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蟛蜞菊化学成分及抗肿瘤活性研究

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毕业论文范文题目:蟛蜞菊化学成分及抗肿瘤活性研究,论文范文关键词:蟛蜞菊化学成分及抗肿瘤活性研究
蟛蜞菊化学成分及抗肿瘤活性研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:蟛蜞菊(Wedeliachinensis),异名马兰草、蟛蜞花、路边菊,是菊科蟛蜞菊属动物蟛蜞菊的全草。重要分布于中国南部的福建、广东、广西等省[1]。蟛蜞菊性甘、微酸、凉,存在清热解毒、化痰止咳、凉血平肝、祛瘀消肿等功能[2],重要用于医治白喉、百日咳、痢疾、痔疮、跌打伤害。南方各省民间常用于医治咽喉炎、喉痹、喉蛾等,还可用于防备麻疹。现临床上用于医治肝炎、口腔炎等,后果较好[3]。但目前对该动物化学成份的研究还并不深刻,研究表明已从中分别出了有机酸类、倍半萜类、三萜类、三萜苷类、黄酮类跟甾类等化合物[4]。文献还报道蟛蜞菊化学成份存在广泛的药理作用,如保肝作用、解热镇痛作用跟抗炎作用,但报道的多为提部位的药理活性,而其作用的物质基本尚未明白。目标:本研究旨在以蟛蜞菊(地上部分)为研究对象,应用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、葡聚糖凝胶色谱、制备薄层色谱、高效液相制备色谱以及重结晶等分别纯化技巧对其地上部分的提取物进行体系研究(此处忽略..),从中分别得到单体化合物,并利用UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR、1H-1HCOSY、HMQC、HMBC、NOESY等古代化手段实现单体化合物分子的平面构造跟破体构造的鉴定,再对分别得到的单体化合物进行初步的抗肿瘤活性实验,以期寻找到其活性成分或活性部位,以开辟中药资源,丰富中药的多样性跟完美用药的公道性。方法:干燥的蟛蜞菊属动物蟛蜞菊地上部分(3.0Kg)恰当粉碎后,用95%乙醇持续回流提取3-4次,趁热活性炭脱色、过滤,合并滤液减压稀释至粘膏状(600g),即得到蟛蜞菊地上部分的提取物;将其溶于盐水中(约相称于1g/mL的水溶液,低温水浴加热助溶),构成悬浊液,顺次用石油醚、二氯甲烷、水饱跟的醋酸乙酯萃取,继而得到石油醚部位(24.5g)、二氯甲烷部位(15.0g)跟醋酸乙酯部位(13.0g)。本研究先后对石油醚部位、二氯甲烷部位跟醋酸乙酯部位采取硅胶柱色谱进行初步分别,析出的固体跟洗脱液稀释母液,经薄层色谱检识后(薄层色谱检识板:由GF254薄层色谱硅胶与0.5%CMC-N(此处忽略..)a混匀后铺制于玻璃板上,天然晾干而成。样品点样于该类薄板上,晾干,恰当开展剂开展,挥尽开展剂后先在254nm紫外灯下察看是否有荧光,再浸入10%的硫酸-乙醇液中,取出后经140℃加热显色),进一步用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、葡聚糖凝胶色谱、制备薄层色谱、高效液相制备色谱反复分别纯化得到单体化合物。并应用化学方法跟多种波谱技巧(UV,1H-NMR,13C-NMR,1H-1H-COSY,HMQC,HMBC等)对这些单体化合物进行检测,根据测定的图谱数据分析断定单体化合物的平面构造跟破体构造。再对得到的单体化合物进行抗肿瘤活性的初步研究。将HeLa等肿瘤细胞株悬液接种于96孔培养板,分辨参加不同浓度单体化合物,培养箱中培养2天,于培养结束前4小时,各培养孔参加5mg/ml四氮唑盐(MTT)10μl,培养结束后,用酶联免疫检测仪检测各孔吸光度(OD)值,测定波长λ=570nm,参考波长λ=630nm,并打算肿瘤细胞生存率。成果:对蟛蜞菊属动物蟛蜞菊地上部分的化学成分进行了体系研究,(文章此处忽略..)具体采取了硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、葡聚糖凝胶色谱、制备薄层色谱、高效液相色谱等多种分别手段或方法,从中得到13个单体化合物,并应用UV、1H-NMR、13C-NMR、1H-1HCOSY、HMQC、HMBC等古代化手段对其进行构造鉴定,已断定了4个化合物的构造,该4个化合物的构造名称分辨为:化合物D为24-甲叉基-9,19-环木菠萝烷醇;化合物F为β-谷甾醇;化合物H为齐墩果酸;化合物K为齐墩果酸-11,13(18)-二烯-3-O-b-D-葡萄糖醛酸甲酯。其它9个化合物的构造还在鉴定中,它们分辨是:化合物A,B,C,E,G,I,J,L,M。对其中6个化合物(compoundA,D,H,I,J,M)进行了抗肿瘤活性筛选,成果显示:化合物A、I跟M对妇科肿瘤细胞,尤其对人子宫内膜癌细胞增殖有较强的克制活性;化合物A跟M对人脑神经胶质瘤细胞显示强的克制活性;化合物H对人子宫颈癌细胞、人卵巢囊腺癌细胞跟人黑色素瘤细胞的增殖有较好的克制活性。论断:通过体系提取分别动物蟛(本文此处忽略..)蜞菊(Wedeliachinensis)地上部分,共分别得到13个化合物,并且应用了多种古代波谱手段及其相干常识对该13个化合物进行了构造鉴定,已断定了4个化合物的构造,其它9个化合物的构造还在鉴定中,其中24-甲叉基-9,19-环木菠萝烷醇(化合物D)跟齐墩果酸(化合物H)为首次从该属动物中分别得到。对其中6个化合物进行了活性筛选发明有4个化合物存在明显抗肿瘤活性,其中化合物A、I跟M对人的妇科肿瘤细胞,尤其对人子宫内膜癌细胞增殖有较强的克制活性;化合物A跟M对人脑神经胶质瘤细胞显示强的克制活性;化合物H对人子宫颈癌细胞、人卵巢囊腺癌细胞跟人黑色素瘤细胞的增殖有较好的克制活性。


以上为本篇毕业论文范文蟛蜞菊化学成分及抗肿瘤活性研究的介绍部分。
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