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NGF、KGF在银屑病中的表达和意义

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毕业论文范文题目:NGF、KGF在银屑病中的表达和意义,论文范文关键词:NGF、KGF在银屑病中的表达和意义
NGF、KGF在银屑病中的表达和意义毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:银屑病是一种常见的慢性炎症性皮肤病。其重要的病理特征是角质形成细胞的过度增生和炎症细胞的局部浸润。尽管目前从组织病理、生化代谢、遗传及细胞动力学等多个方面观察到本病存在着某些异常变化,但对本病复杂的病理过程的产生还缺乏全面的解释。近年来,大量实验资料显示来源于角质形成细胞(Keratinocyte,KC)的神经细胞生长因子(NerveGrowthFactor,NGF)和来源于成纤维细胞的角质形成细胞生长因子(KeratinocyteGrowthFactor,KGF)作为KC有效的促细胞有丝分裂因子,对KC的增殖、分化、移行及炎症细胞的浸润均起着重要的作用。迄今尚未见关于NGF、KGF表达与临床因素关系的研究及它们在不同部位表达的比较及NGF、KGF表达的平行性研究。本研究拟观察NGF、KGF及其受体、EGFR、PCNA在KC中的表达情况,并比较不同年龄、性别、病程、病期、不同部位各因子之间可能存在的相互关系并(此处忽略..)探讨其机制。实验方法标本取材研究对象包括33例银屑病患者,寻常型,其中男22例,女*例;年龄6-62岁,平均48岁;病程2周-41年,平均9年。正常对照组为非皮肤病的外科门诊小手术切取的正常皮肤13例。活检标本采用常规小手术切取皮损区皮肤,及距皮损Icm处外观正常皮肤8块,取材后标本分成两块,一块立即置液氮保存并置于.80℃深低温冰箱;另一块经10%福尔马林包埋,送往病理科蜡块保存。将冰冻切片切成5fill切片;丙酮固定:将含有组织的蜡块切成约sum左右的切片,经脱蜡、水化后运用免疫组化SP法染色。多克隆抗体:角质形成细胞生长因子(KGF)2角质形成细胞生长因于受体(**FN;神经细胞生长因子州*n。以上均为SantaCruze公司产品。单克隆抗体:神经细胞生长因于受体(**FR);表皮细胞生长因子受体(EGFR);增殖细胞核抗原(PCNA)。以上均购自福建迈新生物技术开发公司。兔疫组化SP法染色冰冻切片经冷丙酮固定10分钟,PBS液洗3次。滴加3%HZO。缓(略..)冲液,孵育10分钟,然后PBS液清洗三次。每张切片上加50ill的链亲和素-过氧化物酶溶液,室温下孵育30分钟后PBS液冲洗5分钟X3。每张切片上加50ill的第一抗体,分别为鼠抗人单克隆NGF、兔抗人多克隆KGF、兔抗人多克隆KGFR,4’C温度下孵育过夜后PBS液冲洗5分钟X3。每张切片上加50UI的生物素标记的第二抗体,30分钟后叩S液冲洗5分钟X3。每张切片上加50ill的链亲和素-过氧化物酶溶液,显微镜下观察着色情况,约5分钟后用自来水冲洗。在每张切片上加100UI新鲜配置的DAB溶液,显微镜下观察着色情况,约5分钟后用自来水冲洗。用苏木素复染约4分钟后自来水冲洗干狰,自然干燥后,2再用中性树胶封固。石蜡切片则常规脱蜡和水化后,用PBS液冲洗3次,每次5分钟,每张切片上加3%HZOZ,以阻断内源性过氧化物酶的活性,室温下孵育10分钟,PBS液冲洗后将切片置人抗原修复工作液中,电炉上加热,使温度保持在98”C-100oC,自然冷却20分钟后,PBS液冲洗3次,然后各加一滴非兔疫性动(此处忽略..)物血清,PBS液冲洗后,再滴加1抗,分别为鼠抗人单克隆PCNA和EGFR,余步骤同前。以PBS液代替1抗作为阴性对照组。统计方法:统计处理采用SPSSS.0统计软件包中的H检验(KruskalandWallis法)以及Kendall等级相关分析。结果正常表皮中,KGF、KGF受体主要微弱地表达在基底层细胞的胞浆;NGF在正常表皮未见或仅见微弱的表达,NGF受体则主要表达在角质层、颗粒层;EGFR表达以表皮上层为主,而PCNA在基底细胞有零星的分布。银屑病表皮中,KGF、KGF受体在表皮的基底层及基底上层有较强的表达,相对正常表皮明显上调;NGF主要表达在角化不全的角质层。颗粒层、棘细胞层上部,表达以胞核为主,而在基底细胞的底膜也有微弱的表达;NGF受体主要表达在角质层、棘细胞层上部,余未见表达;EGFR则主要表达在棘细胞上部的表皮各层,而基底细胞及棘细胞下层未见表达,真皮及皮下组织内可见少量淋巴细胞。血管内皮细胞表(此处忽略..)达:***A则不仅表达在基底细胞,而且在棘细胞下层可见较多的表达。银屑病患者皮损中各因于的表达与临床因素关系分析:KGF。NGF、EGFR、PCNA的表达与患者的性别、年龄的大小、病程的3长短均无关(P>0.05)。而KGF。NGF、EGFR的表达在进行期、缓解期的表达均具有统计学上的显著差异,P分别为0.012、0、020、0.052。与正常对照组、非皮损组相比,皮损组KGF、KGF受体表达均明显上调沙均<O.05);而正常对照组与非皮损组则无显著性差异(P>0.05);**F、**FR在银屑病皮损的表达与正常对照组、非皮损组相比有显著性差异(P<0.05)Z正常对照组与非皮损组亦有显著性差异(P<0刀1)。银屑病皮损区**FR比正常皮肤、非皮损区的表达显著上调o<0


以上为本篇毕业论文范文NGF、KGF在银屑病中的表达和意义的介绍部分。
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