自体骨骼肌成肌细胞移植治疗缺血性慢性心衰的研究

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自体骨骼肌成肌细胞移植治疗缺血性慢性心衰的研究

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毕业论文范文题目：自体骨骼肌成肌细胞移植治疗缺血性慢性心衰的研究，论文范文关键词：自体骨骼肌成肌细胞移植治疗缺血性慢性心衰的研究
自体骨骼肌成肌细胞移植治疗缺血性慢性心衰的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：在美国和欧洲等西方社会，缺血性心脏病及其所导致的慢性心衰都是发病率和死亡率很高的疾病。在中国，近年来由于医疗条件的改善和医疗护理水平的不断提高，使人口老龄化逐年加剧，心肌梗死后患者的存活率显著增加，所以心衰的发病率也有逐年攀升的趋势。缺血性心脏病因缺血性损伤导致心肌细胞坏死，凋亡，由于一般认为心肌细胞是终末分化细胞，不能进行有效的心肌再生，所以损伤心肌只能由纤维组织增生修复，造成心肌纤维化和心肌瘢痕形成，以及周围存活心肌细胞的代偿性肥大，改变了心室的几何构架，这一过程即为心室重构。而存活的心肌组织最终会代偿失调导致充血性心力衰竭。所以心室重构是充血性心力衰竭这一疾病发展过程中最为重要的病理特征之一。因此，如何促进缺血坏死区心肌细胞再生，防止心室重构，已成为防止缺血性心脏病所致心力衰竭发生的关键。尽管近年来外科手术，内科药物和介入治疗手段的不断发展，能够改善心肌缺血和心衰的症状，但并不能使已坏死的心肌细胞再生，也不能防止进一步的心肌退化。针对上述原因，一种将具有再生分化能力（文章此处忽略..）的细胞移植到受损心肌组织中，旨在替代坏死的心肌细胞，改善心脏功能的"细胞移植疗法"为缺血性心脏病乃至心衰的治疗开辟WP=4一条新径。在多种供体细胞来源中，具有潜在增生分化能力，能够修复损伤骨骼肌的骨骼肌成肌细胞因其具有收缩性，增殖能力强，自体细胞来源广泛，无需免疫抑制等优势而受到医学科研界的广泛关注。我们此项实验的目的是证明自体骨骼肌成肌细胞移植是否能够使由于慢性重复性冠脉微栓塞法而造成心力衰竭犬的心脏恢复功能。方法：总共22只雌雄性别的杂种犬(年龄：1岁，体重：25～30公斤)首先接受第一次开胸手术植入用于慢性实验测量心功能的实验装置。待动物完全恢复并经过清醒实验右侧卧位训练后，进行第一次清醒实验记录数据作为正常对照值(具体方法见下述)。然后开始进行重复性冠状动脉微栓过程建立慢性心肌梗塞进而发展为心衰，为期约4～８周，每天约有25000～50000个微球通过插入左侧冠脉前降支的微型软导管被注射入动脉。当血液动力学指标LVEDP≥20mmHg，LVPdP/dt≤2200mmHg/s并保持稳定时，可认为建立了稳定的慢性心衰。进行第二次清（此处忽略..）醒实验记录心衰后的实验数据。然后，治疗组1(n=5)接受二次开胸手术，于直视下使用25号注射用针将骨骼肌成肌细胞多点均匀注射到心梗区域内。注射移植细胞于移植手术前约2周经自体骨骼肌组织活检取材后分离，培养获得(下同)。治疗组2(n=6)也为细胞移植组，采用经皮股动脉穿刺导管置入的方法将移植细胞于左心室腔内经心内层肌注射到心梗区内。对照组1(n=3)和对照组2(n=5)分别采用与治疗组1和治疗组2相同的注射方法，注射与细胞悬液同等体WP=5积的生理盐水。对照组3(n=3)则采用导管置入法注射移植标记有BrdU的骨骼肌成肌细胞，以提供细胞移植成功的细胞组织学证据。移植手术后的8周内，每2周进行一次清醒实验。过程如下：将所有植入受试犬心脏的测压导管，电极线连接到相应仪器上，在清醒状态下记录所需要得各项实验数据：包括血液动力学参数(包括左心室压力及其微分，左心室舒张期末压力，主动脉压力等)，心脏机械功能指标(左心室压力容积环及其收缩期末压力-容积关系)，每4周进行一次超声心动实验。分别与正常及心衰后的实验数据相比较来说明细胞移植后左心室重构改善与否以及左（略..）心室功能的变化。实验完成后，处死动物，心肌组织取材做组织病理学或抗BrdU免疫组化染色观察(对照组3的动物于细胞移植后4周处死)。实验获得的所有数据汇总后经统计检验，分别进行组内不同时间点，以及治疗组和对照组之间的比较。设P0.05为差异具有显著性。结果：(1)、骨骼肌成肌细胞的移植数量和活性：实验组1，平均每只动物心脏内注射细胞3.622×108个；实验组2，平均每只动物心脏内注射细胞5.406×108个。于体外培养条件下观察，所有骨骼肌成肌细胞均为Desmin染色阳性，且具有分化能力。(2)、慢性心衰的建立：经过4～8周的冠状动脉微粒栓塞后，所有犬均达到不同程度的心肌梗死进而发展为慢性心衰。具体表现为，LVdP/dt由3076.3±205.8mmHg/s降至2271.0±119.3mmHg/s(P0.05)，LVSP，MAP也出现明显的降低，而LVEDP由11.2±2.7mmHg升高到WP=620.6±4.0mmHg(P0.05)。超声心动图观察发现，心衰建立后，于左心室乳头肌水平短轴图像测量，心室腔收缩末期面积由7.8±1.1cm2增至10.6±1.5cm2(P0.05)，舒张末期面积由16.1±2.4增至17.6±2.4cm2(P0.05),而面积缩小率由51.3±3.4%减小到40±（此处忽略..）2.4%(P0.05)。左心室压力-容积曲线出现明显的变化，收缩压力降低，曲线及左心室收缩期末的压力容积关系(ESPVR)向右移动，提示左心室扩张。(3)、细胞移植对慢性心衰后心功能的影响：治疗组1，采用开胸手术直视下注射细胞的方法，LVdP/dt在术后2周迅速升高，达到2710.8±105.1，随后在第4，6周仍保持较高的水平，分别为2611.2±133.5和2456.9±130.8，与细胞移植前数据相比较具有统计学意义(P0.05)。LVSP与MAP也于术后2周，4周明显升高，并且与细胞移植前的对应数值相比具有显著性差异，但这一

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