降血糖蛋白E2HSA的体外活性和体内药代动力学研究

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降血糖蛋白E2HSA的体外活性和体内药代动力学研究

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毕业论文范文题目：降血糖蛋白E2HSA的体外活性和体内药代动力学研究，论文范文关键词：降血糖蛋白E2HSA的体外活性和体内药代动力学研究
降血糖蛋白E2HSA的体外活性和体内药代动力学研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的:研究多肽类降血糖药物E2HSA的体外活性和动物体内药代动力学特点。方法:通过测定E2HSA和Exendin-4刺激胰岛瘤细胞(RINm-5F细胞)产生cAMP的量来反映其体外生物活性;建立化学发光酶联免疫检测法(CLEIA)测定猕猴血清中E2HSA和Exendin-4的浓度并对其进行方法学确证;研究比较E2HSA和Exendin-4在猕猴体内的药代动力学特征;采用硫酸铵盐沉淀法结合CLEIA研究E2HSA在猕猴体内的代谢转化和活性形式研究。结果和结论:1.用E2HSA和Exendin-4刺激RINm-5F细胞,使其与细胞上的胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体结合,孵育一段（文章此处忽略..）时间后,用细胞裂解液将细胞裂解,释放出第二信使cAMP,用自主研发的免疫试剂盒测定细胞裂解释放出的cAMP含量。随着受体激动剂E2HSA、Exendin-4浓度的升高,细胞产生的cAMP量逐渐增多。但当药物浓度增加到一定程度时,细胞产生的cAMP量达到一个平台期,可能是由于药物和细胞上的受体结合达到饱和状态。E2HSA和Exendin-4的EC50分别是9.12μmol·mL~(-1)和0.07μmol·mL~(-1),表明E2HSA生物活性比Exendin-4的生物活性低,推测其原因,可能是由于E2HSA中连接有白蛋白,体积大,和细胞受体结合时E2HSA空间位阻影响了其亲和力。2.（本文此处忽略..）建立了专属性好、准确、精密的CLEIA法分析生物样品中E2HSA和Exendin-4的含量,在E2HSA浓度2-500ng·mL~(-1)范围内与其它类型白蛋白无明显交叉反应,最低定量下限为2ng·mL~(-1),具有良好的线性关系。板内精密度为2.5%-7.2%,板间精密度为6.4%-15.2%,准确度为-3.0%-1.2%。样品稳定性实验表明,E2HSA3个质控浓度的血清样品在-80℃冻存6天稳定,精密度为3.2%-7.9%,准确度为-3.7%--10.1%,血清样品稀释50倍和100倍后无稀释效应。Exendin-4的标准曲线范围是1-100ng·mL~(-1),最低定量下限为100ng·mL~(-1),具有良好的线性关系。板内精密度和板间精密度为5.3%-11.6%和1.1%-14.1%,准确度（文章此处忽略..）为1.7%-7.0%。此方法能满足E2HSA和Exendin-4的临床前药代动力学研究要求。3.猕猴单次皮下注射0.3mg·kg~(-1)(39.3×10-10mol·kg~(-1))E2HSA后,清除半衰期是61.38h,AUC(0-t)是9272.91ng·h·mL~(-1),CL是32.15mL·h·kg~(-1),MRT(0-t)是168.72h,猕猴单次皮下注射15μg·kg~(-1)(42.97×10-10mol·kg~(-1))Exendin-4后,在6h后基本检测不到血药浓度,E2HSA的半衰期明显延长。4.硫酸铵盐沉淀法结合CLEIA法可以检测E2HSA进入动物体内的代谢转化情况,包括检测原形E2HSA的浓度和其代谢产物Exendin-4的浓度。E2HSA进入动物体内后,小分子Exen（文章此处忽略..）din-4逐渐从E2HSA上脱落下来。E2HSA在体内逐步转化成活性更高的形式Exendin-4发挥降血糖作用。

以上为本篇毕业论文范文降血糖蛋白E2HSA的体外活性和体内药代动力学研究的介绍部分。

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