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miR-15a对流感病毒诱导细胞凋亡机制研究

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毕业论文范文题目：miR-15a对流感病毒诱导细胞凋亡机制研究，论文范文关键词：miR-15a对流感病毒诱导细胞凋亡机制研究
miR-15a对流感病毒诱导细胞凋亡机制研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：以流感病毒感染的人肺腺癌上皮细胞模型为研究对象,用Real-timePCR技术、反义及过表达技术、生物信息学分析等技术鉴定出目的miRNA与流感病毒感染的关联机制,分析目的miRNA在流感病毒感染致病进程中的作用机制。方法：应用Real-timePCR技术检测流感病毒感染后宿主细胞miR-15a的表达情况；通过反义及过表达技术影响宿主细胞内miR-15a的表达,然后从细胞形态观察、活细胞计量、病毒增殖情况、流式细胞技术检测细胞凋亡等角度初探miR-（本文此处忽略..）15a与流感病毒感染致病的关联机制做进一步验证；以先验相关研究结果为基础,鉴定已知的miR-15a的靶基因的表达情况,同时使用生物信息学方法鉴定潜在的miR-15a新的靶基因,进一步深入阐明其在流感病毒感染致病过程中的作用机制。结果：本实验成功构建了miR-15a真核表达载体,PCR鉴定及DNA序列测定均与目的基因序列一致。Real-timePCR检测结果显示miR-15a表达量明显高于阴性对照质粒组的表达量,差异具有统计学意义(P0.05)；Real-timePCR检测结果（略..）显示,A549细胞转染流感病毒后,miR-15a表达显著上调,差异具有统计学意义(P0.05)；通过过表达和抑制miR-15a后,应用CCK-8法检测显示随着miR-15ainhibitor剂量的减少,细胞病变率随之增加,说明miR-15a能够诱导细胞凋亡；流式细胞仪-AnnexinV/PI双染色法检测显示随着miR-15ainhibitor剂量的增加,细胞病变率也随之减少,结果说明miR-15a参与了流感病毒诱导的A549细胞凋亡；miR-15a靶基因在mRNA和蛋白水平的表达结果均显示三个靶基（略..）因BCL2、CCND1和P85的表达均随病毒感染进程Oh、12h、24h逐渐下调；Action无肉眼可见差异。说明流感病毒通过感染细胞,影响miR-15a表达上调,进而下调BCL2、CCND1和P85这三个靶基因,从而诱导细胞凋亡；生物信息学方法分析miR-15a潜在的其它靶基因。应用TargetScanTargetScan5.1(http://www.targetscan.org/)与PicTar(http://pictar.mdc-berlin.de/)两种计算方法预测miR-15a的靶基（本文此处忽略..）因,将其结果的交集进行生物通路富集分析和Biocarta通路数据库富集分析等,为进一步探求miR-15a其它的靶基因提供些许思路。结论：以上研究显示miR-15a参与了流感病毒诱导细胞凋亡的生物进程,随着我们研究的不断深入,将进一步了解miR-15a对流感病毒的作用机制,为流感病毒的预防和治疗提供帮助。

以上为本篇毕业论文范文miR-15a对流感病毒诱导细胞凋亡机制研究的介绍部分。

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