新型多酸化合物抗肠道病毒71型活性研究

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新型多酸化合物抗肠道病毒71型活性研究

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毕业论文范文题目：新型多酸化合物抗肠道病毒71型活性研究，论文范文关键词：新型多酸化合物抗肠道病毒71型活性研究
新型多酸化合物抗肠道病毒71型活性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：手足口病（hand-footandmouthdisease，HFMD)是一种儿童传染病，又名发疹性水疱性口腔炎。多发生于5岁以下儿童，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。个别重症患儿如果病情进展迅速，则导致死亡。手足口病是由肠道病毒引起的传染病，引发手足口病的肠道病毒有20多种（型），其中以柯萨奇病毒A16型（CoxA16）和肠道病毒71型（EV71）最为常见。肠道病毒71型（EV71）是手足口病的病原体之一，近年来有报道在亚太地区6岁以下儿童中手足口病有大量爆发流行，而至今还未发现有效的抗EV71病毒治疗方法和疫苗。杂多酸化合物（POM）是一种已知的带有阴离子团的金属氧化（略..）物。这种化合物已经表现出广谱抗病毒活性。本项研究的目标是评价POM抗EV71病毒的生物活性。受试化合物分别标记为4#、6#和12#。方法与结果：1、检测三种多酸化合物的细胞毒性：加入这三种多酸化合物2天后，活细胞数与未加受试化合物的阴性对照组差别无统计学意义。三种多酸化合物在500μM浓度下与细胞共培养2天，未对细胞生长产生影响，细胞毒性很弱。2、多酸化合物的体外抗病毒研究：⑴在CPE抑制实验中，接种病毒的细胞发生CPE后死亡，不能被结晶紫染色，而添加多酸化合物的对照组，该化合物于浓度为100μM时，染色良好,细胞存活率明显升高，并且发现4#、6#和12#化合物均有CPE抑制效果。⑵在空斑试验中，POM以剂量依赖性抑制EV71感染，IC50值约（略..）100μM。采用加药时间分析来研究POM抗病毒作用机制，结果显示：病毒感染细胞1小时后使病毒进入细胞内，洗去病毒液，加入药物反应1小时后，洗净，添加覆盖层，温箱孵育2天后观察。发现加入三种化合物形成空斑数都远远大于300，与只感染病毒的阳性对照组相比，空斑数无统计学意义，但12#化合物的抑制率明显优于4#和6#，抑制率为50%。药物与细胞作用1小时之后洗去，再用病毒感染一小时，洗净，添加覆盖层，温箱孵育2天后观察。12#化合物在100μM的浓度时对空斑的抑制作用约为70%，但是在10μM的浓度下三种化合物均未表现出对病毒的抑制作用。病毒液与化合物混合后37℃二氧化碳温箱中预处理1小时之后将其混合物加入细胞中，洗净，再添加覆盖层，温箱中孵育2天。在这个反应条（文章此处忽略..）件下，三种化合物的空斑抑制效果皆很明显，在浓度为100μM的时候三种化合物抑制率均大于90%，4#和12#化合物甚至未观察到空斑形成，12#化合物在20μM的时候，抑制率也接近90%。在三种化合物中抗病毒活性在POM在与病毒共同预孵育之后显示出抗EV71作用最显著，这提示了POM在早期阶段抑制EV71感染，有可能是直接作用于病毒，使之失活，而不是作用于宿主细胞。⑶EV71病毒RNA定量实验：药物与病毒混合后加入细胞的反应组，4#对EV71病毒RNA释放量未见明显抑制。6#浓度为10μM和100μM时对病毒RNA定量下降相差不大，下降率约为40%。12#在10μM浓度中下降率约70%，在浓度为100μM时下降率大于90%。我们将PCR产物在凝胶电泳中检测，发现产物长度位于100~250bp之间，这个长度（此处忽略..）符合两段EV71引物之间基因序列长度区间。将产物测序结果我们进行了BLAST比对，结果与人EV71病毒吻合度极高，可见抽提产物为目标病毒基因，无其他干扰和污染。目标基因为EV71病毒RNA,12#药品在与病毒混合后作用效果明显，降低了病毒RNA。我们的结果为抗EV71病毒药物研发提供了重要可能性。

以上为本篇毕业论文范文新型多酸化合物抗肠道病毒71型活性研究的介绍部分。

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