树突状细胞联合超抗原SEA激活TIL抗小鼠肝癌研究

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树突状细胞联合超抗原SEA激活TIL抗小鼠肝癌研究

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毕业论文范文题目：树突状细胞联合超抗原SEA激活TIL抗小鼠肝癌研究，论文范文关键词：树突状细胞联合超抗原SEA激活TIL抗小鼠肝癌研究
树突状细胞联合超抗原SEA激活TIL抗小鼠肝癌研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:探讨小鼠H22肝癌细胞(H22细胞)抗原致敏树突状细胞(dendriticcell,DC)联合超抗原(superantigen,SAg)葡萄球菌肠毒素A(staphylococcalenterotoxinA,SEA)激活肿瘤浸润淋巴细胞(tumorinfiltratinglymphocyte,TIL)体外对小鼠H22细胞杀伤活性的作用,并将H22全细胞抗原致敏的DC联合SEA激活TIL(H22-DC-SEA-TIL)过继免疫荷瘤小鼠,探索H22-DC-SEA-TIL在抗肿瘤免疫调节和抑瘤方面的作用,为肝癌的过继免疫治疗寻找新的有效方法和途径。方法:(1)从正常小鼠四肢骨中提取骨髓细胞,利用特异性的CD4、CD8a、CD45R单克隆抗体、补体缓冲液和DC的半粘附性,去除粒细胞、T细胞、B淋巴细胞、NK细胞、单核细胞和巨噬细胞,再用小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(murinegranulocytemarcophage-（略..）colonystimulatingfactor,GM-CSF)和小鼠白细胞介素-4(murineinterleukin-4,IL-4)进行体外培养,以获得大量高纯度的成熟DC。(2)用淋巴细胞分离液从荷瘤小鼠瘤体中分离提取TIL并在体外用含10%小牛血清和重组小鼠白细胞介素-2(recombinedmurineIL-2,rmIL-2)的RPMI1640完全培养基进行培养扩增。(3)在DC培养过程中加入H22细胞全细胞抗原致敏DC。(4)用已致敏DC联合SEA激活TIL。(5)体外细胞毒性实验:效应细胞分为8组,分别是:①已致敏DC联合SEA激活TIL组②已致敏DC激活TIL组③SEA激活TIL组④TIL组⑤已致敏DC联合SEA激活脾淋巴细胞组⑥已致敏DC激活脾淋巴细胞组⑦SEA激活脾淋巴细胞组⑧脾淋巴细胞组⑨注射生理盐水组;第10组为20只未荷瘤小鼠,用生理盐水尾静脉注射。检测各组治疗后小鼠脾淋巴细胞的NK、LAK、CTL活性及血清（此处忽略..）TNF水平,并观察肿瘤大小及重量变化和镜下病理改变情况。结果:(1)体外细胞毒性实验结果:①各组效应细胞对H22细胞的杀伤活性均明显高于各自对应效应细胞对S180细胞的杀伤活性,差异有统计学意义(P0.01)。②TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(51.21+3.00)%]高于脾淋巴细胞对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(19.60+2.17)%],差异有统计学意义(P0.01);用不同方式激活的TIL对H22细胞的杀伤活性均高于各自对应方式激活的脾淋巴细胞对H22细胞的杀伤活性,差异有统计学意义(P0.01)。③SEA激活的TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(62.70+2.42)%]与TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(51.21+3.00)%]比较相对较高,已致敏DC激活的TIL对H22细胞的杀伤活性更高[杀伤率为(75.23+2.71)%],而已致敏DC联合SEA激活的TIL对H22细胞的杀伤活性最高[杀伤率为(85.66+2.62)%],它们之间相互比较差异均有统计学意义(P0.01)。(2)过继免疫治疗荷瘤小鼠实验结果:①已致敏DC联合SEA激活T（此处忽略..）IL可明显诱导提高小鼠脾淋巴细胞NK、LAK和CTL活性,其活性分别为(34.23+1.52)%、(35.50+1.89)%、(39.83+1.55)%,其血清TNF水平为(46.24+1.26)U/ml,与已致敏DC激活TIL组、SEA激活TIL组、TIL组、已致敏DC联合SEA激活脾淋巴细胞组、已致敏DC激活脾淋巴细胞组、SEA激活脾淋巴细胞组、脾淋巴细胞组和注射生理盐水的荷瘤小鼠组相应指标比较,差异均有统计学意义(p0.01);而与注射生理盐水的未荷瘤小鼠比较差异无统计学意义(p0.05)。②荷瘤小鼠肿瘤生长情况:已致敏DC联合SEA激活TIL治疗组可观察到肿瘤的生长明显受到抑制,其治疗后的肿瘤大小为(0.402±0.10)cm、瘤重为(0.394±0.11)g和抑瘤率为79.39%,与其余各治疗组相比较,差异均具有统计学意义(P0.01)。③病理切片可见已致敏DC联合SEA激活TIL治疗组瘤体组织内大量淋巴细胞浸润及肿瘤细胞大片坏死,与其他各组相比肿瘤组织内淋巴细胞浸润程度差异均有统计学意义(p0.01)。结论:（文章此处忽略..）用H22细胞全细胞抗原致敏的DC联合SEA能显著激活TIL,其在体外能对H22细胞产生高效而特异的杀伤活性,并且能显著提高机体特异性和非特异性抗肿瘤免疫反应,明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,以此构建的肝癌疫苗有望为肝癌的临床治疗提供新的策略和有效的方法。

以上为本篇毕业论文范文树突状细胞联合超抗原SEA激活TIL抗小鼠肝癌研究的介绍部分。

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