六味地黄丸含药血清对肝癌自杀基因医治旁杀伤的增效作用

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六味地黄丸含药血清对肝癌自杀基因医治旁杀伤的增效作用

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毕业论文范文题目：六味地黄丸含药血清对肝癌自杀基因医治旁杀伤的增效作用，论文范文关键词：六味地黄丸含药血清对肝癌自杀基因医治旁杀伤的增效作用
六味地黄丸含药血清对肝癌自杀基因医治旁杀伤的增效作用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：肝癌是最常见的恶性肿瘤之一，恶性程度高，预后差。跟着分子生物学的发展，基因医治给恶性肿瘤的医治带来了曙光。肿瘤的基因医治，特别是肿瘤的自杀基因疗法，已经成为继传统的手术切除、放疗、化疗等方法后的一种新的抗肿瘤医治办法。但单纯自杀基因医治因为目前载体转染效力较低、靶向性不够等问题没解决，仍有部分肿瘤细胞残余导致肿瘤复发，这是该疗法存在的重大缺点。因此加强旁杀伤效应目前已成为进步肿瘤自杀基因医治疗效的重要策略。因为缝隙连接机制是傍观者效应的重要机制，故改良肿瘤的细胞间信息交换(GJIC)是自杀基因疗法增效的重要道路之一。同时，以往的研究证明：六味地黄丸有进步cAMP的作用，而cAMP的进步又能增加Cx蛋白的表白，从而进步GJIC功能而加强自杀基因医治的旁杀伤效应。本研究利用中药复方血清药理学的方法将自杀基因HSV1-tk／GCV体系与六味地黄丸在体外实验中结合，以大鼠肝癌细胞CBRH7919为对象进行了初步研究。通过研究以期为临床自杀基因疗法结合中药复方的中西医结合医治打算的树破提供实验数据、科学根据及前期工作基本。目标：本实验旨在以往研究的基本上，利用中药复方血清药理学方法将六味地黄丸跟HSVI-tk／GCV体系结合，进行大鼠肝癌细胞CBRH（略..）7919自杀基因医治的体外实验。初步探讨其机制，为树破中西医结合肿瘤基因医治打算提供必要前提。方法：1六味地黄丸药物血清跟空白血清的制备：SD大鼠(230～280g)，分为对比组跟六味地黄丸给药组(药物剂量为等效剂量的6～8倍)。灌胃又分为四天血清组跟八天血清组。末次给药后1小时腹主动脉取血，-70℃冰箱保存备用。2HSV1-tk／GCV自杀基因体系的构建(导师课题组在前期工作中已经实现)3HSV1-tk／GCV体系结合六味地黄丸含药血清医治疗效察看：MTT法检测大鼠肝癌细胞CBRH7919对GCV的敏感性以及对大鼠血清(对比血清跟六味地黄丸含药血清)的敏感程度，以断定用药浓度。抉择对细胞克制率低的浓度进行实验。用金正钧Q值分析六味地黄丸含药血清与自杀基因体系联配合用对旁杀伤效应是否存在协同性。Q值为结合用药时实测药效与实际药效的比值，Q＜0.85为拮抗作用；0.85≤Q＜1.15为相加作用；Q≥1.15为协同作用。4六味地黄丸含药血清对自杀基因医治体系旁杀伤增效机制的研究：用流式细胞技巧检测凋亡指数；SLDT法察看六味地黄丸含药血清对CBRH7919的GJIC功能的影响。成果：1六味地黄丸含药血清结合HSV1-tk／GCV体系医治成果1．1GCV的工作浓度在GCV为9.8μM、19.6μM浓度下，CBRH7919／tk~-细胞均匀存活率为79.34％、76.（略..）64％；而CBRH7919／tk~+细胞只有48.73％、43.84％(二者无明显性差别)；GCV为39.2μM、78.4μM时，CBRH7919／tk~-细胞均匀存活率为73.67％、68.05％：而CBRH7919／tk~+细胞只有27.06％、17.49％。鉴于在进行HSV-tk增效药物实验时要尽量避免GCV对tk~-细胞的杀伤作用，同时考虑到大鼠血清对CBRH7919细胞的养分作用以及血清对药物的烦扰作用(大鼠血清可烦扰GCV对细胞的克制造用，对细胞起保护作用)，故抉择39.2μM的GCV作为工作浓度。1．2血清的制备及含药血清的增加量本实验给药打算采取每天灌胃2次，间隔8小时；灌胃后1h取血。从MTT以及流式的察看成果来看，灌胃八天组的含药血清其后果要好于四天组的血清。对比血清及六味地黄丸含药血清在5％～10％浓度下对大鼠肝癌细胞CBRH7919的成长有促进作用，然而跟着血清浓度增高(＞20％)会对细胞的成长产生明显的克制造用，镜下察看细胞状况产生空泡状改变。阐明大鼠血清本身对肝癌细胞有促成长作用。但六味地黄丸含药血清与对比血清对细胞影响无统计学差别(P＞0.05)。1．3HSV1-tk／GCV医治中tk~+：tk~-细胞最佳比例的筛选实验证明：10％tk~+混淆比例下药物可作用空间比较大，有利于察看含药血清对旁杀伤效应的引诱促进作用。1．4六味地黄丸含药血清对tk~+／GCV体（略..）系旁杀伤增效作用的量效关联四天含药血清与八天含药血清均能加强HSV1-tk／GCV体系大鼠肝癌细胞CBRH7919的旁杀伤效应，然而其增效作用的时光点是不同的：四天血清孵育6h能察看到二者结合杀伤的协同增效作用；八天血清孵育24h能察看到二者结合杀伤的协同增效作用。2六味地黄丸含药血清对HSV-tk／GCV体系旁杀伤增效机制的研究成果2．1六味地黄丸含药血清结合tk~+／GCV体系对CBRH7919细胞周期跟凋亡的成果无论是PI单染色法还是Annexinv／PI双染色法，六味地黄丸含药血清与HSV1-tk／GCV医治体系联用，都可增加大鼠肝癌细胞的凋亡率。且八天含药血清的药效要稍好于四天血清。PI单染色法：八天血清——含药血清+10％tk~++GCV组的凋亡率比对比血清+10％tk~++GCV组的进步了0.77％；四天血清——含药血清+10％tk~++GCV组的凋亡率比对比血清+10％tk~++GCV组的进步了0.11％。当存在10％tk~+时，GCV／含药血清使细胞的S期比率明显的比tk~-／GCV／含药血清进步近一倍(八天血清)。表示GCV杀伤的细胞增殖加速，然而药物血清未见明显克制增殖的作用。Annexinv／PI双染色法：八天血清——含药血清+10％tk~++GCV组的凋亡率比对比血清+10％（本文此处忽略..）tk~++GCV组的进步了6.0％；四天血清——含药血清+10％tk~++GCV组的凋亡率比对比血清+10％tk~++GCV组的进步了5.7％。2．2六味地黄丸含药血清对CBRH7919细胞的缝隙连接机制初探成果CBRH7919细胞经过六味地黄丸含药血清孵育后，细胞缝隙连接通信功能较对比血清孵育后的获得明显加强。但八天含药血清与四天含药血清比拟无明显差别。论断：本研究在细胞程度探讨了六味地黄丸含药血清加强自杀基因疗法疗效的可行性。发明能有效加强自杀基因对肿瘤细胞的杀伤力，进步旁杀伤效应，而且是协同性增效作用。对其机制研究分析表明，其作用机制很可能是通过加强CBRH7919细胞的GJIC或引诱凋亡等来起到增效作用的，也可能是两个机制都起作用。

以上为本篇毕业论文范文六味地黄丸含药血清对肝癌自杀基因医治旁杀伤的增效作用的介绍部分。

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