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三种赤眼蜂proPO-AS活性及免疫活性研究

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毕业论文范文题目：三种赤眼蜂proPO-AS活性及免疫活性研究，论文范文关键词：三种赤眼蜂proPO-AS活性及免疫活性研究
三种赤眼蜂proPO-AS活性及免疫活性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：赤眼蜂Trichogrammaspp是目前广泛应用的天敌昆虫,通过人工水平转染微生物沃尔巴克氏体,可诱导两性生殖的赤眼蜂改变其固有生殖方式,由两性生殖转变为产雌孤雌生殖,增加雌蜂比例,降低应用成本。鉴于昆虫体内酚氧化酶原激活系统(prophenoloxidase-activatingsystem,proPO-AS)在抵御异源物入侵、伤口愈合等重要生理反应中发挥重要作用,是昆虫最重要的体液免疫系统,而在赤眼蜂种间人工传递Wolbachia能否成功,可能与受体赤眼蜂自身proPO-AS活性大小有关。为探讨两者的相关性,明确赤眼蜂酚氧化酶特性,了解不同赤眼蜂种间免疫能力及对微生物Wolbachia免疫力差异原因,本研究以松毛虫赤眼蜂(Tri（略..）chogrammadendrolimi)、螟黄赤眼蜂(Trichogrammachilonis)、玉米螟赤眼蜂(Trichogrammaostriniae)为对象,开展了以下研究：1.在28℃条件下,以邻苯二酚为底物,设定不同pH值缓冲液的酶反应体系,测定3种赤眼蜂酚氧化酶的最适pH值；设定温度梯度,测定酶的最适温度；采用邻苯二酚、L-多巴、焦性没食子酸为底物,测定酶的底物专一性。结果表明,3种赤眼蜂酚氧化酶活性的最适pH值为4.5～5.0,强酸和碱性环境强烈影响酶的活性；松毛虫赤眼蜂和螟黄赤眼蜂酚氧化酶活性的最适温度为40℃,玉米螟赤眼蜂的最适温度为37℃,高温强烈抑制赤眼蜂酚氧化酶活性,可使酶迅速失活；3种赤眼蜂对邻苯二酚和L-多巴反应的Km值均较小,两者没有显（此处忽略..）著差异,与焦性没食子酸反应的Km值较大,表明三种赤眼蜂对邻苯二酚和L-多巴的亲和力较高。2.以3种供试赤眼蜂为对象,研究几种化学因子(Ca2+、昆布多糖、纤维素、右旋糖酐、脂多糖和丝氨酸蛋白酶抑制剂)对供试赤眼蜂匀浆液中proPO-AS的激活程度,分别测定PO活性值。结果表明,3种赤眼蜂匀浆液中proPO-AS的激活需要Ca2+的参与,在Ca2+浓度为0.03mol/L时激活作用达到最大值；Ca2+和PMSF加样顺序不同会影响PO活性,在玉米螟赤眼蜂匀浆液中先加入Ca2+,后加入PMSF,可明显抑制PO活性(P0.05),而先加PMSF后加Ca2+,则不表现上述的抑制作用。4种葡聚糖对赤眼蜂匀浆液proPO-AS的激活,其中昆布多糖和脂多糖能显著的增强PO活性,而纤维（文章此处忽略..）素和右旋糖苷对PO活性的作用均显著低于对照。表明不同类型的葡聚糖对proPO-AS且有完全不同的激活作用,即赤眼蜂proPO-AS对不同类型的葡聚糖可做出选择性反应。3.设定相同寄主赤眼蜂、不同寄主赤眼蜂、同寄主不同虫态以及不同生殖方式的赤眼蜂,测定其对Wolbachia菌悬液的免疫活性,寻求免疫能力较低的特定虫态的蜂种,为Wolbachia在赤眼蜂间的人工转染技术提供理论依据。结果表明,其免疫活力依次为：玉米螟赤眼蜂螟黄赤眼蜂松毛虫赤眼蜂；寄主为米蛾或柞蚕的两种赤眼蜂对Wolbachia的免疫能力无显著差异(P0.05)；研究证实,赤眼蜂蛹的PO活性值显著低于赤眼蜂成虫(P0.05),以松毛虫赤眼蜂为最；对于不同生殖方式蜂种,人工转染Wobachi（本文此处忽略..）a至赤眼蜂体内共生后,降低了对Wolbachia菌悬液的免疫活性,其具体机理尚不明确。4.Wolbachia细菌细胞表面脂多糖LPS为敏感信号分子,赤眼蜂体内存在特定蛋白识别该分子。本研究采用昆布多糖沉淀法,分离3种赤眼蜂的识别分子-脂多糖结合蛋白,经SDS-PAGE电泳后检测,测定沉淀后的粗提液PO活性。通过此法获得的3种赤眼蜂粗提液蛋白分子量约在40kD左右,但电泳背景较重,主带不够明晰。经昆布多糖沉淀后的粗提液可以被钙离子激活,表明离心未能完全沉淀脂多糖结合的蛋白。需要完善提取蛋白的方法,以获得明晰的蛋白主带。

以上为本篇毕业论文范文三种赤眼蜂proPO-AS活性及免疫活性研究的介绍部分。

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