高速逆流色谱对淡豆豉样品进行分离纯化,实验结果显示:通过300min分离,从200mg淡豆豉粗提物中分离得到大豆素11mg,染料木黄酮6.8mg。产物纯度经HPLC面积归一法确定分别为96.3%和93.7%,产物结构经~1H—NMR和~(13)C—NNIR鉴定。半制备高速逆流色(此处忽略..)谱制备两种大豆异黄酮成分的最佳实验条件为:两相溶剂系统:正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5:6:5:6),上相为流动相,下相为固定相,主机顺时针方向旋转,转速850r/min,流动相流速2.0ml/min,流动相洗脱方式为尾到头洗脱,样品浓度:10mg/ml,检测波长260nm。本研究结果证明,高速逆流色谱的确是高效快速分离天然产物的新方法。


以上为本篇毕业论文范文高速逆流色谱分离甘草和淡豆豉中主要黄酮成分的研究的介绍部分。
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