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番茄细菌性溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michigan

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毕业论文范文题目:番茄细菌性溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michigan,论文范文关键词:番茄细菌性溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michigan
番茄细菌性溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michigan毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:番茄细菌性溃疡病(Clavibactermichiganensissubsp.michiganensis,Cmm)是严重危害番茄的细菌性病害,主要靠带菌种子进行远距离传播,被许多国家列为检疫病害。在口岸检疫及种子种苗健康检测中,传统的分离培养、生理生化鉴定、噬菌体检测、免疫荧光染色及寄主致病性试验等是研究者一直采用的方法。这些检验方法存在很多局限性,不适合口岸检疫快速验放的要求。因此,快速、灵敏、特异性强的P(略..)CR技术近年来被广泛应用于植物病原菌的检测。但常规PCR技术需很多后续处理,也容易造成实验室及PCR产物的污染。TaqMan实时荧光PCR技术是在普通PCR基础上加入一条TaqMan探针,该探针能在PCR的每个循环与靶序列进行特异性杂交,有效提高反应特异性和灵敏度,更好地避免假阴性结果,使PCR技术检测痕量样品的能力进一步加强。本研究依据番茄细菌性溃疡病菌ITS序列的多态性设计TaqMan探针及特异性引物(文章此处忽略..),分别对该病菌进行常规PCR及实时荧光PCR检测。特异性引物及TaqMan探针能检测出所有供试的Cmm菌,其它对照菌均无电泳条带也未收集到荧光信号,显示出该引物-探针组合有很强的特异性。通过对不同浓度菌悬液的常规PCR和实时荧光PCR扩增,发现实时荧光PCR检测灵敏度比常规PCR高约100倍,能很好地避免假阴性结果。以接种但未显示症状的番茄苗叶片提取核酸作为模板,常规PCR方法能在接种后第6天检测到该菌,而实时荧(略..)光PCR则可以在接种后第4天就检测到该菌的存在。通过对人工模拟带菌种子的测试发现,番茄种子的核酸作为模板对PCR扩增不存在抑制作用或抑制作用微弱,完全可以通过实时荧光PCR技术获得准确的试验结果。将带菌种子浸泡液及带菌种子的核酸作为模板进行PCR扩增,实时荧光PCR的相对灵敏度明显高于常规PCR,而且经过比较得出,应用种子核酸作为模板能到达更好的检测效果。本研究可直接应用植物总DNA作为试验材料,无需进行病(略..)原菌的分离培养及性状观察。由于采用光电传导系统和计算机操作系统能够很直观地反映出整个PCR过程各个反应阶段的信息,而且不需要进行PCR产物的后续处理,可以提高检测效率,减少污染。本研究在国内首次建立了对Cmm的TaqMan实时荧光PCR检测体系,并获得很好的检测结果。该方法快速、灵敏、特异、安全,能及早提供准确的病害信息,为农业生产部门、检疫部门及种子种苗相关领域提供有力的技术支持。 


以上为本篇毕业论文范文番茄细菌性溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michigan的介绍部分。
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