JBP485在大鼠体内药代能源学及接收与排泄机制的体内外研究

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JBP485在大鼠体内药代能源学及接收与排泄机制的体内外研究

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毕业论文范文题目：JBP485在大鼠体内药代能源学及接收与排泄机制的体内外研究，论文范文关键词：JBP485在大鼠体内药代能源学及接收与排泄机制的体内外研究
JBP485在大鼠体内药代能源学及接收与排泄机制的体内外研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目标:JBP485(cyclo-trans-4-L-Hydroxyprolyl-L-serine,环状-反式-4-左旋-羟脯氨酰-左旋-丝氨酸)是首次从日本抗肝炎药物Laennec(人胎盘水解产物)中提取出的一种二肽,目前已用化学方法人工合成。前期研究已证明,JBP485存在潜在的抗肝炎活性。因为内源性物质的烦扰使得肽类药物的测定始终是其药代能源学研究的一大瓶颈,本文旨在树破大鼠生物样品中JBP485浓度的HPLC跟LC/MS/MS分析方法,进而研究其在大鼠体内药代能源学,考察JBP485的重要排泄道路以及JBP485是否为肠道转运蛋白PEPT1跟肾脏转运蛋白PEPT2的底物,这对阐明JBP485与同一转运蛋白底物的其余药物间彼此作用的机制存在重要意思。方法:(1)RP-HPLC法。Agilen公司1200高效液相色谱仪,AgilentTC-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以甲醇-水(体积比5:95)为流动相,流速:0.7ml/min,紫外检测波长:203nm,柱温:20℃,以外标法定量。(2)LC/MS/MS法。Ag（略..）ilen1200高效液相色谱仪,伊利特HypersilODSC18色谱柱(5μm,2.1×150mm)。色谱柱设定温度:室温,流动相:0.1%甲酸水溶液:甲醇溶液(97:3,v/v),流速0.5ml/min,进样体积10μL。AB公司API3200质谱仪,离子源:电喷雾电离源(ESI),扫描方法:正离子扫描,多反应监测(MRM),电喷雾电压(IS):5400V,雾化气温度(TEM):610?C,气帘气压力(cur):0.14MPa,碰撞气(CAD):l4l/min,源内气流速(gas1):45l/min,源内气流速(gas2):30l/min,用于抉择离子检测定量分析的离子为m/z201.1→86.1(JBP485),m/z219.2.1→86.1(IS),碎裂电压:22V。(3)大鼠静脉打针给予JBP485(6.25、25、100mg/kg),灌胃给予JBP485(25mg/kg)跟门静脉给予JBP485(25mg/kg),收集0.017、0.05、0.083、0.167、0.333、0.5、1、2、4、6、8、10h的血浆跟静脉给药12h内不同时光间隔的尿、胆汁样品。静脉给予JBP485(25mg/kg)5、10、20min后断头处死大鼠,收集各个组织。(4)将于24孔板培养15天的Caco-2细胞用于药物摄取实验,分辨考察pH值、时光、温度、（此处忽略..）浓度以及Gly-Sar对JBP485在该模型中摄取的影响。(5)利用大鼠的新鲜肾脏组织切片,研究肾切片对JBP485的摄取情况,考察时光跟浓度以及Gly-sar对JBP485摄取的影响。成果:(1)HPLC法表明,JBP485的保存时光为6.9min,线性范畴为0.5～250μg/ml。日内RSD为3.27%,;日间RSD为3.16%,均匀回收率为97.55%,最低定量限为0.5μg/ml,回归方程为Y(peakarea)=11.81360+32.09828X,r2=0.9999(权重1/c2×103),LC/MS/MS法线性回归方程为Y=26.61737X+15.30483,r2=0.9979(权重1/c2×103),(2)JBP485的血浆打消半衰期t1/2为(2.67±0.4)h,生物利费用为(27.30±3.53)%,肾脏为其重要的排泄道路,静脉给药(25mg/kg)12h后JBP485经肾排泄量为给药量的25%,胆汁中为2%。(3)静脉给予JBP485后药物在肾脏中分布最多,肺、肝、血、脾、次之。(4)在Caco-2细胞模型摄取实验中,Caco-2细胞对JBP485的摄取在30min内随摄取时光推移呈线性增加,30min内未见摄取饱跟景象,Gly-Sar明显克制各时光点Caco-2细胞对JBP485的摄取。浓度依附性特（此处忽略..）异性摄取部分是一条饱跟曲线,打算Km=0.439mM,Vmax=1.622nmol/mgprotein/30min。4℃前提下JBP485的摄取与37℃前提下的摄取比拟明显降落。另外pH值也明显的影响Caco-2细胞对JBP485的摄取,在pH=6.0摄取量最大,在pH=8.5时摄取量最小。(5)肾切片实验中,大鼠新鲜肾脏组织切片对JBP485的摄取在15分钟内呈线性增加,且未达到饱跟,Gly-Sar明显的克制各时光点肾切片对JBP485的摄取。浓度依附性摄取也在1000μM内呈线性增加,Gly-Sar明显的克制各浓度点肾切片对JBP485的摄取。论断:(1)HPLC跟LC/MS/MS两种分析方法均简便、正确、专属性好。JBP485在大鼠体内的打消合乎开放二室模型一级能源学,组织分布较广,肾脏为其重要排泄道路;(2)Caco-2细胞模型跟肾切片实验中,PEPTs的特异性克制剂Gly-Sar竞争性克制了JBP485的摄取,因此JBP485是H+协同肽转运蛋白PEPTs的底物之一。

以上为本篇毕业论文范文JBP485在大鼠体内药代能源学及接收与排泄机制的体内外研究的介绍部分。

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