氨基转移酶基因（eR基因）的克隆及在黄瓜中的遗传转化

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氨基转移酶基因（eR基因）的克隆及在黄瓜中的遗传转化

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毕业论文范文题目：氨基转移酶基因（eR基因）的克隆及在黄瓜中的遗传转化，论文范文关键词：氨基转移酶基因（eR基因）的克隆及在黄瓜中的遗传转化
氨基转移酶基因（eR基因）的克隆及在黄瓜中的遗传转化毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：由假古巴霜霉菌(Pseduoperonosporacubensis)引起的霜霉病是世界范围内的瓜类作物的灾害性病害。黄瓜(CucumisstativusL.)上尤为严重，无论是保护地还是露地条件下栽培的黄瓜，发病普遍而且危害严重。利用DNA重组技术可使性状在种间转移，且受体本身主要性状不被改变，突破了远缘杂交不亲合障碍，开辟了植物育种的新途径。本试验以黄瓜、甜瓜为试材，克隆了两个eR基因，H-At2、T-At2，其中H-At2基因为首次在黄瓜中克隆，并得到编码区（略..）序列。申请了GENBANK号，分别为EF628204、EF628205。同时也克隆了黄瓜、甜瓜基因组中的At2基因，记为H’-At2、T’-At2，也申请了GENBANK号，分别为EF628206、EF628207。将H-At2、T-At2这两个基因转化到黄瓜中，期望提高黄瓜对霜霉病的抗性，获得有育种价值的黄瓜种质资源。通过提高寄主酶促活性来提高抗病性的基因，被叫做酶促抗性基因(enzymaticresistance)简称eR基因。At1、At2是编码光呼吸乙醛酸循环过氧化氢酶系中的氨基转移酶的两个基因，最近的研（文章此处忽略..）究表明将两个基因转化到感性甜瓜品系表现出对霜霉病高抗病性。本试验在此基础上以黄瓜、甜瓜为试材，采用RT-PCR(reversetranscriptionpolymerasechaieaction)方法从cDNA中克隆了eR基因—氨基转移酶基因(At2)；构建了由光合启动子PNZIP调控的At2基因的植物表达载体(PPN-At2)和植物通用表达载体PPN；利用花粉管通道技术将其导入黄瓜优良自交系中。获得了转PPN-at2PCR阳性植株。主要研究结果如下：1．本实验重点进行（略..）了氨基转移酶基因(At2基因)的克隆及其表达载体的构建。根据甜瓜At2基因序列设计引物，从抗病黄瓜、甜瓜叶片的总RNA中，利用RT-PCR技术扩增出H-At2、T-At2编码区基因片段，克隆到PGEM-Teasy载体中，经测序发现与已知的抗性At2序列具有很高的同源性。2．构建了由PNZIP的启动子调控的通用植物表达载体(PPN)及其At2基因的植物表达载体(PPN-At2)。用ScaⅠ／ScaⅡ从重组质粒中切出H-At2、T-At2基因片段，插入到PNZIP的启动子之后，获得了（此处忽略..）工程菌株，并命名为PPN-at2。3．利用花粉管通道技术对上述基因进行了黄瓜的遗传转化实验。将PPN-At2导入黄瓜优良自交系中，在经卡那霉素(KN)抗性初步筛选基础上，对抗性苗进行了PCR技术扩增，获得了5株转基因植株。其转化率在万分之二三左右。这种利用花粉管通道技术转化率为黄瓜的遗传转化拓宽了转化途径。

以上为本篇毕业论文范文氨基转移酶基因（eR基因）的克隆及在黄瓜中的遗传转化的介绍部分。

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