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裂殖酵母中核仁蛋白Dnt1与肿瘤抑制因子Chfr的同源蛋白Dma1相互作

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毕业论文范文题目：裂殖酵母中核仁蛋白Dnt1与肿瘤抑制因子Chfr的同源蛋白Dma1相互作，论文范文关键词：裂殖酵母中核仁蛋白Dnt1与肿瘤抑制因子Chfr的同源蛋白Dma1相互作
裂殖酵母中核仁蛋白Dnt1与肿瘤抑制因子Chfr的同源蛋白Dma1相互作毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：在裂殖酵母S.pombe中,人类肿瘤抑制因子Chfr的同源蛋白Dma1是纺锤体检验点蛋白和胞质分裂的抑制因子,它通过抑制SIN(septationinitiationnetwork)信号途径来阻止胞质分裂的起始;在有丝分裂后期Dma1同时定位在纺锤体极体(spindlepolebody,简称SPB;相当于哺乳动物的中心体)和有丝分裂环上。而核仁蛋白Dnt1与出芽酵母中的Net1/Cfi1具有同源序列,是一个新发现的（略..）有丝分裂早期SIN的抑制因子;整个细胞周期Dnt1都在核仁内有定位,在有丝分裂后期还会定位在纺锤体及SPB上。基于Dma1和Dnt1都有在SPB上定位,并且均可调控胞质分裂过程,因此本论文主要研究Dma1和Dnt1两种蛋白的相互作用关系。我们将Dma1和Dnt1分别在细菌和dnt1△的酵母细胞中表达后,进行pull-down实验,纯化后的结果显示Dma1与Dnt1在体外有着直接的相互作用;随后我们在细菌内表达Dma1的（本文此处忽略..）全长和FHA区域缺失突变体,让其分别与酵母细胞内表达的Dnt1-13myc进行体外结合实验,Westernblot检测结果发现两种蛋白之间的相互作用是通过Dma1的FHA区域介导的,而FHA区域,被认为是一个可以识别并结合到被磷酸化的肽链或蛋白上的区域。本论文中分别用CIAP和λ-PPase对蛋白进行去磷酸化处理,结果发现Dnt1蛋白磷酸化后才可以与Dma1相结合。因为Dma1与磷酸化Dnt1在有丝分裂中期的相互（文章此处忽略..）作用可以达到最强,而CDK1和Plo1是调节酵母细胞周期中的两个关键激酶,其活性都是在有丝分裂中期达到最高;我们分别利用CDK1位点突变的dnt1(7A)、dnt1(11A)和Plo1突变体plo1-24c、plo1-25以及与Plo激酶活性有关的突变体cut12.1检测这两种激酶对Dnt1磷酸化的影响,结果显示CDK1和Plo1可能并不影响Dnt1的磷酸化进而影响Dnt1与Dma1的相互作用。本论文初步阐明了Dma1与Dnt1蛋白的相互作用机制,在正常的（本文此处忽略..）有丝分裂中期被磷酸化后的Dnt1可以很强地结合到Dma1上,以达到在这一时期抑制Dma1的E3泛素连接酶活性的目的,保护Dma1的底物不会在这一时期过早被降解。鉴于裂殖酵母中的Dma1是哺乳动物中Chfr的同源蛋白,对于Dma1的深入研究将加深我们对于Chfr的功能的认识。

以上为本篇毕业论文范文裂殖酵母中核仁蛋白Dnt1与肿瘤抑制因子Chfr的同源蛋白Dma1相互作的介绍部分。

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