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川芎嗪对大鼠免疫伤害性肝纤维化的防治作用及相干机制的研究

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毕业论文范文题目:川芎嗪对大鼠免疫伤害性肝纤维化的防治作用及相干机制的研究,论文范文关键词:川芎嗪对大鼠免疫伤害性肝纤维化的防治作用及相干机制的研究
川芎嗪对大鼠免疫伤害性肝纤维化的防治作用及相干机制的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标分辨通过猪血清腹腔打针树破大鼠体内肝纤维化模型、体外培养表型活化的肝星状细胞HSC-T_6树破细胞模型,察看川芎嗪(TMP)对大鼠肝纤维化的防备跟医治作用;以及对HSC-T_6增殖、凋亡方面的影响,从而探讨TMP防治肝纤维化作用的相干机制。方法1.动物分组:干净级雌性Wistar大鼠120只随机分为两个大组,防备组跟医治组。防备组大鼠60只再随机分为6组:畸形对比组(N)10只、模型对比组(M)18只、苦参素阳性对比组(OM)8只、TMP低剂量组(TMP-L)8只、TMP中剂量组(TMP-M)8只跟TMP高剂量组(TMP-H)8只。医治组大鼠60只分组方法同防备组。2.模型树破:采取腹腔打针猪血清树破大鼠免疫伤害性肝纤维化模型,防备组跟医治组大鼠除N组外,其余大鼠均腹腔打针猪血清(文章此处忽略..)0.5ml/次/只,每周2次,持续8周。分辨于造模开端的第4,6,7周末,随机抽取防备组中N组1只,M组大鼠3只,取肝脏做病理切片,察看模型复制情况。3.给药方法:防备组大鼠在造模同时给予药物干涉,其中OM跟TMP药物干涉组分辨腹腔打针OM60mg/kg、TMP10mg/kg、20mg/kg跟40mg/kg每天1次,N组跟M组分辨腹腔打针氯化钠打针液10ml/kg作为对比,给药持续8周;医治组从第9周起结束打针猪血清,开端给予药物干涉,给药方法跟剂量同防备组。在第11、13、15周末,随机抽取医治组中N组大鼠1只,M组大鼠各3只,取肝脏做病理切片,察看模型有无自愈情况。4.样本采集:采集样本前,大鼠禁食12h。防备组大鼠在第8周末,眼内眦取血,分别血清备用。断颈处死大鼠后取肝脏第4叶组织(文章此处忽略..),置10%甲醛中固定,石蜡包埋、切片。医治组大鼠在第16周末采集样本,方法同防备组。5.指标测定:HE染色察看肝组织病理状况学改变,并进行肝纤维化分级;察看TMP对血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(A)、球蛋白(G)含量的影响;喷射免疫法检测TMP对血清透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、血清Ⅳ型胶原(C-IV)含量的影响;免疫组织化学SP法检测转化成长因子β1(TGF-β_1)、金属蛋白酶组织克制因子-1(TIMP-1)在肝组织中的表白并进行半定量评估。6.体外培养HSC-T_6,用不同浓度的TMP进行干涉,察看TMP对HSC-T_6的作用;利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)染色法察看TMP对HS(本文此处忽略..)C-T_6增殖的克制造用;利用吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB)染色法与流式细胞仪检测TMP对HSC-T_6凋亡的影响。成果1、TMP可明显改良大鼠肝纤维化,防备组跟医治组中TMP干涉的大鼠肝纤维化分级程度与各自M组比拟明显减轻(P0.01)。2、TMP20mg/kg、40mg/kg腹腔打针可明显降落大鼠血清ALT、AST、ALP程度,进步A/G比值(P0.01)。3、TMP20mg/kg、40mg/kg腹腔打针可明显降落肝纤维化大鼠血清HA、LN、PⅢNP、C-IV程度(P0.01)。4、与模型组比拟,在大鼠肝纤维化构成过程中跟肝纤维化构成后腹腔打针TMP10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg可下调TGF-β_1、TIMP-1表白(P0.01)。5、TMP0.10mg/ml即可表示出对HSC-T_6的增殖克制(此处忽略..)造用(P0.05或P0.01);促进其凋亡(P0.05或P0.01),并且这些作用存在良好的剂量相干性。论断川芎嗪对猪血清引诱的大鼠实验性肝纤维化存在明显的防备跟医治作用;其作用机制与拮抗细胞因子TGF-β_1、克制TIMP-1表白增高,从而促进胶原降解;克制肝星状细胞活化并促进活化的肝星状细胞凋亡相干。


以上为本篇毕业论文范文川芎嗪对大鼠免疫伤害性肝纤维化的防治作用及相干机制的研究的介绍部分。
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