多重耐药的宋内志贺菌耐药机制和遗传多样性研究

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多重耐药的宋内志贺菌耐药机制和遗传多样性研究

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毕业论文范文题目：多重耐药的宋内志贺菌耐药机制和遗传多样性研究，论文范文关键词：多重耐药的宋内志贺菌耐药机制和遗传多样性研究
多重耐药的宋内志贺菌耐药机制和遗传多样性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：志贺氏菌是引起胃肠道感染主要病原菌之一,主要通过粪口途径传播,食物和水源污染是常见原因。全球每年发病人约为1.647亿,其中1.632亿发生在发展中国家,尤其在儿童、老人和免疫受损的病人中多发。死亡的110万人中有69%为5岁以下的儿童。志贺菌属分为A(痢疾志贺菌)、B(福氏志贺菌)、C(鲍氏志贺菌)、D(宋内志贺菌)四个群。发达国家流行的主要是宋内志贺菌,而发展中国家虽然长期以来流行的为福氏志贺菌,但近年来宋内志贺菌呈明显增加的趋势,并成为优势菌群。合理的抗生素治疗可减轻病情的严重程度、缩短病程且防止菌痢进一步传播。但同时也增加了对抗生素的耐药性,耐药性可通过接合转移等方式在不同细菌中水平传递,导致产酶菌的广泛耐药,包括对多种β-内酰胺类抗生素耐药;此外,也存在克隆的垂直传播。严重的耐药状况和复杂的耐药机制,给细菌性痢疾的临床治疗带来严峻的挑战。因此了解北京地区腹泻病原菌中宋内志贺菌的流行、耐药情况、耐药机制以及遗传差异的相关性,对本地区的流行耐药监测,指导临床合理用药,预防控制流行传播有着重要的意义。为此,我们做了以下研究:1.宋内志贺菌的分布特征、药敏试验及多重耐药菌的检测我们收集了自1990年1月-2007年12月我院就诊的腹泻患者中分离的1831株宋内志贺菌,用CLSI推荐的药敏琼脂纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B法)检测13种抗生素的耐药率。在2004年-2007年间收集的212株宋内志贺菌中筛选出多重耐药菌43株,以氨苄西林耐药(ampicilliesistant,Am（此处忽略..）~R)、复方新诺明耐药(trimethoprim+Sulfamethoxazoleresistant,Sxt~R)、头孢噻肟耐药(Cefotaximeresistant,Ctx~R)为主。用美国临床与实验室标准化委员会(ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI)推荐的纸片确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(Extend-Spectrumβ-Lactamases,ESBLs)、改良三维试验分别检测ESBLs和AmpC酶。1831株宋内志贺菌中,男女患者比例1.25:1;高发季节为7-9三个月;14岁以下的发病人数占总发病人数的57.82%;20岁以下的发病人数占总发病人数的71.64%。自2005年以来,宋内志贺菌在志贺菌属感染的比例明显升高。宋内志贺菌对复方新诺明、氨苄西林和头孢曲松的的耐药率较高,分别达到87.7%、23.0%和9.5%;对氟喹诺酮类、头孢吡肟、头孢美唑、氯霉素、磷霉素和庆大霉素的耐药率较低,分别为1.2%、2.5%、0.3%、3.7%、1.5%、1.7%,明显低于头孢曲松、头孢噻肟(P0.05)。自2000-2007年间,氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟耐药率升高趋势明显。43株多重耐药菌占20.28%(43/212),均为ESBLs阳性株,并未发现产AmpC酶株,两种方法检测ESBLs符合率为100%。证明北京地区多重耐药的宋内志贺菌以产ESBLs为主。2.产ESBLs的宋内志贺菌耐药基因研究收集2004-2007年我院门诊腹泻病人分离的多重耐药(Am~R、Sxt~R、Ctx~R)宋内志贺菌43株,使用天津金章微量细菌定量的药敏测试盒产（文章此处忽略..）品检测氨苄西林、头孢噻肟、头孢他啶、环丙沙星、复方新诺明的MIC。分别用TEM型、SHV型、CTX-M1群、CTX-M2群、CTX-M8群、CTX-M9群、OXA、PER的ESBLs编码基因的通用引物和测序引物及1、2类整合子引物5,CS、3,CS和hep74、hep51对产ESBLs菌株进行扩增,并将菌株进行质粒结合实验。结果显示携带CTX-M基因27株,其中CTX-M1群16株,CTX-M9群11株,占所有阳性分离株的62.79%(27/43);携带TEM基因18株,占41.86%(18/43),未检出SHV、OXA、PER基因。其中同时携带CTX和TEM基因的10株,占23.26%(10/43);其中同时携带CTX-M1群、TEM基因的菌株有4株,占9.30%(4/43);同时携带CTX-M9群、TEM基因的菌株有6株,占13.95%(6/43)。95.35%(41/43)宋内志贺菌携带2类整合子,扩增片段大约在2000bp;1株携带1类整合子,扩增片段大约在1600bp。测序后经GenBank(www.ncbi.nlm.nih.gov)的blast比对,CTX-M1群以CTX-M-15like为主,1株为CTX-M-64,1株为CTX-M-15;CTX-M9群以CTX-M-14型为主,10株为CTX-M-14型,1株为CTX-M-27型;TEM全部为TEM-1型。MIC试验中,CTX-M-15like、CTX-M-15、CTX-M-27、CTX-M-64都表现出对头孢他啶不同程度的耐药,与氨基酸Asp240→Gly的替换有关。2类整合子普遍携带基因盒dfrA1,sat1,aadAl。1类整合子携带基因盒dfrA17,aadA5。质粒结合实验成功率为92.7%。（略..）北京地区产ESBLs宋内志贺氏菌以携带CTX-M基因为主,主要为CTX-M1群和CTX-M9群,其次为TEM型。耐药基因大多通过质粒水平转移的方式进行传播。流行亚型为CTX-M-15like、CTX-M-14和TEM-1。携带CTX-M-27或CTX-M-64的两株宋内志贺菌在国内未见报道。3.多重耐药宋内志贺菌的遗传相关性分析菌株用XbaⅠ限制性内切酶消化后进行PFGE分型,确定43株多重耐药的宋内志贺菌的亲缘关系,找出流行株及流行规律。多重耐药的宋内志贺菌的检出率从2004年的4.44%增长到2007年34.09%。43株多重耐药宋内志贺菌全部为宋内志贺氏菌I相。PFGE分型结果显示97.6%(40/41)的为流行株。在北京地区至少有A～A5六个克隆株流行,分别占39.0%(16/41)、24.4%(10/41)、17.1%(7/41)、7.3%(3/41)、4.9%(2/41)、4.9%(2/41)。A1、A2、A3、A4、A5与流行株A的条带差异分别为1、2、2、3、4条。2006年以A和A1型为主,2007年以A型为主。A1型以携带CTX-M-15Like耐药基因为主,A3型以TEM-1为主。北京地区多重耐药的宋内志贺菌存在克隆株的传播。根据以上三个部分的研究,初步可以得出如下结论:北京地区宋内志贺菌感染以儿童及青少年为主,在志贺菌属感染的比例有增高的趋势。宋内志贺菌对头孢曲松、头孢噻肟、复方新诺明、氨苄西林的耐药率较高,且有上升趋势。多重耐药的宋内志贺氏菌有逐年上升的趋势,它的耐药机制以产ESBLs为主,未发现AmpC酶。ESBLs进一步分型以携带CTX-M型ESBLs为最多,其中以CTX-M-14、CTX-M（略..）-15like、TEM-1最为常见,部分菌株携带两种耐药基因。耐药基因大多通过质粒水平转移的方式进行传播。多数菌株携带2类整合子。携带CTX-M-27或CTX-M-64的宋内志贺菌在国内未见报道。多重耐药宋内志贺菌的97.6%为流行株。耐药宋内志贺菌存在耐药基因的水平传播,也有克隆株的垂直传播,应加强监控,指导临床正确防治。

以上为本篇毕业论文范文多重耐药的宋内志贺菌耐药机制和遗传多样性研究的介绍部分。

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