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蜘蛛丝蛋白基因的合成及其串联体的重组表白

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毕业论文范文题目:蜘蛛丝蛋白基因的合成及其串联体的重组表白,论文范文关键词:蜘蛛丝蛋白基因的合成及其串联体的重组表白
蜘蛛丝蛋白基因的合成及其串联体的重组表白毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:蜘蛛丝(spidersilk)是一类天然蛋白质纤维,存在独特的机械机能(高强度、高弹性跟高断裂功等)跟卓越的生物学特点(生物可降解性跟与生物组织的相容性等)。它在生物医学、材料、纺织跟军事等范畴都有着很大潜在的利用价值。然而因为蜘蛛无奈驯养跟天然蜘蛛丝产量少等起因,大量获取蜘蛛丝惟有通过基因工程手段,才干满意蜘蛛丝潜在的利(此处忽略..)用须要。本工作根据已报道的蜘蛛丝蛋白的氨基酸序列,结合蜘蛛丝蛋白的模块构造特点跟功能的关联,优化设计了一种新型蜘蛛丝蛋白单元,它实际上集高强度、高弹性等蜘蛛丝重要特点于一体。编码该蛋白单元的基因SPS通过引物重叠延长法得到了全长合成,为405bp,并通过了测序验证。将SPS基因克隆到pET-32a(+)中,与其N端的硫氧还蛋(略..)白(TrxA)融合构建成表白载体pET-SPS1;进一步通过同尾酶法构建了蜘蛛丝蛋白基因SPS的多个串联体表白载体pET-SPS(2~8)。而后,所有的含重组蜘蛛丝蛋白基因的表白载体在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了引诱表白,并且通过pET-32a(+)本身携带的His标签亲合层析纯化了融合表白的重组蜘蛛丝蛋白。成果表明,所有在大肠杆菌中融(略..)合表白的重组蜘蛛丝蛋白多少乎全部可溶。其中,1~3串联体蜘蛛丝蛋白基因可能有效表白,但跟着串联数的进一步增加,蜘蛛丝蛋白基因融合表白效力降落。另外,本工作进一步选用动物体系来表白重组蜘蛛丝蛋白。其中构建了含蜘蛛丝蛋白基因的动物表白载体pBI-SPS(5~7),通过冻融法将重组质粒转化到根癌农杆菌LBA4404感触态细胞中。而后,通(略..)过烟草叶盘农杆菌浸染跟抗性组织培养,得到了相应的转化再生植株。总之,本工作成功地获得按照意愿设计的一种新型蜘蛛丝蛋白基因,构建了它的大基因片段,并初步通过大肠杆菌跟动物表白体系来表白,为将来这种新型蜘蛛丝的利用研究打下了基本。


以上为本篇毕业论文范文蜘蛛丝蛋白基因的合成及其串联体的重组表白的介绍部分。
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