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高致病性PRRSV WUH3株分别鉴定及体别传代的遗传变异研究

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毕业论文范文题目:高致病性PRRSV WUH3株分别鉴定及体别传代的遗传变异研究,论文范文关键词:高致病性PRRSV WUH3株分别鉴定及体别传代的遗传变异研究
高致病性PRRSV WUH3株分别鉴定及体别传代的遗传变异研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种感染病,以妊娠母猪繁殖妨碍以及仔猪的呼吸道症状引起高逝世亡率为特点。早在1987年该病在美国南部被报道,随后遍布世界各地,给寰球养猪业造成了宏大的经济丧失。2006年,我国暴发了一种“猪高热综合症”,以高发病率、高热跟高逝世亡率为特点。研究者通过很多研究,证明高致病性PRRSV变异株是“猪高热综合症”的重要病原。针对这种新的PRRSV,本研究进行了病毒的分别与鉴定,将分别毒株WUH3株在Marc-145细胞长进行体别传代传75代,对WUH3株亲本株、第25代(P25)、第50代(P50)、第75代(P75)进行全基因组测序(文章此处忽略..),利用分子生物学各种软件对不同代次细胞毒全基因组做生物信息学分析,研究WUH3株在体别传代过程中传代毒株之间遗传进化法则,为高致病性PRRSVWUH3株不同代次细胞毒之间氨基酸的变异跟毒力的关联提供分子程度的根据,为研发高致病性PRRSV弱毒疫苗提供实际跟技巧上的支撑。重要研究内容包含:1.高致病性PRRSVWUH3株的分别、鉴定在“猪高热综合症”产生时代利用Marc-145细胞对疑似发病猪的组织进行病毒分别,并通过RT-PCR、间接免疫荧光等实验证明分别的病毒为PRRSV,命名为PRRSVWUH3株。2.高致病性PRRSVWUH3株的体别传代高致(本文此处忽略..)病性PRRSVWUH3株利用Marc-145细胞体别传代至75代,第5代细胞毒接毒后3d呈现局灶性病变,5d后呈现70%细胞病变。跟着传代次数始终增加,呈现细胞病变的时光始终缩短,由最初3d缩短到75代的24h,产生70%细胞病变的时光由最初5d缩短到第75代的48h,TCID50殖总体呈回升趋势,毒量始终地增高,这阐明在体别传代过程中WUH3株适应细胞才能始终加强。3.高致病性PRRSVWUH3株全基因组的序列分析将高致病性PRRSVWUH3株及其传代细胞毒株P25,P50,P75做全基因序列测定并进行分析。全基因组序列比对成果表明,PRRSVWUH3株及其传代细胞毒株与国内当初风行的高致病性PRRS(文章此处忽略..)V存在类似的遗传标记,即Nsp2存在30个氨基酸的不持续缺失以及5'UTR跟3'UTR各缺失一个碱基。与WUH3株亲本株比拟,WUH3株传代细胞毒P75存在149个核苷酸渐变,导致了65个氨基酸产生有义渐变。利用各种生物学软件对4代全基因组序列及氨基酸做生物信息学分析,成果显示,很多氨基酸渐变位于PRRSV基因组功能区。比方信号肽序列(P4SORF4),跨膜区序列(L172FORF4,P173AORF4,S174IORF4),N-糖基化位点序列(S133NORF3),有些抗原表位也产生了变更(A181TNSP2),这些氨基酸的渐变可能在病毒的复制,蛋白转运,信号转导中有必定作用。另外,PRRSVWUH3株传代与JXA1株(略..)同步传代过程中有8个位点的渐变方向类似,即E303DNSP2,E296DNSP3,N162SNSP7,R204HNSP10,F251SORF2,L172FORF4,P173AORF4,S174IORF4,揣测这8个位点在PRRSV传代过程中毒株毒力致弱有必定作用。


以上为本篇毕业论文范文高致病性PRRSV WUH3株分别鉴定及体别传代的遗传变异研究的介绍部分。
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