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超声微泡介导野生型p53基因联合Rb94基因转染裸鼠视网膜母细胞瘤的实验研究

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毕业论文范文题目:超声微泡介导野生型p53基因联合Rb94基因转染裸鼠视网膜母细胞瘤的实验研究,论文范文关键词:超声微泡介导野生型p53基因联合Rb94基因转染裸鼠视网膜母细胞瘤的实验研究
超声微泡介导野生型p53基因联合Rb94基因转染裸鼠视网膜母细胞瘤的实验研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:研究背景及目的视网膜母细胞瘤(RB)是学龄前儿童最常见的眼部恶性肿瘤,恶性度高,就诊时患儿较多已进入严重危害视力及生命的时期。目前我国对其治疗仍以患眼眼球摘除为主,辅以放射治疗、化学治疗、冷凝治疗等其他手段。而在对RB治疗的研究方面,基因治疗已成为其主要方向,其中又以对基因载体的研究,是其整个领域的关键和瓶颈问题。近年来超声微泡造影剂成为基因载体研究的热点之一。Rb基因是公认的(本文此处忽略..)与RB形成关系最为密切的抑癌基因,而p53基因被认为目前的与人类恶性肿瘤相关性最高的一种抑癌基因。本研究以RB为研究对象,运用超声微泡造影剂这一新型载体,将wtp53基因及Rb94基因转染至裸鼠RB模型内,分别观察单个基因、联合基因对裸鼠视网膜母细胞瘤的治疗作用。研究方法:1.HXO-Rb44细胞培养于含10%FBS的RPMI1640培养基,待至对数期,收集并调整细胞密度为(5.5~6.5)×106/mL备用。40只裸鼠行双眼视网(本文此处忽略..)膜下注射Rb细胞悬液1ul,术后每3天观察肿瘤生长情况。2.将造模成功的裸鼠随机分为五组:①空白对照组;②空质粒组;③p53质粒组;④Rb94质粒组;⑤p53+Rb94质粒。除组①外,其余四组每天以0.5W/cm2超声波辐照眼球60s(辐照4s,间隔24s,连续两次,共用60s),7天后取出肿瘤组织行RT-PCR及Western-blot证实转染是否成功。3.取转染后裸鼠肿瘤组织,用免疫组化染色及Western-blot法(此处忽略..)检测各组肿瘤组织VEGF表达,检测各组肿瘤组织的肿瘤微血管密度及组织细胞的凋亡情况。研究结果:1.40只裸鼠双眼视网膜下种植瘤细胞,有32只裸鼠(48只眼)造模成功。2.RT-PCR及WB可见单基因组及联合基因组均有外源基因导入肿瘤组织,并在蛋白水平得到表达。3.对各组瘤组织的检测可见,单基因组及联合基因组对其VEGF、MVD及凋亡均有影响,但联合组的效应更为明显,同单基因组的差异有统计学意义((文章此处忽略..)P0.05)。研究结论:超声微泡作为一种新型的转染介质,可达到转染单个基因及联合基因的目的,通过观察wtp53联合Rb94基因转染肿瘤组织后,对其的抑制作用优于单独转染其中任一基因,为RB的治疗提供更多、更有效的选择,也对RB发生发展的机制研究拓展了新思路。


以上为本篇毕业论文范文超声微泡介导野生型p53基因联合Rb94基因转染裸鼠视网膜母细胞瘤的实验研究的介绍部分。
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