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缝隙连接蛋白Cx32对依靠泊苷体外抗肿瘤作用的影响及鞣花酸的増效

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毕业论文范文题目:缝隙连接蛋白Cx32对依靠泊苷体外抗肿瘤作用的影响及鞣花酸的増效,论文范文关键词:缝隙连接蛋白Cx32对依靠泊苷体外抗肿瘤作用的影响及鞣花酸的増效
缝隙连接蛋白Cx32对依靠泊苷体外抗肿瘤作用的影响及鞣花酸的増效毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标:1.察看由Cx32组成的缝隙连接(gapjunction,GJ)对依靠铂苷抗肿瘤作用的影响;2.察看鞣花酸(ellagicacid,EA)对依靠泊苷(etoposide,VP-16)体外抗肿瘤作用的影响及其可能机制。方法:在转染Cx32并通过1μg/mldoxycycline引诱其牢固表白的HeLa细胞中,用以下方法进行研究:1.“细胞接种免疫荧光法”察看GJ功能加强剂(retinoid,RA)、GJ功能克制剂(18-α-GA跟oleamide)及EA对由Cx32组成缝隙连接细胞间通信(gapjunctionintercellularcommunication,GJIC)的功能的影响。2.“标准细胞集落构成分析法”测定VP-16对细胞成长的克制造用(抗肿瘤作用)。用不同密度接种细胞的方法,获得成长融合细胞(有前提构成GJ)与成长未融合细胞(无构成GJ的前提)。在上述有GJ构成跟无GJ构成的细胞,察看GJ功能跟EA通过GJ功能对VP-16抗肿瘤作用的影响。3.“H(文章此处忽略..)oechst33258荧光染色法”跟“AnnexinV/PI结合双染流式细胞术”分辨测定HeLa细胞凋亡率。4.“Westernblotting法”跟“免疫荧光法”分辨检测Cx32总蛋白跟构成GJ功能的胞膜蛋白Cx32的表白。成果:1.由Cx32组成的缝隙连接(gapjunction,GJ)对依靠铂苷抗肿瘤作用的影响1.1“细胞接种荧光示踪法”实验成果表明:与对比组比拟,25μMoleamide组跟10μM18-α-GA组的细胞荧光传递功能明显降落,而10μMRA组的细胞荧光传递功能加强。“标准细胞集落构成分析法”实验成果显示:在成长融合细胞(GJ构成),VP-16对集落构成的克制率为(0.42±0.02),明显高于成长未融合细胞(无GJ构成,0.25±0.03);在高密度接种细胞(成长融合,有GJ构成)中,与对比组比拟,25μMoleamide跟10μM18-α-GA可克制GJ功能,且能明显增高VP-16处理后的细胞集落构成率(P0.01);而10μMRA组可通过加强GJ功能,明显降落VP-16处理后的细胞集落构成率(略..)(P0.01);但在低密度接种细胞(成长未融合,无GJ构成),与对比组比拟,oleamide,18-α-GA及RA对VP-16的集落构成克制造用无明显影响(P0.05)。成果证明:GJ功能可能加强VP-16的抗肿瘤作用。1.2“Hoechst33258荧光染色法”实验成果显示,与空白组比拟,30μMVP-16作用HeLa细胞24小时,细胞凋亡率明显增加;在成长融合细胞(GJ构成),VP-16引诱细胞凋亡率为(12.13±1.34)%,明显高于成长未融合的细胞(无GJ构成,6.03%±0.75%)。成果证明:GJ功能可能加强VP-16引诱细胞的凋亡作用。2.鞣花酸(ellagicacid,EA)对依靠泊苷(etoposide,VP-16)体外抗肿瘤作用的影响2.1在成长融合细胞(GJ构成),VP-16(5μM)作用细胞1h后,联用EA(8μM)作用细胞24h,细胞集落构成率为(0.25±0.03),明显低于VP-16单用组(0.42±0.02);而在成长未融合的细胞(无GJ构成),EA(8μM)对VP-16的集落构成克制造用无明显影响(P0.05)。成果证明:GJ功能可(文章此处忽略..)能加强EA对VP-16的抗肿瘤作用。2.2“AnnexinV/PI结合双染流式细胞术”实验成果显示:在有GJ构成的HeLa细胞,EA(8μM)跟VP-16(30μM)联用作用于细胞24小时,早期凋亡率为(12.61±0.30)%,明显高于VP-16单用组(8.04±0.04)%。“Hoechst33258荧光染色法”实验成果表明:在有GJ构成的细胞,EA(8μM)跟VP-16(30μM)联用作用于细胞24小时,其细胞晚期凋亡率为(17.04±0.56)%,明显高于VP-16单用组(12.13±0.30)%。成果证明:GJ功能可能加强EA对VP-16引诱细胞的凋亡作用。2.3EA(8μM)处理细胞24小时跟48小时后,与对比组比拟,”Westernblotting”成果表明,Cx32总蛋白的表白加强;“免疫荧光法”成果显示,构成GJ功能的胞膜蛋白Cx32的荧光强度加强。2.4“细胞接种免疫荧光法”成果显示:与对比组比拟,EA(8μM)作用于成长融合细胞(有GJ构成)4小时,荧光传递功能无明显影响,而作用24小时跟36小时,荧光传递功能明显加强。论断1.GJ功能加强,可(略..)能加强依靠泊苷的抗肿瘤作用,而GJ功能降落可使依靠泊苷的抗肿瘤作用变弱;2.在成长融合的细胞(有GJ构成),鞣花酸可能加强依靠泊苷体外抗肿瘤作用;3.鞣花酸加强依靠泊苷的体外抗肿瘤作用与加强Cx32总蛋白跟构成GJ功能的胞膜蛋白Cx32表白有关;4.鞣花酸加强依靠泊苷的体外抗肿瘤作用与加强由Cx32组成的GJIC功能有关。


以上为本篇毕业论文范文缝隙连接蛋白Cx32对依靠泊苷体外抗肿瘤作用的影响及鞣花酸的増效的介绍部分。
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