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人渺小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段克隆及序列分析

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毕业论文范文题目:人渺小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段克隆及序列分析,论文范文关键词:人渺小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段克隆及序列分析
人渺小病毒B19中国株VP1蛋白独特区基因片段克隆及序列分析毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标:人渺小病毒B19是一种可致人类多种疾病的小DNA病毒,重要经呼吸道跟血液道路传播,可引起社区部分风行。自1990年咱们首次证明我国存在该病毒感染后,陆续报告B19病毒是我国妊妇非免疫性流产、儿童急性再障危象、急性血小板减少性紫癜等疾病的重要病因之一。同时,我国妇女跟儿童血清中保护性抗体程度低,易产生该病毒感染。尤其免疫功能低下或缺点患者可产生持续感染跟慢性贫血,危及生命。B19病毒是由5.6Kb核苷酸组成,编码一个非构造蛋白(NS1)跟两个构造蛋白(VP1、VP2)。B19壳蛋白重要由VP2蛋白组成,V(略..)P1蛋白不超过壳蛋白的10%,其独特区暴第四军医大学硕士学位论文一露在病毒的名义。B19病毒的抗原表位区集中在VPI独特区跟VPIVPZ连接区。只有HPVBVPI独特区跟VPI-VPZ连接区基因编码的蛋白,才干刺激机体产生保护性抗体。国外证明该病毒基因随地区不同有较大变异。但风行的病毒中国株基因是否有变异,国内尚无报告。基因克隆及蛋白表白技巧,是近年来分子生物学发展的重要标记。国内尚无利用此技巧研究*病毒基因变异的报道。此方法的开创性引入,将为改变国内目前诊断性试剂依附进口及制备B19病(略..)毒疫苗做出有利的开创性尝试。本文拟对VPI独特区基因克隆,进行基因组核昔酸序列分析及蛋白的初步表白,研究其基因的变异。方法:采取自行设计的一对引物,以PCR法从一例1999年12月份在本院儿科确诊为再生妨碍性贫血患儿血清扩增出480hp的VPI独特区基因片段,将其与PUC19质粒连接。成功构建了VPIP质粒,并进行测序分析及初步的蛋白引诱、表白,获得了初步表白。成果:*与国外己发表的B19W株的VPI独特区序列比拟,有二处核昔酸产生改变,占核昔酸总数的4二7%Q/480人并可致所编码的氨基酸变更:第2594位由C变为(文章此处忽略..)A,相应的氨基酸由组氨酸变为天冬酚氨;第2624位由A变为G,相应的氨基酸由大冬酚氨变为天冬氨酸。反复3个克隆,测序成果同前。u)与国外己发表的其它株比拟,其核昔酸序列也不完全雷同。O)蛋白电泳成果显示出新的蛋白电泳带,分子量与预期大小基本相符,为B19病毒的VPI独特区蛋白。.。M抄二痞匀辽.、..札.乞e.产甜\j“二栩C.//工L民纂一义梆二凸贼t大二理td盾t—J产J——已N。、、【jH.。二人心。。_“卜二1W—.9—地0证以沏0岁o感O邱森】0幽b文0以-2-第四军医大学硕士学位论文一论断(略..):(1)本文采取自行设计引物,用PCR的方法能扩增出目标基因片段,扩增产物为480hp。Q)中国B19病毒VPI独特区基因与国外相应的基因比拟,有2处变异。o)VPI独特区基因的变异导致了其编码蛋白的变异。H)VPI独特区基因的成功克隆及相应蛋白的初步表白为制备B19病毒诊断性试剂及保护性疫苗、防治B19病毒感染、把持其社区部分风行开创了广阔的前景。


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