分子生物学快速鉴定分枝杆菌方法学比较及其耐药研究

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分子生物学快速鉴定分枝杆菌方法学比较及其耐药研究

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毕业论文范文题目：分子生物学快速鉴定分枝杆菌方法学比较及其耐药研究，论文范文关键词：分子生物学快速鉴定分枝杆菌方法学比较及其耐药研究
分子生物学快速鉴定分枝杆菌方法学比较及其耐药研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：应用评价4种分枝杆菌分子生物学快速检测方法,同时比较2种分枝杆菌药敏方法,旨在为临床选择最准确、快速的分枝杆菌鉴定及药敏方法。方法：收集204株临床疑似分枝杆菌,接种于罗氏培养基培养37℃孵育,挑取阳性单个菌落进行抗酸染色和胶体金免疫层析法来初步区分结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌。同时以16SrRNA基因测序方法为标准,采用hsp65基因测序、hsp65PCR-RFLP和HAIN基因分型等方法比较鉴定菌株；分枝杆菌的药敏结果采用试管比例法和分格平板比例法两种方法进行比较。结果：罗氏培养基上204株临床疑似分枝杆菌生长良好,抗酸染色均为阳性。胶体金免疫层析法结果显示有（本文此处忽略..）113株结核分枝杆菌及91株非结核分枝杆菌。16SrRNA基因测序方法结果为：113株结核分枝杆菌,40株胞内分枝杆菌,15株龟分枝杆菌复合群,8株偶发分枝杆菌,6株堪萨斯分枝杆菌复合群,5株鸟分枝杆菌,4株耻垢分枝杆菌,3株草分枝杆菌,2株瘰疬分枝杆菌,2株地分枝杆菌,2株不产色分枝杆菌,2株戈登分枝杆菌,1株金色分枝杆菌和1株新金色分枝杆菌。与16SrRNA基因测序相比较,hsp65PCR-RFLP结果3株草分枝杆菌、1株偶发分枝杆菌及1株不产色分枝杆菌与其不符；其余菌株鉴定结果一致,符合率为97.5%(199/204)；hsp65基因测序结果1株胞内分枝杆菌、1株爱尔兰分枝杆菌及1株地分枝杆菌与16SrRNA测序结果不符,其余菌株鉴（略..）定结果与其一致,符合率为98.5%(201/204)；HAIN基因分型结果除了6株菌株只能鉴定为分枝杆菌属以外,其余198株分枝杆菌均能鉴定到种,鉴定符合率为97.1%。试管比例法结果显示113株结核分枝杆菌中耐异烟肼耐药率78.76%(89/113),利福平耐药率65.49%(74/113),乙胺丁醇耐药率41.59%(47/113),链霉素耐药率57.52%(65/113)；其中泛耐药株百分比54.87%(62/113),多重耐药株百分比16.81%(19/113),敏感株百分比仅为12.39%(14/113)。13种非结核分枝杆菌对常见一线抗结核药物都有一定程度的耐药。与试管比例法相比,分格平板琼脂比例法异烟肼耐药符合率为96.63%(86/89),利福平耐药符合率为97.29%(72/74),链霉素耐药符合率为100%,乙胺丁醇耐药符合率为97.87%(46/47)。1株胞内分枝杆菌及1株堪萨斯分枝杆菌分格平板琼脂比例法（文章此处忽略..）药敏结果不符合,其余非结核分枝杆菌结果均符合,符合率97.80%(89/91)。结论：1、胶体金免疫层析法能初步快速区分结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌。2、16SrRNA基因测序不能进一步鉴定部分临床常见菌株(如堪萨斯分枝杆菌复合群和龟分枝杆菌复合群),不推荐为临床首选方法。3、推荐HAIN基因分型作为临床最常见分枝杆菌鉴定的首选方法；对于HAIN基因分型不能鉴定的少见非结核分枝杆菌,hsp65和16SrRNA基因测序可进一步鉴定；hsp65PCR-RFLP可作为其他分子生物学方法的验证方法及补充新型酶切条带指纹图谱。4、首选试管比例法作为分枝杆菌药敏方法。分格平板琼脂比例法药敏结果符合率（略..）较高、操作方便,可以批量生产用于临床分枝杆菌药敏试验。

以上为本篇毕业论文范文分子生物学快速鉴定分枝杆菌方法学比较及其耐药研究的介绍部分。

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