NMDA受体克制剂MK-801克制大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质

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NMDA受体克制剂MK-801克制大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质

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毕业论文范文题目：NMDA受体克制剂MK-801克制大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质，论文范文关键词：NMDA受体克制剂MK-801克制大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质
NMDA受体克制剂MK-801克制大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标:脊髓是苦楚悲伤信息传入跟整合的初级中枢。传统观点认为,脊髓程度病感性苦楚悲伤的产生跟保持完全是由神经元介导的,神经胶质细胞(星型胶质细胞跟小胶质细胞)仅对神经元起支撑跟养分作用,而不存在细胞之间的突触性信息传递功能。然而,越来越多的证据表明脊髓后角胶质细胞激活与痛觉过敏的产生跟苦楚悲伤持续状况有密切关联。研究表明,多种侵害性刺激,都可能激活脊髓程度的星型胶质细胞跟小胶质细胞;激活的胶质细胞可开释多种细胞因子,如肿瘤坏逝世因子、白介素等促进痛跟痛觉过敏的产生;而给予克制胶质细胞功能或代谢的药物,如fluorocitrate、CNI-1493、米诺环素等则可对病感性痛跟痛觉过敏产生明显的克制造用,表明脊髓胶质细胞的活化在病感性痛跟痛过敏的产生跟保持中发挥重要作用。但此过程中,脊髓胶质细胞激活的机制尚不完全明白。高兴性氨基酸(excitatoryaminoacids,EAAs,包含谷氨酸及天门冬氨酸)是脊髓中传递侵害性信息的重要神经递质。已有材料表明,N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-asparticacid,NMDA)受体是中枢神经体系EAAs受体的一种亚型,属于离子型受体,广泛分布于中枢神经体系,参加众多复杂的生理反应跟病理过程。大量研究表明,NMDA及其受体在脊髓侵害性信息的传递中起重要作用,外周侵害性刺激向中枢传递产生痛觉、引诱痛觉中枢敏感召须要有完美的NMDA受体系统。已有研究表明,NMDA受体参加神经病感性苦楚悲伤模型中脊髓后角胶质细胞的激活。但在外周炎性痛过程中,脊髓胶质细胞的激活是否也有NMDA受体的参加尚未见报道。蜜蜂毒(BeeVenom,BV)苦楚悲伤模型是一种新的苦楚悲伤模型,存在多种苦楚悲伤表型。大鼠足底皮下核心部位注入蜜蜂毒溶液不仅引起部分组织炎性红肿,还引起单相的持续1-2h的自发痛反应跟较长时光的打针部位原发性热跟机械性痛（此处忽略..）觉过敏,更濒临临床病感性痛,是研究炎性病感性痛的良好模型。我室既往利用免疫组化技巧,初步察看了NMDA受体在该模型引起脊髓后角星形胶质细胞激活中的作用。本实验利用免疫印迹分析(westernblotanalysis)技巧,察看蜜蜂毒炎性痛过程中脊髓后角星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(glialfibrilaryacidicprotein,GFAP)跟小胶质细胞标记物CD11b/c(OX-42)蛋白表白的变更,以及NMDA受体阻断剂MK-801对其表白的影响,进一步研究NMDA受体在侵害性刺激引起的脊髓后角星形胶质细胞跟小胶质细胞激活中的作用,为阐明胶质细胞在脊髓侵害性信息传递中的作用提供进一步的实验根据,为病感性苦楚悲伤的防治研究提供新思路跟线索。1大鼠蜜蜂毒炎性痛可引起脊髓后角星型胶质细胞跟小胶质细胞的激活方法:雄性Sprague-Dawley大鼠25只,体重200-220g,随机分为sham组(n=5)跟蜜蜂毒组(n=20)。蜜蜂毒组又进一步分为1h组、1d组、2d组跟4d组4个亚组(每个亚组n=5)。Sham组大鼠右后足底皮下打针100μlNS,蜜蜂毒组大鼠则打针蜜蜂毒溶液100μl(4g·L-1)致外周炎性痛及痛过敏。打针蜜蜂毒后测定打针足60min内的自发痛行动反应以中举1、2、3、4天的热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值。Sham组大鼠于足底打针NS后1h,蜜蜂毒组则于足底打针蜜蜂毒后相应时光点取腰5(L5)脊髓后角,利用Westernblot分析测定L5脊髓节段后角GFAP跟CD11b/c(OX-42)表白的变更,分辨用于反应脊髓星形胶质细胞跟小胶质细胞的激活状况。数据用均数±标准差(x±s)表示。采取社会科学统计程序(StatisticalProgramforSocialSciences13.0)进行单因素方差分析(One-WayANOVA),比较组间差别,有明显差别者用最小明显差法(leastsignificantdifference)进行两两比较,以p0.05作为断定差（文章此处忽略..）别明显性的标准。成果:足底打针蜜蜂毒后,大鼠产生单相性的自发痛反应,表示为自发缩足、舔足甚至咬足行动,时光可持续至打针后60min,与sham组比拟,痛反应评明显显升高。大鼠足底打针蜜蜂毒后,打针部位热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值在在所察看的1d-4d的期间内均较sham组明显缩短(p0.05),表明动物产生了热跟机械痛觉过敏。痛觉过敏于足底打针蜜蜂毒后1d最为明显,但随时光的延长逐步减轻。WesternBlot分析显示,与sham组比拟,打针蜜蜂毒后1h大鼠L4~L5脊髓节段后角GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白未见增高(p0.05)。然而在打针蜜蜂毒后1d时可见GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白较sham组明显升高(P0.05),并可能持续到打针蜜蜂毒后4d,但蜜蜂毒1d组、2d组跟4d组这三组之间未见明显差别(p0.05)。上述成果表明在蜜蜂毒引诱的炎性痛跟痛过敏中激活了脊髓星型胶质细胞跟小胶质细胞。2NMDA受体克制剂MK-801克制大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质细胞跟小胶质细胞的激活方法:雄性Sprague-Dawley大鼠25只,体重200-220g,随机分为以下5组(n=5):①sham组:大鼠右后足底皮下打针生理盐水(normalsaline,NS)50μl。②蜜蜂毒组:大鼠右后足底皮下打针蜜蜂毒溶液50μl(4g·L-1)致炎性痛跟痛过敏。③NS+蜜蜂毒组:首先椎管内给予NS10μl,15min后于大鼠右后足底皮下打针蜜蜂毒溶液50μl(4g·L-1)致炎性痛跟痛过敏。④MK-801+蜜蜂毒组:首先椎管内给予MK-801溶液10μ(l10nmol),15min后于大鼠右后足底皮下打针蜜蜂毒溶液50μl(4g·L-1)致炎性痛跟痛过敏。⑤MK-801+sham组:首先椎管内给予MK-801溶液10μl,15min后于大鼠右后足底皮下打针生理盐水50μl。各组动物均测定足底打针蜜蜂毒后60min内的自发痛行动反应,并于1d时测定热辐射缩足反射埋伏期跟机械缩足反射阈值。测定结束后,取腰5(L5)脊髓后角,利用Westernblot分（此处忽略..）析测定L5脊髓节段后角GFAP跟CD11b/c(OX-42)蛋白表白的变更,分辨用于反应脊髓星形胶质细胞跟小胶质细胞的激活状况。第一部分实验成果显示,大鼠热跟机械痛敏、以及GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白均在足底打针蜜蜂毒后1d时明显增多,所以本实验选取足底打针蜜蜂毒溶液后1d的时光点,察看NMDA受体克制剂MK-801对大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质细胞跟小胶质细胞的激活的影响。数据用均数±标准差(x±s)表示。采取社会科学统计程序(StatisticalProgramforSocialSciences13.0)进行单因素方差分析(One-WayANOVA),比较组间差别,有明显差别者用最小明显差法(leastsignificantdifference)进行两两比较,以p0.05作为断定差别明显性的标准。成果:1自发痛行动反应蜜蜂毒组大鼠产生了典范的单相性的自发痛反应,表示为自发缩足、舔足甚至咬足行动。NS+蜜蜂毒组动物的痛行动评分与单纯蜜蜂毒组无明显不同(P0.05);MK-801+蜜蜂毒组大鼠的自发痛行动反应评分与蜜蜂毒组跟NS+蜜蜂毒组比拟明显降落(P0.05)。MK-801+sham组跟sham组的自发痛行动反应评分均为零。2热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值大鼠足底打针蜜蜂毒后,打针部位热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值较sham组明显缩短(P0.05),表明动物呈现了热跟机械痛觉过敏。NS+蜜蜂毒组与蜜蜂毒组比拟无明显性差别(P0.05)。椎管内利用MK-801(MK-801+蜜蜂毒组)后,蜜蜂毒打针部位的热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值与蜜蜂毒组比拟明显延长(P0.05),而椎管内打针NS(NS+蜜蜂毒组)后,对蜜蜂毒引起的热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值的变更无明显影响,表示为NS+蜜蜂毒组热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值与蜜蜂毒组比拟无明显差别(P0.05)。椎管内打针MK-801(MK-801+sham组)对sham组大鼠热刺激缩足埋伏期跟机械刺激缩足阈值无明显影响（文章此处忽略..）(P0.05)。3GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白WesternBlot分析显示,大鼠打针蜜蜂毒后,GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白较sham组明显升高(P0.05),椎管内利用MK-801(MK-801+蜜蜂毒组)后,GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白与蜜蜂毒组比拟明显降落,然而椎管内打针NS(NS+蜜蜂毒组)后,对蜜蜂毒组引起的GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白无明显影响(P0.05),表示为NS+蜜蜂毒组GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白与蜜蜂毒组比拟无明显差别(P0.05)。椎管内打针MK-80(1MK-801+sham组)对sham组大鼠GFAP跟CD11b/c(OX-42)的表白无明显差别(P0.05)。论断:大鼠足底打针蜜蜂毒可引起打针部位炎性痛跟痛觉过敏,并激活脊髓胶质细胞,NMDA受体非竞争性克制剂MK-801可克制大鼠蜜蜂毒炎性痛及痛过敏所致脊髓后角星型胶质细胞跟小胶质细胞的激活,提示NMDA及其受体参加外周炎症性侵害性信息传入引起的脊髓后角星形胶质细胞跟小胶质细胞的激活。

以上为本篇毕业论文范文NMDA受体克制剂MK-801克制大鼠蜜蜂毒炎性痛所致脊髓后角星型胶质的介绍部分。

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