伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究

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伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究

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毕业论文范文题目：伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究，论文范文关键词：伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究
伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：研究伤寒沙门菌耐药质粒pR_(ST98)在小鼠体内向大肠埃希菌的接合转移，比较质粒在体内外接合转移的异同及影响因素。方法：由于伤寒沙门菌是一种严格只对人类致病的病原菌，没有合适的动物模型，因此将伤寒沙门菌的耐药质粒pR_(ST98)导入遗传背景明确的鼠伤寒沙门菌低毒株RIA中，形成接合子pR_(ST98)／RIA，口饲BALB／c小鼠进行体内耐药质粒接合转移的研究。1．将伤寒沙门菌耐药质粒pR_(ST98)导入大肠埃希菌E.coliK_(12)W_(1485)(F~-)Rif~rLac~+，获得接合子pR_(ST98)／E.coliK_(12)W_(1485)，再以接合子pR_(ST98)／E.coliK_(12)W_(1485)为供体，将pR_(ST98)导入鼠伤寒沙门菌低毒株RIA，获得接合子pR_(ST98)／RIA。用药敏试验和质粒检测接合子的形成。2．用SS培养基分离培养未经人工感染小鼠体内的大肠埃希菌，生化反应鉴定获得的菌株，（此处忽略..）用药敏试验和质粒谱调查小鼠肠道细菌耐药和质粒携带状况。比较小鼠肠道分离菌株耐药谱和pR_(ST98)编码的耐药性差异，以此制备SS抗生素选择性培养基。3．20只5周龄BALB／c小鼠，雌雄各半，体重18-20g，每组5只随机分为4组，以低于pR_(ST98)／RIA半数致死量(LD_(50))的四种菌量(10~8、10~7、10~6、10~5CFU／ml)分别口饲4组小鼠。从第2天起至30天每天用SS抗生素选择性培养基分离小鼠肠道大肠埃希菌。用生化反应鉴定后药敏试验确定耐药谱，并进一步用质粒检测验证pR_(ST98)在小鼠肠道内发生的接合转移。结果：1．在体外伤寒沙门菌很容易将耐药质粒pR_(ST98)转移给大肠埃希菌E.coliK_(12)W_(1485)(F~-)Rif~rLac~+，接合子pR_(ST98)／E.coliK_(12)W_(1485)又可将pR_(ST98)转移给鼠伤寒沙门菌RIA，但在不同种属中pR_(ST98)接合难易程度不同，同一质粒在不同宿主菌中耐药标志（此处忽略..）的表达亦有差异。接合子pR_(ST98)／E.coliK_(12)W_(1485)中Sm和Gm耐药标志未表达，接合子pR_(ST98)／RIA中除Sm和Gm外，Cos的耐药标志亦未表达。2．从未经人工感染小鼠肠道分离了100株大肠埃希菌，所有菌株均有不同程度的耐药，其中对Ap的耐药率高达97％，Sm的耐药率为42％，但所有菌株对Akn和Cp均敏感。未发现分离的小鼠肠道菌与pR_(ST98)有相同的耐药谱，据此分别选择Cm和Cp两种抗生素制备SS抗生素选择性培养基。质粒检测未发现小鼠肠道菌有分子量与pR_(ST98)相近的耐药质粒存在。3．口饲pR_(ST98)／RIA后，第2天SS抗生素选择性培养基即可筛选到耐受pR_(ST98)编码抗药性的红色菌落，阳性率为40％(8／20)，第3天为65％(13／20)，第4天为80％(16／20)。第8、11和16天，菌量为10~8CFU／ml组小鼠各死亡1只，第13天菌量为10~7CFU／ml组小鼠死亡1只，至第30天共死亡4只。第30天抗生素选择（本文此处忽略..）性培养基分离菌株的阳性率为81％(13／16)。口饲pR_(ST98)／RIA菌量与各组小鼠间肠道菌阳性分离率未见有直接关系。经生化反应鉴定，分离的菌株均为大肠埃希菌。药敏试验显示阳性菌株的耐药谱发生改变，新出现的部分耐药标志与pR_(ST98)的耐药谱相符，但有些抗生素的耐药标记未能全部表达。质粒检测显示体内形成的接合子均含耐药质粒pR_(ST98)。结论：1．在体外耐药质粒pR_(ST98)可以从伤寒沙门菌S.typhi转移给大肠埃希菌E.coliK_(12)W_(1485)，接合子pR_(ST98)／E.coliK_(12)W_(1485)又可将质粒转移给鼠伤寒沙门菌S.typhimuriumRIA。2．从未经人工感染小鼠体内分离的大肠埃希菌药敏试验发现，所有菌株对抗生素均有不同程度的耐药。3．在小鼠体内pR_(ST98)／RIA很容易发生接合转移，经生化反应证实获得的接合子均为大肠埃希菌。4．伤寒沙门菌耐药质粒pR_（略..）(ST98)在动物体内外的接合难易程度不同，同一质粒在体内外不同宿主菌中耐药标志表达亦有差异，显示耐药质粒表达的多样性和复杂性。

以上为本篇毕业论文范文伤寒沙门菌耐药质粒pRST98在小鼠体内向大肠埃希菌接合转移的研究的介绍部分。

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