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酪氨酸激酶Etk/BMX对鼻咽癌喷射敏感性影响的研究

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毕业论文范文题目:酪氨酸激酶Etk/BMX对鼻咽癌喷射敏感性影响的研究,论文范文关键词:酪氨酸激酶Etk/BMX对鼻咽癌喷射敏感性影响的研究
酪氨酸激酶Etk/BMX对鼻咽癌喷射敏感性影响的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:一、研究背景鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)是中国南部高发肿瘤,其发病有明显的种族地区跟家族地区聚积景象。据估计世界上80%的鼻咽癌产生于我国,其中绝大部分又分布于广东及周边地区。鼻咽癌是耳鼻咽喉科最常见的恶性肿瘤,占头颈部恶性肿瘤的78.08%。其发病年纪较其余癌症年青,以30-50岁为最多。男性较女性多发,患者男女之比为3:1。早期鼻咽癌的治愈率可达70%左右,而晚期患者的5年生存率仅8%-10%。鼻咽癌已经成为重大威胁我国国民生命跟健康的十大恶性肿瘤之一。鼻咽癌多属低分化鳞状细胞癌,其重要医治手段是放疗。部分鼻咽癌患者呈现肿瘤复发,其重要起因是癌细胞对喷射线产生抵抗性,具体机制目前尚不非常明白。影响肿瘤细胞喷射敏感性的因素很多,细胞凋亡是重要的因素之一。自1972年Kerr发明天然界存在凋亡景象以来,人们对其意识始终加深,并陆续发明了凋亡克制基因bcl-2跟凋亡活化基因p53等一系列凋亡调控基因,同时发明这些基因亦可能参加调控(本文此处忽略..)细胞周期的改变。内皮/上皮细胞酪氨酸激酶(Theendothelial/epithelialtyrosinekinase,Etk/BMX),属于蛋白酪氨酸激酶(Bruton'styrosinekinase,Btk)家族。Etk是其中独逐个种不仅分布于淋巴造血细胞,还在上皮性瘤细胞跟血管内皮细胞中表白的非受体类酪氨酸激酶。国外学者最早在前列腺癌跟乳腺癌中研究发明:野生型Etk高表白可能明显克制癌细胞凋亡。而在鼻咽癌中研究显示Etk在鼻咽癌细胞中呈现异样高表白。本次实验旨在利用Etk/BMX牢固高表白细胞株(sune-wt),从体外跟体内两个方面研究Etk/BMX对鼻咽癌细胞喷射敏感性的影响,为探讨鼻咽癌喷射抵抗的机制提供实验根据。二、目标研究酪氨酸激酶Etk/BMX对鼻咽癌细胞喷射敏感性的影响并探讨其可能机制。三、方法选取鼻咽癌细胞株中表白Etk最低的sune-1作为细胞本株,利用Lipofectamine2000将野生型酪氨酸激酶E(文章此处忽略..)tk/BMX表白质粒pcDNA3.0-Etk导入其中,经过筛选扩大培养成功树破Etk/BMX牢固高表白细胞株sune-wt,同时导入空质粒pcDNA3.0转染细胞作为对比(sune-vector)。X射线(0、2、4、10、15Gy)照射后,MTT法测定细胞的存活分数(survivalfraction,SF);流式细胞术检测细胞的凋亡率、细胞周期、增殖指数以及凋亡相干蛋白p53、bcl-2、bcl-xl跟bak的变更情况。将上述3组细胞皮下接种于BALB/Cnu/nu裸鼠,察看其成瘤情况并打算肿瘤体积,肿瘤体积利用游标卡尺测量肿块的长半径R1跟短半径R2。打算公式为:V=4/3×π×R1×R1×R2。当成瘤到必定时光(21天)时对其进行X线照射(5Gy)×5天。察看其肿瘤变更情况。采取SPSS10.0针对存活分数、凋亡率、细胞周期、增殖指数、p53、bcl-2、bcl-xl跟bak等进行析因分析,动物实验采取反复测量设计、LSD两两比较等。数据均采取均数±标准差显示。四、成果1、成功筛选出高Et(文章此处忽略..)k表白的细胞株:利用流式细胞仪对细胞株sune-1跟sune-wt进行检测。sune-1表白率为4.6±1.45%;sune-wt表白率为75.5±2.34%。2、sune-wt组SF均明显高于对比组:不同剂量X线照射后sune-wt组SF均高于sune-1、sune-vector,而sune-1、sune-vector之间无明显差别。3、sune-wt凋亡率均较对比组低:不同剂量照射后sune-wt凋亡率均比阴性对比跟空白对比组低。0、4、10跟15Gy照射后细胞凋亡均跟着照射剂量的增加而增加,在同一剂量时sune-wt均较其余细胞株不敏感,凋亡率低,而sune-1跟sune-vector之间无明显差别。4、sune-wt照射组较sune-wt未照射组p53减少、bcl-2增加,bcl-xl、bak无明显变更,而sune-1、sune-vector照射前后p53、bcl-2、bak无统计学差别。5、0,4,10Gy照射后三者细胞周期无统计学改变,15Gy照射后sune-wt呈现明显S、(本文此处忽略..)G2期阻滞,G1期减少。照射后增殖指数均较照射前提高,sune-wt的增幅更加明显。6、皮下接种细胞成瘤成果示:sune-wt接种一次成功率87.5%,sune-1为50%,sune-vector为40%。sune-wt较sune-vector跟sane-1成瘤率较高,X射线照射后体积增加较sune-vector跟sane-1速度快,差别明显。五、论断体外实验证明:Etk/BMX有加强鼻咽癌细胞对喷射线的抵抗作用,其机制可能是通过调控p53跟bcl-2的表白以及引起S、G2期阻滞两种道路实现。体内实验证明:Etk/BMX在动物体内也可能加强鼻咽癌对喷射线的抵抗作用。


以上为本篇毕业论文范文酪氨酸激酶Etk/BMX对鼻咽癌喷射敏感性影响的研究的介绍部分。
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