可溶性Aβ_（25-35）对新生大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道mRNA表达影响的研究

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可溶性Aβ_（25-35）对新生大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道mRNA表达影响的研究

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毕业论文范文题目：可溶性Aβ_（25-35）对新生大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道mRNA表达影响的研究，论文范文关键词：可溶性Aβ_（25-35）对新生大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道mRNA表达影响的研究
可溶性Aβ_（25-35）对新生大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道mRNA表达影响的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:Alzheimer's病(AD)是影响记忆和认知功能的进行性退化性神经病变,是痴呆最常见的原因。研究表明,β淀粉样蛋白(Aβ)增加是AD中枢病因性过程,凝聚态Aβ具有明确的神经毒性作用。但亦有研究提出,Aβ在纤维性沉积前即可溶性Aβ也可产生神经毒性作用。海马是学习和记忆的关键部位,直接参与记忆的获取和建立。海马CA3区与空间辨别性学习记忆关系密切。而学习和记忆存储的分子和生理机制研究表明,钾通道、蛋白激酶C、记忆相关蛋白Cp20、细胞内钙调节在学习和记忆机制中起重要作用,其中钾离子通道在学习和记忆中起着关键作用,提示钾通道在老年痴呆发病过程中具有重要意义。有研究认为可溶性Aβ_(25-35)对新生大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾电流(I_k)有明显抑制作用,其效应具有时间依赖性和电压依（文章此处忽略..）赖性,但具体作用机制不清。本实验以大鼠海马CA3区锥体神经元为研究对象,采用膜片钳与单细胞RT-PCR技术相结合的方法,研究可溶性Aβ_(25-35)对新生大鼠海马CA3区锥体神经元几种代表性延迟整流钾通道亚型mRNA表达的影响,从分子生物学的角度探讨I_k变化的分子机制。为研究Aβ在AD发病过程中的作用机制以及临床应用钾通道调节剂预防和治疗AD提供理论依据。方法:采用酶解和机械分离相结合的方法,急性分离新生大鼠海马CA3区锥体神经元。运用膜片钳,借助其电极形成的吸收通道提取单个细胞,然后对其进行单细胞水平的分子生物学研究。由于单个细胞中提取的mRNA数量很少,应用传统的单对引物对单细胞mRNA进行RT-PCR扩增,得到的产物结果不够理想,故本实验采用的巢式设计的两对PCR引物,进（此处忽略..）行两轮PCR扩增。RT-PCR扩增后凝胶电泳成像分析,观察可溶性Aβ_(25-35)对大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾离子通道亚型Kv1.2、Kv1.5、Kv2.1表达的影响。结果:1.延迟整流钾通道亚型Kv1.2,Kv1.5,Kv2.1在正常大鼠海马CA3区锥体神经元上均有不同程度的表达。其中,Kv2.1的表达水平较高。2.加入浓度为1.0、2.5、5.0μM可溶性Aβ_(25-35)1分钟后,大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道亚型Kv1.2mRNA的相对表达量与对照组相比明显降低,分别降低15.9%(P＜0.01)、24.0%(P＜0.01)、35.8%(P＜0.01)。3.加入浓度为1.0、2.5、5.0μM可溶性Aβ_(25-35)1分钟后,大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道亚型Kv1.5mRNA的相对表达量与对照组相比明显降低,分别降低17.8%(P＜0.01)、23.2%(P＜0.01)、36.1%(P＜0.01)。4.加入浓度为1.0、2.5、5.0μM可溶性Aβ_（此处忽略..）(25-35)1分钟后,大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道亚型Kv2.1mRNA的相对表达量与对照组相比明显降低,分别降低17.2%(P＜0.01)、23.7%(P＜0.01)、36.9%(P＜0.011。5.加入浓度为5.0μM可溶性Aβ_(25-35)孵育1、3、5、8、10分钟后,大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道亚型Kv2.1mRNA的相对表达量与对照组相比明显降低,分别降低了38.7%(P＜0.01)、43.5%(P＜0.01)、53.3%(P＜0.01)、65.6%(P＜0.01)、73.7%(P＜0.01)。结论:1.在正常新生大鼠海马CA3区锥体神经元细胞膜上,延迟整流钾通道亚型Kv1.2,Kv1.5,Kv2.1mRNA均有不同程度的表达,其中以Kv2.1的表达较为丰富。2.可溶性Aβ_(25-35)对大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道亚型Kv1.2,Kv1.5,Kv2.1mRNA的表达有较明显的抑制作用,这种抑制作用具有浓度依赖性和时间依赖性。3.可溶性Aβ_(25-35)对大鼠海马C（文章此处忽略..）A3区锥体神经元延迟整流钾通道亚型mRNA表达的抑制导致钾通道数量减少,这可能是其对延迟整流钾电流抑制作用的机制之一。

以上为本篇毕业论文范文可溶性Aβ_（25-35）对新生大鼠海马CA3区锥体神经元延迟整流钾通道mRNA表达影响的研究的介绍部分。

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