丁酸盐用于β—珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗的体外实验研究

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丁酸盐用于β—珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗的体外实验研究

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毕业论文范文题目：丁酸盐用于β—珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗的体外实验研究，论文范文关键词：丁酸盐用于β—珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗的体外实验研究
丁酸盐用于β—珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗的体外实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：利用已建立的β-珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗作用机制的体外研究体系，从细胞水平、蛋白质水平以及mRNA水平探讨丁酸盐对珠蛋白基因表达的诱导作用，为进一步阐明丁酸盐药物基因治疗作用机制打下基础，从而为新药的筛选和开发创造条件。方法：通过对红系祖细胞体外培养和K562细胞株两种体外模型的分别研究，选择其中一种简便而有效的模型作为研究的基础；采用联苯胺染色定性技术，研究药物对细胞分化的诱导作用以及丁酸盐不同给药方式对珠蛋白基因表达的影响；应用紫外-可见光分光光度仪蛋白质定量方法和醋酸纤维膜电泳技术，比较丁酸盐诱导前后细胞平均血红蛋白含量的变化和不同类型血红蛋白诱导前后的变化；采用RT-PCR半定量（此处忽略..）方法，同时比较丁酸盐诱导前后7种珠蛋白基因（α、β、Aγ、Gγ、ζ、ε、δ）mRNA含量，研究mRNA水平上该药物作用的选择性。以羟基脲为阳性对照，比较丁酸盐与羟基脲诱导作用的强弱及诱导后各珠蛋白基因表达的差异。结果：半固体培养条件下人类红系祖细胞的生长和分化更接近体内的真实过程，但其培养较困难，周期长，干扰因素多，细胞数少，收集困难；人类红白血病来源的K562细胞株，具有多潜能，在诱导剂作用下可向红系分化，培养方便，生长迅速，操作简单，体系稳定；选择K562细胞作为研究模型。丁酸盐诱导后联苯胺染色阳性细胞率（BZ％）增加4～6倍；单次给药BZ％在72h达高峰，峰值在19％～28％之间，之后下降，约在7d～9d接近用药前水平，孵（此处忽略..）育时间的长短与BZ％上升以及上升后持续时间的长短无关；丁酸盐持续诱导的BZ％变化与单次用药总体趋势相似；连续脉冲式用药BZ％在72h达到峰值后持续保持在20～30％之间的水平，直至3个周期的用药结束。细胞平均血红蛋白较用药前增加9～14倍；丁酸盐选择性地刺激HbF合成。诱导后γmRNA的增加为3.81±0.14倍（p＜0.01），其中Gγ增加2.24倍（p＜0.05），Aγ增加1.56倍（p＞0.05），α、ζ、ε、δmRNA水平增加分别为1.24、1.19、1.17、1.11倍（p＞0.05）。诱导前后K562细胞均未检测到β-珠蛋白基因mRNA。羟基脲诱导后，γ、α、δ、ε、ζ-mRNA增加同丁酸盐大致相似。结论：K562细胞是一个良好的研究β-珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗作用机制的体外模（文章此处忽略..）型。丁第一军医大学南方医院儿科学硕士生毕业论文20011而台土卜h丁U玉BV二Co9囚印一卫土月已d主主p主巨｝卜干个C土士z，件h山杯Dee、．卞士p口M士十厂、．D蚁休」J仍守n0o＜弛肥休虫He囚衣地升地佯‘旺地则撒Ye囚，兀具UYD的杜寻渔加用批四IDW灯召白川M＼的A才悯hn丁僻扑时n且m褂DUJ丫《刁＼一口UH，卜L人上JJHJU－＊＊＊＊＊－＊＊＊＊＊二上HiW＼11UIJHJ口JJiJi少曰oHo曰X卫D．人JU习卜凹VtXD构w朽不撒佰1乍用役工勺Yds囚w逃伴‘旺啃川柏十衡m川司侗卞Hb卜wD会吻＿丁酿妊且右兰粒其眼相当的揉导休田早一釉盖，晰千而渍旦作田D口MOJ吸欣矢月刁汀巫侧州dD’Jpp寸（本文此处忽略..）‘［F川，正w母仕瓜IIU能于1下川l亚有口J佃）了p一环虫口兹山欧阳‘仕沃胸w约柳，兵月民灯wIM坏业用目uD昙下游朴的阶讪十m岔七十舶止7性仲m尤巳趴协攻平凸甘m主斗of只OJgy血口J肌j丫几川列厂几阶仪J付汪M列寸蚁们W虫口＆w汉h7T寓氏V悄牛的稚占．对丁酸攻的临序田恭且有丢西的捎导音VH丁酸D】叫／U人甘门八UJ人p人人罗们JhXhX皿1UJ旧川＼厂口士J十十H5邑二〔口J7曰了了土己人，刀巳j曰又D仆抑相的蛤花卞士D

以上为本篇毕业论文范文丁酸盐用于β—珠蛋白基因缺陷性疾病药物基因治疗的体外实验研究的介绍部分。

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