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成人脂肪间充质干细胞遗传牢固性及5-氮胞苷对成人脂肪间充质干细

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毕业论文范文题目:成人脂肪间充质干细胞遗传牢固性及5-氮胞苷对成人脂肪间充质干细,论文范文关键词:成人脂肪间充质干细胞遗传牢固性及5-氮胞苷对成人脂肪间充质干细
成人脂肪间充质干细胞遗传牢固性及5-氮胞苷对成人脂肪间充质干细毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标:1、摸索脂肪间充质干细胞(ADMSCs)的分别、体外培养,察看ADMSCs长期传代培养的遗传牢固性。2、以5-氮胞苷(5-aza)作为引诱剂,察看5-aza对ADMSCs向心肌样细胞引诱分化的作用。3、察看不同浓度的5-aza引诱ADMSCs向心肌细胞分化过程中的毒理遗传学影响。方法:1、采取Ⅰ型胶原酶消化法自成人脂肪组织中分别培养ADMSCs,并在体外持续传代培养。对第3代ADMSCs进行名义标记分子鉴定,对第3代中举25代细胞分辨流式细胞仪检测细胞增殖指数、惯例核型分析及电镜下察(略..)看超微构造,同时对第3代、25代及30代细胞进行肿瘤特异抗原的检测。2、取成长状况良好的第3代ADMSCs以10μmol/L5-aza引诱作用24h后,用含体积分数为5%胎牛血清的完全培养基持续培养,镜下察看细胞状况学变更,采取逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测心肌早期转录因子(NKX2.5、GATA4)及心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)基因的表白,同时免疫细胞化学染色鉴定cTnI。3、分辨用不同引诱浓度的5-aza5μmol/L(Ⅰ组)、10μmol/L(Ⅱ组)、20μmol/L(Ⅲ组)对ADMSCs进行引诱,同时设(文章此处忽略..)破对比组(Ⅳ组),光镜下察看各组细胞的成长情况及状况学变更,免疫细胞化学方法检测cTn-Ⅰ,RT-PCR方法检测cTn-Ⅰ基因的表白,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,并对实验各组惯例核型分析。成果:1、成人脂肪组织中含有大量间充质干细胞,并易于分别、培养,流式鉴定CD13、CD59、CD44阳性表白,CD34及HLA-DR阴性表白。20代时细胞增殖速度明显加快,可见到状况略不规矩的细胞呈现。25代时状况不规矩细胞增多,核浆比增加,染色体呈现断裂、畸变,呈亚二倍体核型或超二倍体核型,流式细胞(文章此处忽略..)仪检测成果显示细胞DNA合成茂盛,电镜下超微构造呈现改变。2、5-aza作用ADMSCs后7d细胞状况及排列开端产生变更,RT-PCR产物条带即见NKX2.5、GATA4基因的表白。4周后可见胞体明显增大,球形细胞增多,体积大小不等,胞浆毛糙,极个别细胞呈现轻微搏动,免疫细胞化学成果显示cTnⅠ阳性,RT-PCR产物条带见cTnⅠ基因表白。3、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组ADMSCs引诱后浮现类似心肌细胞的状况学特点。4周后Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组免疫组化成果见cTnⅠ阳性表白,RT-PCR条带见cTn(略..)Ⅰ基因表白。各组染色体构造及数量均未见异样。论断:1、树破了一种自人体脂肪组织分别、培养ADMSCs经济简便的方法,ADMSCs的长期体外培养存在遗传不牢固性,有向肿瘤细胞渐变的偏向。2、5-aza可能引诱ADMSCs向自发搏动的心肌样细胞分化。3、5-aza作为引诱剂对脂肪间充质干细胞遗传性无不良影响。


以上为本篇毕业论文范文成人脂肪间充质干细胞遗传牢固性及5-氮胞苷对成人脂肪间充质干细的介绍部分。
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